诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:评估无毒诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑瘤效应,及其在肿瘤和重要器官的定植情况,并确定瘤内注射的最佳剂量.方法:建立H22皮下移植瘤BALB/c小鼠模型后称小鼠重量,测量肿瘤大小,并按随机原则分为生理盐水组、无毒诺维氏梭菌低剂量组(1.0×107/mL,0.5 mL)、中剂量组(1.0×108/mL,0.5 mL)...     

厌氧菌在肿瘤生物治疗中的研究进展

<正>国际癌症研究机构公布的数据显示,每年全球约800万人死于癌症,癌症已成为世界严重的公共卫生问题。我国每年新发肿瘤病例约为312万例,其中50岁以上人群恶性肿瘤发病率占全部发病的80%以上,80岁达到高峰,居民因癌症死亡率是13%〔1〕。肿瘤严重影响老年人的生活质量,威胁着老年人的健康。传统的肿瘤治疗面临着特异性不高、靶向性不强、难以对实体肿瘤的乏氧区发挥作用等方面的挑战,迫切需要新疗     

诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的 评估无毒诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑瘤效应，及其在肿瘤和重要器官的定植情况，并确定瘤内注射的最佳剂量。方法 建立H22皮下移植瘤BALB/c小鼠模型后称小鼠重量、测肿瘤大小，并按随机原则分为生理盐水组、无毒诺维氏梭菌低剂量组（1.0×107 mL-1，0.5 mL）、中剂量组（1.0×108 mL-1，0.5 mL）和高剂量组（1.0×109 mL-1，0.5 mL）。每天观察小鼠的一般情况，每周3次定时测量小鼠重量，每周2次测肿瘤大小，评估细菌的抑瘤效应。采用革兰染色法、细菌培养法、PCR技术，了解肿瘤和重要器官中诺维氏梭菌的定植情况。利用HE染色、脾脏指数、胸腺指数，了解细菌干预后荷瘤鼠炎症反应、免疫功能及肿瘤转移的情况。结果 无毒诺维氏梭低、中、高剂量组抑瘤率分别为8.49%、44.59%、14.84%，高剂量组小鼠一般情况最差，中剂量组小鼠一般情况最好。肿瘤中有诺维氏梭菌定植，主要脏器无该菌定植。高剂量组和中剂量组荷瘤鼠脾脏质量明显增大，两组脾脏质量和指数与生理盐水组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组胸腺显著缩小，但胸腺指数各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 无毒诺维氏梭菌能选择性地定植于肝癌区，中剂量（1.0×108 mL-1，0.5 mL）无毒诺维氏梭菌能有效抑制免疫正常小鼠H22皮下移植瘤，可能与抗肿瘤免疫和炎症反应有关。     

双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合孟鲁司特钠咀嚼片治疗支气管哮喘合并变应性鼻炎患者的临床疗效

目的观察双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合孟鲁司特钠咀嚼片治疗支气管哮喘合并变应性鼻炎患者的临床疗效。方法选取2015年2月—2017年3月四川大学华西第二医院收治的支气管哮喘合并变应性鼻炎患者112例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组56例。在常规对症治疗基础上,对照组患者口服孟鲁司特钠咀嚼片,观察组患者口服双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合鲁司特钠咀嚼片;两组患者均连续治疗3个月。比较两组患者临床疗效,治疗前后哮喘控制测试量表(ACT)评分,血清神经生长因子(NGF)、干扰素γ(IFN-γ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)水平,呼气峰流速(PEF)及第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%),观察两组患者治疗期间不良反应发生情况。结果观察组患者临床疗效优于对照组(P0.05)。治疗前两组患者ACT评分比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后观察组患者ACT评分高于对照组(P0.05)。治疗前两组患者血清NGF、IFN-γ、TIMP-1水平比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后观察组患者血清NGF、TIMP-1水平低于对照组,血清IFN-γ水平高于对照组(P0.05)。治疗前两组患者PEF、FEV1%比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后观察组患者PEF、FEV1%高于对照组(P0.05)。两组患者治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合孟鲁司特钠咀嚼片治疗支气管哮喘合并变应性鼻炎患者的临床疗效确切,可有效提高血清IFN-γ水平,降低血清NGF、TIMP-1水平,改善肺功能,且安全性较高。     

