牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性的研究

采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs),经体外鉴定、扩增后构建PDLSCs细胞膜片,并通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)对PDLSCs细胞膜片形态学进行检测。此外,细胞膜片厚度及膜片中细胞密度也被检测。结果:PDLSCs成功被分离、培养、鉴定,并且PDLSCs体外培养2周后,获得白色膜状PDLSCs细胞膜片。倒置显微镜下观察显示,细胞复层生长,细胞呈典型的纺锤状。体式显微镜下观察显示,     

头颈部侵袭性纤维瘤9例及文献复习

目的:探讨头颈部侵袭性纤维瘤的临床表现、病理特征、治疗方式及预后.方法:根据2005年世界卫生组织的肿瘤类指导原则,回顾性分析2008 ～ 2012年间收治9例头颈部侵袭性纤维瘤的临床资料并复习相关文献.结果:发病部位以颈部(3例)、下颌下区(2例)最为常见,其次是上颌骨、颧部、眶下区、腮腺各1例,对9例患者都实施手术切除,4例患者因肿瘤已侵犯头颈部重要结构,无法获得阴性切缘,其中1例患者发生恶变,接受放射治疗,另2例术后未接受综合治疗,术后复发,所有病例无远处转移,随访时间为6 ～51个月.结论:头颈部侵袭性纤维瘤诊断主要依靠术后病理,彻底手术切除是治疗并减少复发的主要手段,对于复发或难以完整切除的病例可配合放化疗,且术后长时间密切随访.     

吸烟饮酒对不同年龄OSCC患者预后的影响

目的 通过分析口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者的临床资料,讨论吸烟饮酒对不同年龄OSCC患者预后的影响。方法 收集2010年6月—2021年6月西安交通大学口腔医院颌面肿瘤外科收治的215例OSCC患者病例资料进行回顾性分析,将年龄≤45岁的患者定义为青年组患者,将年龄＞45岁的患者定义为中老年组,根据是否有吸烟饮酒史进一步分组,通过分析无瘤生存率、无远处转移生存率和总生存率对患者预后进行评估。结果 OSCC所有纳入病例中,青年组舌或其他位置恶性肿瘤发病率显著高于中老年组患者(P<0.05),且OSCC临床分期和分化程度与预后指标均显著相关(P<0.05);预后分析发现青年组患者吸烟饮酒史和临床分期与预后显著相关(P<0.05),中老年组患者单因素分析发现OSCC临床分期(P<0.05)与预后相关而多因素分析无相关性(P>0.05);生存分析发现青年组患者中吸烟饮酒是造成不良预后的危险因素,中老年组中无相关性。结论 吸烟饮酒史对青年患者预后有较大影响,临床上应对具有吸烟饮酒史的青年OSCC患者高度关注。     

颞下颌关节骨关节炎关节上下腔内改变的临床研究

目的 探讨颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）关节上、下腔软硬组织的改变。方法 选取2019年1月至2022年3月于西安交通大学口腔医院口腔颌面外科行颞下颌关节成形术治疗的TMJOA患者19例（20侧）为研究对象。先行关节上腔内窥镜检查并清理上腔部分病变,根据关节盘完整性,处理关节下腔病变;并对关节上、下腔内的改变情况进行分析和讨论。结果 20侧上腔内至少存在骨赘、松散小骨体和关节结节踝突骨质硬化3种不同程度病变;20侧髁突骨质病变均符合影像学检查,髁突和关节结节表面软骨出现退变;但影像学检查无法观察到髁突病变与关节盘粘连情况。结论 TMJOA患者关节上腔内普遍存在急、慢性滑膜炎,上腔内其他病理改变符合骨关节炎表现。TMJOA患者反复疼痛不适可能与髁突骨质病变（侵蚀破坏、骨刺、骨赘等）逐渐与关节盘粘连引起刺激相关。     

初步探索miR-27b-3p在普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤过程中的作用

目的 研究miR-27b-3p在普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤（infantile hemangioma,IH）的作用机制。方法用0、15、30、45、60、90μM普萘洛尔处理人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）,检测最佳浓度。采用实时PCR检测miR-27b-3p及凋亡因子mRNA表达,通过Western blot法检测凋亡相关蛋白表达,利用双荧光素酶报告检测miR-27b-3p与Apaf-1的靶向关系。结果 30μM普萘洛尔的最佳浓度作用后,miR-27b-3p表达下调,而Apaf-1、PARP、Caspase-9和Caspase-3表达上调,与敲除miR-27b-3p后结果相一致。上调miR-27b-3p后,细胞凋亡水平和凋亡因子表达被抑制。targetscan.org基因数据库分析发现miR-27b-3p与Apaf-1mRNA的3’UTR匹配,荧光素酶实验结果显示miR-27b-3p与Apaf-1具有靶向关系。结论 miR-27b-3p靶向抑制Apaf-1降低细胞凋亡水平,干扰普萘洛尔疗效。     

牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性的研究

目的:探讨牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性.方法:采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs),经体外鉴定、扩增后构建PDLSCs细胞膜片,并通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)对PDLSCs细胞膜片形态学进行检测.此外,细胞膜...     

