银环蛇毒素对白血病K562细胞株凋亡诱导作用的研究

目的 探讨银环蛇毒素及其若干组分在体外对白血病K562细胞株的凋亡诱导作用。方法 采用阳离子交换层析法分离纯化银环蛇粗毒，应用MTT法、荧光显微镜和流式细胞术等研究毒素对K562细胞株的凋亡作用。结果 除Ⅳ峰毒素外，银环蛇粗毒及分离的部分组分IV峰、Ⅶ峰和Ⅷ峰等毒素的荧光显微图末见特征性的凋亡小体，DNA含量分布组方图中的二倍体峰前末见Gl细胞群。结论 银环蛇毒对K562细胞具有杀伤作用，但并非是细胞凋亡作用，而是致细胞坏死，而粗毒中的某些组分可能具有促K562细胞凋亡作用。     

抑癌基因nm23-H1对化疗药物增敏作用的体外实验研究

目的：探讨抑癌基因nm23-H1对几种常用化疗药物的增敏作用。方法：构建含有人全长的nm23-H1基因cDNA的真核表达载体质粒pcDNA3-nm23-H1，通过脂质体介导，将它和空载体质粒pcDNA3分别转染鼠肺腺癌LA-795细胞株中，得到的阳性转染子分别命名为pcDNA3-nm23-H1-795细胞，pcDNA3-795细胞，另设795细胞为正常对照组，用MTT法测定nm23-H1对顺铂，氮芥，丝裂霉素C，5-氟尿嘧啶，长春新碱和足叶乙苷的增敏效应。结果：nm23-H1基因在pcDNA3-nm23-H1-795细胞中获得了表达，MTT法检测nm23-H1对顺铂，氮芥，丝裂霉素C有不同程度的增敏作用，而对5-氟尿嘧啶，长春新碱和足叶乙苷没有此效应。结论：nm23-H1可增加化疗药物顺铂，氮芥，丝裂霉素C对LA-795细胞的敏感作用。     

Nm23/NDPK的多种生物活性及其机制研究进展

Nm23家族共有8个成员，其蛋白产物为核苷二磷酸激酶（nucleoside diphosphate kinase，NDPK）。NDPK的研究历史可以追溯到50年前，作为一种管家酶，NDPK的首要功能是通过催化二磷酸核苷（nucleoside diphosphate，NDP）和三磷酸核苷（nucleoside triphosphate，NTP）之间的磷酸基转移反应来维持细胞内的NTP浓度。近年来的研究发现，NDPK可以调节细胞增殖、分化、发育和凋亡。研究NDPK的多能性及其调控机制对于阐明细胞增殖和分化、肿瘤发生、发展和转移，甚至个体发育，都有重要意义。     

核苷二磷酸激酶Ａ亚基（rhNDPK-A）对体内S180、H22、Lewis及H460肿瘤生长的影响

目的：观察rhNDPK-A对动物移植性肿瘤生长的抑制作用，为临床应用提供科学依据。方法:昆明种健康小鼠85只，每只动物右前肢腋皮下接种传代后8 d的S180或H22瘤细胞5×106个，随机分为8组；C57BL/6健康小鼠85只，每只动物右前肢腋皮下接种传代后10 d的Lewis瘤细胞2×105个，分组方法同上。给动物接种瘤细胞后24 h开始给药。S180和H22模型用尾静脉注射，每日1次，连用8 d；Lewis模型用腹腔注射，每日1次，连用10 d。Balb/c/neu裸鼠38只，腋窝皮下接种H460瘤组织块1.5 mm×1.5 mm×1.5 mm，当移植瘤体积生长至100 mm×100 mm×100 mm分5组开始腹腔注射给药，每日1次共17次。每周两次测瘤径，计算相对瘤体积，同时称体重。于末次给药后48 h处理各组动物，剖瘤称重，计算瘤重抑制率，并进行统计学处理。结果:rhNDPK-A单用，中剂量与高剂量对S180肿瘤生长较明显,抑制率>40%。3个剂量对H22肿瘤生长均具有不同程度的抑制作用，但rhNDPK-A单用，对Lewis肿瘤生长无明显的抑制作用。rhNDPK-A 20mg/kg与DDP（0.5 mg/kg）合用，对H22肿瘤生长抑制率明显提高。20 mg/kg rhNDPK-A对人肺腺癌H460裸鼠移植性肿瘤生长抑制达35.9%。结论：rhNDPK-A对S180、H22、H460肿瘤的生长具有一定的抑制作用，对Lewis肿瘤生长无明显的抑制作用。rhNDPK-A高剂量与DDP合用，对H22肿瘤生长的抑制具有协同作用。     

