HSV-1感染对人视网膜色素上皮细胞生长的影响

目的:建立单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染人视网膜色素上皮细胞(Retinal pigmentepith elial,RPE)的体外模型,观察HSV-1感染对体外培养RPE细胞生长的影响。方法:以感染复数(MOI)为5的HSV-1(F株)感染体外培养的RPE细胞。用相差显微镜观察RPE细胞的形态变化;用MTT法、流式细胞术观察HSV-1感染对RPE细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;用PCR和免疫荧光法验证HSV-1感染RPE细胞是否成功。结果:成功在体外建立了HSV-1感染RPE的细胞模型。HSV-1感染RPE细胞8h后出现病变,细胞形态开始变得细长和皱缩;感染24h后细胞病变更加明显,细胞间间隙增加,甚至可见多核巨细胞;感染48h后所有细胞均变圆,细胞开始出现脱落甚至死亡。MTT法显示HSV-1感染RPE后24h和48h能抑制细胞生长(P<0.01),细胞的抑制率分别为(16.37±3.28)%和(47.91±6.39)%;流式细胞仪检测发现HSV-1感染可影响RPE细胞的细胞周期,但对细胞凋亡无明显影响。结论:HSV-1能感染体外培养的RPE细胞,抑制RPE细胞的增殖,并影响RPE细胞的细胞周期。眼科学报2007;23:212-218.     

Univent管与Robershaw管单肺通气麻醉临床比较

目的:比较Univent管与Robertshaw管单肺通气时PetCo2、PaO2、PCO2、SpO2气道压力(Paw)的变化。方法:胸外科手术40例ASAⅠ～Ⅱ级,随机分为Univent管组(U组)和Robershaw管组(R组),于单肺通气前、单肺通气后30min、60min监测两组病人的Pao2、Pco2、PetCo2、SPo2、气道压力(Paw),并进行统计学处理。结果与结论:单肺通气30min时、60minU组病人Paw低于R组,PaO2高于R组有显著性差异(P<0.05);本研究结果提示,对于肺功能较差的病人,尤其是通O2功能障碍的病人,开胸手术需单肺通气,U管对病人的生理干扰要优于R管。     

胞内视黄醛结合蛋白在豚鼠离焦诱导型近视眼中的表达

目的探讨胞内视黄醛结合蛋白（CRALBP）在豚鼠离焦诱导型近视眼中的表达。方法选取3～4周龄有色豚鼠10只,右眼戴-8．00D透镜,左眼不戴镜作为对照眼。戴镜前和戴镜后第11d分别测量眼轴长度和屈光度;通过免疫组织化学和蛋白质免疫印迹的方法检测CRALBP在豚鼠诱导近视眼和对照眼的视网膜、脉络膜和巩膜中的表达。结果戴镜后第11d,模型眼与戴镜前相比屈光度平均增加了一3．17D,与对照眼比较差异有统计学意义（P〈0．01）;眼轴长度在两组眼之间差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组织化学结果显示,与对照眼相比,诱导近视眼的CRALBP在巩膜中的表达明显降低,在脉络膜和视网膜中的表达升高。Westernblot结果和免疫组织化学结果一致,CRALBP在诱导近视眼巩膜中的表达明显降低。结论CRALBP可能在豚鼠诱导近视眼的发生以及巩膜重塑中起一定作用。     

醋酸强的松龙滴眼后在兔眼内的分布

目的观察醋酸强的松龙短期和长期滴眼后在兔眼多种组织中的分布。方法用1g.L-1醋酸强的松龙滴眼液分1d内数次或连续29d长期滴兔眼,分别于滴眼后15min、30min、60min、120min和29d取材,高效液相色谱法测定角膜、房水、晶状体、玻璃体和血液中的激素含量。结果1g.L-1醋酸强的松龙滴眼液滴眼后兔眼不同组织和血液中的激素分布随时间而变化,无论短期或长期连续滴眼在角膜和房水中均获得较高的激素含量,血液和玻璃体中亦有少量进入。短期滴眼后,仅在晶状体赤道和前皮质有少量激素进入,长期局部滴眼时在晶状体各部位均有蓄积。结论1g.L-1醋酸强的松龙局部滴眼后易进入角膜和房水。此结果有助于了解眼部激素治疗和并发症发生的关系。     

异丙酚静脉麻醉用于人工流产的临床观察

人流术一般是在无麻醉镇痛下进行,病人痛苦大,且由于紧张、疼痛而影响手术的操作和效果,甚至出现人流综合征.我们应用异丙酚静脉麻醉用于人流术,收到良好效果.     