聚乙酸-聚乙醇酸共聚物复合同种异体细胞修复软骨缺损

背景:以自体骨髓间充质干细胞和软骨细胞作为种子细胞修复软骨缺损可达到理想效果,但存在细胞数量不足及二次创伤等问题。目的:观察同种异体骨髓间充质干细胞和软骨细胞与聚乙酸-聚乙醇酸共聚物复合修复关节软骨的可行性。方法:将15只新西兰大白兔随机分为实验组、对照组、空白组,制作关节软骨缺损模型,分别于骨缺损处植入同种异体骨髓间充质干细胞和同种异体软骨细胞与聚乙酸-聚乙醇酸共聚物复合体、自体骨髓间充质干细胞和自体软骨细胞与聚乙酸-聚乙醇酸共聚物复合体、聚乙酸-聚乙醇酸共聚物材料。结果与结论:术后12周苏木精-伊红及Masson三色染色显示,实验组软骨缺损处可见软骨细胞,呈圆形或多角形,柱状排列,软骨陷窝形成明显,可见大量细胞外基质沉积,修复组织显示出透明软骨样,与周围软骨结合好,与底层骨结合紧密;对照组与实验组无明显差别;空白组软骨缺损处可见纤维样细胞。说明同种异体骨髓间充质干细胞和软骨细胞与聚乙酸-聚乙醇酸共聚物复合可修复关节软骨缺损。     

人骨髓间充质干细胞/细胞外基质复合体用于骨缺损再生修复的研究

目的:评估人骨髓间充质干细胞/细胞外基质复合体(C-BMSC)的骨缺损再生修复能力。方法:体外构建C-BMSC,通过大体观察、HE染色、扫描电镜进行组织形态学检测;TUNEL染色法检测细胞凋亡水平;免疫荧光染色和PCR法检测成骨相关因子的表达水平;大鼠颅骨缺损模型评估C-BMSC体内骨缺损再生修复能力。结果:组织形态学显示5 d组C-BMSC的细胞外基质(ECM)最丰富,ECM将细胞完全包裹,ECM纤维粗壮,小分子物质附着;TUNEL染色结果提示3 d与5 d组细胞凋亡数量接近,而7 d时细胞凋亡显著增加(P<0.001);PCR结果表明C-BMSC对ALP、COL-1、Runx2和OCN表达均高于细胞膜片(P<0.05);免疫荧光结果显示C-BMSC中ECM对ALP、COL-1、BSP表达均呈阳性;大鼠颅骨移植实验结果表明C-BMSC组骨体积与软组织体积比显著高于空白组。结论:本研究证明C-BMSC具有良好的成骨分化能力,这为骨缺损再生修复提供了一种新的策略。     

骨髓间充质干细胞向牙髓组织迁移体内模型的构建

目的：构建一种骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）向牙髓等口腔组织迁移分化的体内模型,为进一步研究BMMSCs迁移、归巢机制从而诱导其修复、再生口腔组织奠定基础。方法：将第1代绿色荧光蛋白（Green flurensence protein,GFP）转基因小鼠的BMMSCs与野生型C57BL6小鼠的全骨髓细胞按一定比例混合后,尾静脉注射入亚致死量照射24h后的16只同品系小鼠体内（GFP-BMMSCs：2×105/只;BMCs：2×106/只）,28d后随机选取6只嵌合小鼠,检测其股骨BMMSCs中GFP＋BMMSCs细胞的比例。对同一处理组剩余小鼠右下颌磨牙牙髓施加刺激,7d后行多聚甲醛心脏灌注,并采集标本,常规脱钙处理后以自体左侧磨牙作为对照,组织学观察比较牙髓中荧光细胞数量改变。结果：嵌合模型股骨BMMSCs中GFP＋的比例为（76.32±3.46）%,口腔刺激侧牙髓中荧光细胞数量明显多于同一个体对照侧（P〈0.05）。结论：以荧光细胞作为示踪标记的骨髓移植动物可作为有效的研究模型探索骨髓间充质干细胞在体向牙髓等口腔组织迁移分化机制。     

大鼠骨髓间充质干细胞膜片的构建及其特性

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞膜片的构建和基本生物学特性。方法:从GFP-SD荧光大鼠体内提取原代骨髓并培养骨髓间充质干细胞(BMMSCs),鉴定后用于体外构建BMMSCs细胞膜片,用荧光显微镜、倒置显微镜和HE染色对膜片进行形态学检测,并提取膜片RNA用于RT-PCR实验,检测相关促愈合因子的表达情况。结果:BMMSCs成功分离、培养和鉴定。体外诱导培养2周后获得白色膜状细胞膜片,并可用机械力刮下。显微观察显示细胞呈长梭形重叠生长,染色显示细胞间紧密连接并分泌大量细胞外基质(ECM)。RT-PCR结果显示,膜片细胞与正常培养的BMMSCs相比,高表达TGF-β、FGF、VEGF和ColⅠ等细胞因子和蛋白,但在诱导1周和2周时的表达量无显著差异。结论:本方法能够较为稳定的在体外构建BMMSCs膜片,该膜片显著高表达TGF-β等促愈合因子。