白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特对小鼠气道炎症的抑制作用

[目的]探讨白三烯受体1拮抗剂孟鲁斯特(montelukast,MK)抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制.[方法]致敏的BALB/c小鼠持续吸入10 g/L雾化卵白蛋白(OVA)30 min,OVA吸入前2 d开始连续3 d或5 d尾静脉给予MK或生理盐水(saline),OVA吸入后24 h及72 h取材,瑞氏染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)中炎症细胞的渗出情况;ELISA方法检测血清、BALF和肺组织中有关细胞因子水平;HE、刚果红染色观察肺组织炎症细胞的渗出;免疫组化染色观察血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达;原位杂交研究IL-5 mRNA的变化.[结果]给予MK 5 d减少BALF嗜酸性粒细胞渗出达90%以上,嗜酸性粒细胞减少随MK剂量(10、25、62.5 mg/kg)的增加呈量效关系.ELISA结果表明给予3 d MK使肺、血清和BALF中IL-5、IL-4水平显著降低,肺IL-13含量也明显减少(P＜0.05),但MK组肺组织eotaxan下降与saline组比较无明显差异(P＞0.05).免疫组化显示MK组肺组织VCAM-1和eotaxin表达比saline组明显减弱;原位杂交可见MK组肺组织IL-5 mRNA的表达比saline组减弱.[结论]MK减轻气道炎症,可能通过抑制VCAM-1表达和IL-5、IL-4、IL-13等细胞因子分泌起作用.急性哮喘中应用大剂量MK抗炎治疗值得进一步探讨.     

标准化屋尘螨疫苗免疫治疗对变应性支气管哮喘的疗效

目的评价标准化屋尘螨疫苗治疗变应性支气管哮喘(简称哮喘)的临床疗效和安全性。方法按照多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照的方法,2001年10月至2002年3月将来自广州医学院第一附属医院、沈阳军区总医院、苏州儿童医院的轻至中度变应性哮喘患者132例分为治疗组和对照组,每组66例。治疗组皮下注射标准化氢氧化铝吸附的缓释型屋尘螨疫苗,对照组皮下注射二盐酸组胺,治疗时间为1年。从各组药物的起始浓度开始,按4个以10倍递增的浓度每周注射1次(治疗组:100、1 000、10 000、100 000 SQ-U/ml,对照组:0.01、0.1、1.0、10μg/ml。100 000 SQ-U/ml的屋尘螨疫苗含9.8μg/ml 主要致敏蛋白 Der P1)。前3个浓度的每种浓度每周依次注射剂量为0.2、0.4、0.8 ml,共9周,第10～14周每周依次注射最高浓度的0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 ml,第15周达1 ml,并以此剂量渐延长注射间隔,按每2、4、6周各注射1次,1至26周末为剂量递增阶段(第1阶段,简称 H_1),之后保持每6周注射1次至治疗结束,进入剂量维持阶段(第2阶段,简称 H_2)。患者在每次注射后,必须在诊室留观30 min。结果 132例患者入选,129例(治疗组64例,对照组65例)完成1年的治疗,其中3例中途退出。两组基线期的所有临床及实验室指标具有可比性。对每4周计算的日均哮喘症状计分观察,从第29～32周开始两组患者症状计分开始出现差异,治疗组日均哮喘症状计分为(0.17±0.33)分,对照组为(0.39±0.74)分,两组比较差异有统计学意义(Z=2.031,P<0.05),至治疗结束。治疗组 H_2的症状计分为(0.19±0.27)分,与 H_1[(0.29±0.39)分]比较差异有统计学意义(Z=2.923,P<0.01),而对照组 H_2的症状计分为(0.40±0.68)分,与 H_1[(0.45±0.62)分]比较差异无统计学意义(Z=1.885,P>0.05)。哮喘总体病情、发作严重程度、发作频率的自我评估改善率,治疗组分别为96.9%、95.3%、95.4%,对照组分别为80.0%、75.4%、83.1%,两组比较差异有统计学意义(x~2分别为13.246、11.576、16.204,P 均<0.01)。治疗组 H_2每周日均用药计分为(0.20±0.36)分,与 H_1[(0.33±0.67)分]比较差异有统计学意义(Z=3.344,P<0.01);而对照组 H_2计分为(0.35±0.96)分,与 H_1[(0.32±0.95)分]比较差异无统计学意义(Z=0.744,P>0.05)。治疗1年后的晨间和夜间最大呼气流量占预计值百分比(PEF 占预计值%)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_1占预计值%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC 占预计值%)、第一秒用力呼气容积/肺活量比值(FEV_1/FVC)及 FEV_1下降20%时吸入组胺的累积剂量(PD_(20)-FEV_1),治疗组分别为(97±17)%、(98±18)%、(91±11)%、(98±9)%、(82±10)%、2.35(7.9)μmol,对照组分别为(99±19)%、(100±19)%、(90±14)%、(99±13)%、(82±9)%、1.80(7.8)μmol,两组比较差异无统计学意义(t 值为0.170～0.630,Z=0.264,P 均>0.05)。经治疗后,屋尘螨皮肤指数(SI)在治疗组为1.2±0.5,对照组为1.5±0.6,两组比较差异有统计学意义(t=2.395,P<0.05);血清屋尘螨 sIgE 在治疗组为76.80(97.0)kU/L,对照组为66.50(99.3)kU/L,两组比较差异无统计学意义(Z=0.232,P>0.05)。按欧洲变态反应和临床免疫学会(EAACI)标准分级的全身不良反应发生率治疗组为5.7%,对照组为1.8%,两组比较差异有统计学意义(x~2=4.705,P<0.05),但大部分反应发生于注射后30 min 内,且症状轻微,并对治疗反应良好,未出现一例严重不良反应。结论采用标准化屋尘螨疫苗进行1年的特异性免疫治疗,可以显著改善轻至中度变应性哮喘患者的症状,减少合并用药量,降低屋尘螨皮肤敏感性。遵守 EAACI 免疫治疗指南要求,治疗安全。     