HTLV-1 Tax 基因真核表达载体的构建及对 RPE 细胞的影响

目的构建人T淋巴细胞白血病病毒-1(human T-cell leukemia virus type1,HTLV-1)Tax基因真核表达载体,在人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达Tax蛋白,观察其对细胞的影响。方法应用基因重组技术构建重组载体PIRES2-EGFP-Tax(PT),鉴定后将重组载体转染入RPE细胞,应用RT-PCR、Western-blot和免疫荧光法检测细胞内Tax基因和蛋白的表达;通过MTT和流式细胞仪检测质粒(空白载体、PT和Green-Tax)转染RPE细胞24h和48h后对RPE细胞生长活力及细胞周期的影响。结果经双酶切鉴定和测序分析证实成功地构建了HTLV-1Tax真核表达载体;通过RT-PCR、Western-blot和免疫荧光法检测到转染Tax重组载体的RPE细胞中有Tax基因和蛋白的表达。质粒转染RPE细胞后,细胞生长活力受到抑制,G1期减少而S期增加。但转染Tax质粒和空白载体,对RPE细胞的生长活力和细胞周期产生相似影响。结论成功构建了HTLV-1Tax基因真核表达载体,并在RPE细胞中表达Tax蛋白;Tax质粒对RPE细胞的影响不排除是转染试剂所致。     

体外HTLV—Ⅰ Tax蛋白在M&#252;ller细胞中的靶蛋白分析

目的观察体外人类嗜T淋巴细胞病毒（HTLV—Ⅰ）Tax蛋白与M&#252;ller细胞蛋白结合及其靶蛋白组成成分。方法用含Tax蛋白cDNA的原核表达载体PGEX-3X-GST-Tax转化大肠杆菌，诱导表达并提取纯化GST-Tax融合蛋白；细胞外GST-Tax融合蛋白与M&#252;ller细胞蛋白结合，GS4B下拉（pull-down）与GST-Tax结合的蛋白；应用二维凝胶电泳、质谱分析（MALDI-Tof-MS）和免疫印迹分析等方法分析鉴定结合的蛋白。结果通过与对照组比较，在二维凝胶电泳上观察到多个差异蛋白质斑点，经质谱分析鉴定出10个差异蛋白质为Tax的候选靶蛋白，经免疫印迹，初步证实Tax蛋白能与ENO1相结合。结论初步分离鉴定卅M&#252;ller细胞中的EN01等蛋白质可能为Tax蛋白的靶蛋白分子。     

腹腔镜胆囊切除术行硬膜外麻醉的临床观察

腹腔镜胆囊切除术(LC)具有创伤小、痛苦轻、恢复快、手术时间短等优点.临床应用越来越广泛,因需要施行人工气腹,麻醉处理有其特殊性,目前以选择全身麻醉为主,但某些情况下也可选择硬膜外麻醉.     

异丙酚、安定、芬太尼复合全麻诱导临床观察

异丙酚(propofol)是一种短效静脉麻醉药,临床上除广泛应用于麻醉诱导外可复合其它镇痛药用于麻醉维持[1],因诱导迅速、舒适、苏醒快且完全、可控性强,长时间连续静脉注射后体内无明显蓄积,不良反应少,而得以普遍应用.     

体外HTLV-I Tax蛋白在Müller细胞中的靶蛋白分析

目的 观察体外人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I)Tax蛋白与Moiler细胞蛋白结合及其靶蛋白组成成分.方法 用含Tax蛋白eDNA的原核表达载体PGEX-3X-GST-Tax转化大肠杆菌,诱导表达并提取纯化GST-Tax融合蛋白;细胞外GST-Tax融合蛋白与Müller细胞蛋白结合,GS4B下拉(pull-down)与GST-Tax结合的蛋白;应用二维凝胶电泳、质谱分析(MALDI-Tof-Ms)和免疫印迹分析等方法分析鉴定结合的蛋白.结果 通过与对照组比较,在二维凝胶电泳上观察到多个差异蛋白质斑点,经质谱分析鉴定出10个差异蛋白质为Tax的候选靶蛋白,经免疫印迹,初步证实Tax蛋白能与ENO1相结合.结论 初步分离鉴定出Müller细胞中的ENO1等蛋白质可能为Tax蛋白的靶蛋白分子.