核苷二磷酸激酶A亚基的纯化、鉴定及其对顺铂抗癌作用的增强

目的　了解核苷二磷酸激酶A亚基 (NDPK A)能否提高顺铂的抗癌效果。方法　利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹杂交来监测和鉴定目标蛋白NDPK A ,利用离子交换、亲和层析结合高效液相色谱纯化分离目标蛋白 ;MTT比色法测定药物对细胞生长抑制率的影响。结果　获得NDPK A单体蛋白 ,酶比活为 8mmol·min- 1·g- 1蛋白质 ;细胞生长抑制率显示 ,NDPK A单独处理细胞时未见明显的细胞毒性 ,但与顺铂联合处理却能大大加强后者对鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的细胞毒性。结论　NDPK A与顺铂联用能增强顺铂对体外培养的鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的杀伤作用     

严重急性呼吸综合征冠状病毒特异转移因子的制备及其免疫活性研究

目的制备严重急性呼吸综合征 (SARS)冠状病毒特异转移因子并探讨其免疫学活性。方法以灭活的SARS冠状病毒免疫健康猪 ,取免疫后猪的脾脏和淋巴结 ,透析法提取转移因子 ,并作相应检测。通过巨噬细胞吞噬功能试验和白细胞黏附抑制试验探讨该品的免疫学活性。结果各项检测合格。巨噬细胞吞噬功能试验证明该品能促进巨噬细胞吞噬功跑。白细胞黏附抑制试验显示该品能提高未黏附白细胞抑制指数。结论SARS冠状病毒特异转移因子具有免疫增强作用和特异的免疫活性。     

裙带菜茎中褐藻糖胶的组成及生物活性研究

 目的从褐藻裙带茎中分离纯化得到褐藻糖胶UPPSⅡ,并研究其组成性质及生物活性。方法热水提取粗褐藻糖胶,采用DEAE-52和Sephadex G-200柱分离纯化得到纯褐藻糖胶UPPSⅡ,GC-MS分析多糖组成,凝胶色谱法测定其相对分子质量,红外光谱测定其糖苷键构型,并研究其对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果UPPSⅡ由岩藻糖、甘露糖、木糖、葡萄糖、半乳糖以β-糖苷键构成。相对分子质量为1.7×10⁵。其对酪氨酸酶活性呈浓度依赖性抑制。结论UPPSⅡ为首次从裙带菜茎中分离得到,主要成分为岩藻糖,并具有抑制酪氨酸酶活性的作用。     

三七叶皂苷滴丸制备研究

目的 :确定三七叶皂苷滴丸的成型工艺。方法 :采用正交试验法研究成型的较优工艺条件。结果 :工艺条件是 :聚乙二醇 4 0 0 0 :三七叶皂苷 10 :1,充分搅拌混匀 ,加入已过 4 0目筛的冰片 (追加到 2 % ) ,搅拌使熔化。药料通过 2 .0mm/2 .6mm(内径 /外径 )的滴头以 2 0滴·min-1的速度恒速滴入 10℃的液状石蜡中。结论 :上述实验结果可为三七叶皂苷滴丸成型工艺的确定提供实验依据。     

人脐静脉血管内皮细胞的体外培养及rhNDPK-A对其增殖的作用

目的：建立一种体外培养人脐静脉血管内皮细胞的方法，初步探讨rhNDPK-A蛋白对内皮细胞生长的影响。方法：采用胶原酶对新生儿脐带静脉血管进行消化，从中分离出血管内皮细胞，体外传代培养，通过MTS／PMS法测定不同浓度的rhNDPK-A蛋白对HUVEC体外增殖的影响。结果：成功获得体外培养的人脐静脉血管内皮细胞，从0．0610μg／m1到250μg／ml的rhNDPK-A蛋白对人脐静脉血管内皮细胞的增殖既没有抑制也没有促进作用。结论：建立了分离培养人脐静脉向管内皮细胞的方法，rhNDPK-A蛋白不是通讨抑制内皮血管细胞的增殖而抑制血管新生的。     

银环蛇粗毒若干有效组分对SWO细胞的作用

目的　测定银环蛇毒素组分是否抑制人神经胶质瘤细胞SWO的生长 ,以及确定抑制的原因是诱导凋亡或是杀伤。方法　用MTT和流式细胞术等方法探讨银环蛇粗毒及其有效组分对人神经胶质瘤细胞SWO的作用。结果　MTT试验结果显示 ,SWO细胞对银环蛇粗毒、第Ⅲ峰毒素、α 银环蛇毒素 (α BTX)的作用比较敏感 ,同时SWO细胞比 3T3细胞更敏感。SWO对其他组分的作用不敏感。 3种毒素作用于SWO细胞 ,流式细胞术检测未见凋亡峰。结论银环蛇粗毒、第Ⅲ峰毒素、α BTX对SWO细胞有杀伤作用 ,无凋亡作用