尘螨抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨屋尘螨（Dermatophagoides pteronyssinus，Derp）抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法使支气管上皮细胞BEAS-2B暴露于系列不同浓度（0．02、0．2．2、20μg／ml）的Derp抗原24h至96h，分别观察各时间点细胞的表现，然后用酶联免疫法（ELISA）检测其细胞上清MCP-1的浓度表达。结果正常为未加Derp抗原。表现为单层细胞完全平铺；实验各组在抗原的刺激下，表现为随着浓度和时间的增加，细胞逐渐变瘦长，细胞间距逐渐增大；在无抗原刺激因素培养条件下的对照组，MCP-1释放水平很低，而在加入Derp抗原组，引起细胞分泌MCP-1蛋白水平的显著增加，并随着时间和浓度增加，MCP-1蛋白的表达水平呈上升趋势，特别是在高浓度组，即20μg／ml抗原组，各时间点MCP-1的表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Derp抗原刺激气道上皮细胞，引起支气管上皮损伤和脱落等气道炎症反应，激发单核巨噬细胞产生大量的MCP-1，促成和加重气道炎症反应，因此认为MCP-1可能参与哮喘疾病的某些过程。     

白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特对小鼠气道炎症的抑制作用

【目的】探讨白三烯受体1拮抗剂盂鲁斯特（montelukast，MK）抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制。【方法】致敏的BALB／c小鼠持续吸入10g／L雾化卵白蛋白（OVA）30min，OVA吸人前2d开始连续3d或5d尾静脉给予MK或生理盐水（saline），OVA吸入后24h及72h取材，瑞氏染色观察支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid．BALF）中炎症细胞的渗出情况；ELISA方法检测血清、BALF和肺组织中有关细胞因子水平；HE、刚果红染色观察肺组织炎症细胞的渗出；免疫组化染色观察血管内皮细胞黏附分子-1（VCAM-1）和嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin）的表达；原位杂交研究IL-5 mRNA的变化。【结果】给予MK5d减少BALF嗜酸性粒细胞渗出达90％以上，嗜酸性粒细胞减少随MK剂量（10、25、62．5mg／kg）的增加呈量效关系。ELISA结果表明给予3dMK使肺、血清和BALF中IL-5、IL-4水平显著降低，肺IL-13含量也明显减少（P〈0．05），但MK组肺组织eotaxin下降与saline组比较无明显差异（P〉0．05）。免疫组化显示MK组肺组织VCAM-1和eotaxin表达比saline组明显减弱；原位杂交可见MK组肺组织IL-5 mRNA的表达比saline组减弱。【结论】MK减轻气道炎症．可能通过抑制VCAM-1表达和IL-5、IL-4、IL-13等细胞因子分泌起作用。急性哮喘中应用大剂量MK抗炎治疗值得进一步探讨。