IL-35在慢性乙型肝炎发病过程中的免疫抑制作用

目的分析白细胞介素-35(IL-35)在慢性乙型肝炎发病过程中的免疫抑制作用。方法选取2016年6月至2017年6月该院45例长期居住在西藏地区就诊的慢性乙型肝炎患者作为观察组,同期体检中心接收的45例健康成年人作为对照组,分别对两组Th17细胞、外周血IL-35、乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)水平进行检测,并对外周血单个核细胞进行IL-35刺激,观察刺激前后的Th17细胞、IL-17、IL-22,治疗过程中的HBV表位肽诱导Th17细胞与IL-35表达水平。结果观察组受检者IL-35显著高于对照组,两组受检者的HBV DNA与IL-35表达比较差异具有统计学意义(P0.05)。两组受检者的外周血非特异性Th17细胞表达比较差异无统计学意义(P0.05),但观察组受检者的外周血HBV表位肽诱导Th17细胞表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组受检者IL-35刺激后HBV表位肽诱导Th17细胞、IL-17与IL-22显著降低,刺激前后的Th17细胞、IL-17与IL-22表达比较差异具有统计学意义(P0.05)。观察组患者治疗前、治疗24周与治疗48周的HBV表位肽诱导Th17细胞表达比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后观察组患者IL-35水平逐渐降低,治疗前、治疗24周与治疗48周的IL-35表达比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论在慢性乙型肝炎发病过程中IL-35起到了免疫抑制作用,能够影响到乙型肝炎病毒持续感染,并危害患者的机体免疫功能。     

半枝莲种素抗结直肠癌作用机制的生物信息学分析与实验验证

目的 结合生物信息学分析与体内、外实验探索半枝莲种素抗结直肠癌的作用及机制。方法 利用药物与疾病相关公共数据库分别获得半枝莲种素和结直肠癌的相关靶点,对二者交集靶点进行蛋白相互作用分析和功能富集分析以构建“药物-疾病”调控网络;利用机器学习算法筛选核心基因,并进行分子对接验证;利用人结肠癌细胞系(HCT116)开展细胞实验,验证半枝莲种素体外抗结直肠癌的作用;利用裸鼠皮下瘤模型验证半枝莲种素体内抗结直肠癌作用并探索相关分子机制。结果 共获得246个半枝莲种素药物靶点和3 658个结直肠癌相关靶点,利用50个交集基因构建了蛋白相互作用网络和“药物-疾病”调控网络。通过机器学习算法筛选出5个半枝莲种素抗结直肠癌的核心靶点。分子对接结果显示,所有核心靶点与半枝莲种素间的结合能均低于-5 kcal/mol。细胞实验显示,半枝莲种素处理组HCT116细胞的增殖、迁移及侵袭能力较对照组更弱。动物实验显示,半枝莲种素处理组裸鼠的皮下异种移植瘤生长速度较对照组更慢,且肿瘤组织中MET和磷酸化AKT的表达水平更低(P<0.05)。结论 半枝莲种素可通过下调MET的表达,影响PI3K/AKT通路的磷...     

携带HR-GFP报告基因的DNA损伤同源重组修复检测系统的建立及初步应用

目的 建立DNA损伤同源重组修复检测系统（Ⅰ-Sce I-HR）,应用该系统制备DNA双链断裂（DSB）的人骨肉瘤细胞（U2OS）模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础.方法 通过分子克隆构建携带Ⅰ-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-GFP,将该质粒转染入U2OS细胞中,经G418稳定筛选.随后分别瞬时转染入携带归位内切酶Ⅰ-Sce I的表达质粒pCBASCEI,以及体外经Ⅰ-Sce I线性化pcDNA3-HR-GFP.48小时后用免疫荧光方法检测DNA双链损伤效应分子-DH2AX,同时观察EGFP荧光信号;72小时后用Western blot检测报告蛋白EGFP的表达,评估DNA双链断裂后同源重组修复情况.结果 酶切鉴定和测序证实pcDNA3-HR-GFP真核表达载体构建成功;Ⅰ-Sce I-HR系统引入U2OS细胞中后,γ-H2AX表达明显上调,荧光显微镜和Western blot均显示EGFP表达.结论 DSB细胞同源重组修复模型构建成功,Ⅰ-Sce I-HR系统能够成功地诱导U2OS细胞株产生DSB,并出现同源重组修复,为进一步研究DNA同源重组信号传导提供了有效的研究工具.     

日立HITACHI 7180生化检测体系的抗干扰研究

目的基于该实验室检测体系日立HITACHI 7180生化仪,以及宁波美康和北京九强生化试剂进行抗干扰试验。方法试验以血红蛋白作为溶血干扰物质,甘油三月桂酸酯作为脂血干扰物质,胆红素作为黄疸干扰物质,分别配制干扰梯度浓度,加入混合血清进行仪器测试,基准组加入等量生理盐水,分析标本不同溶血、脂血、黄疸水平对各项生化指标的影响。结果溶血影响下,心肌酶类项目的血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)明显上升,干扰物在1g/L时分别有23.20%、16.96%、26.90%的正偏差,已超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。脂血影响下,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)轻度下降,总蛋白(TP)、CK、CK-MB轻度上升,干扰物在12mmol/L时偏差超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。黄疸影响下,血清CK-MB、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)轻度下降,干扰物在600μmol/L时偏差超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。结论该研究检测体系的抗干扰能力符合要求,可为临床该3类标本的判断和处理提供依据。