创伤性脑损伤后脑组织抵抗素rstn基因的表达变化

目的 探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织抵抗素rstn基因表达的变化特征. 方法选择SD大鼠90只,按随机数字表法分成正常对照组(5只),假手术组(10只),轻、中和重度损伤组(每组25只).应用液压冲击法制作大鼠颅脑损伤模型,并应用RT-PGR方法检测各组大鼠伤后3,6,24,72 h和1,2,4周脑组织rstn基因表达的变化,同时监测损伤中度组大鼠外周血糖浓度变化,观察两者之间的关系. 结果重度损伤组大鼠于伤后24 h,中度损伤组大鼠于伤后72 h,轻度损伤组大鼠于伤后4周rstn基因的表达开始明显上升(P＜0.05).伤后4周时,所有损伤组海马、丘脑及皮质区域rstn基因表达均升高(P＜0.05),其中海马区域最高,丘脑区域最低(P＜0.05).不同区域均存在损伤侧rstn基因表达较高,对侧较低的现象(P＜0.05).重度损伤组大鼠rstn基因表达升高最明显(P＜0.05).脑组织rstn基因表达变化与外周血糖浓度呈线性正相关(R=5.32,P=0.03). 结论 TBI后rstn基因表达明显增加,rstn基因表达的时程变化可能与脑损伤严重程度相关.TBI后rstn基因存在同侧海马区域表达明显升高的组织分布特征.创伤后脑组织rstn基因表达变化与血糖代谢之间存在一定关系.     

肝细胞癌中血管内皮生长因子的表达与肿瘤进展的关系研究

目的 评估血管内皮生长因子(VEGF)的表达与肿瘤临床病理特点及复发的关系.方法 应用免疫组织化学法检测原发性肝癌组织(27例)、转移性肝癌组织(11例)及癌旁正常组织(38例)中VEGF蛋白表达情况;应用聚合酶链反应(PCR)技术检测上述3组肝组织中VEGF mRNA的表达水平;分析VEGF在肿瘤组织中的表达与临床病理特点及复发之间的关系.结果 原发性肝癌患者肝组织VEGF mRNA表达水平显著高于正常肝组织,差异有统计学意义(P＜0.05);原发性肝癌患者肝组织中VEGF蛋白表达阳性率(77.8%)显著高于正常肝组织(15.8%),差异有统计学意义(P＜0.01),而转移性肝癌组织VEGF蛋白表达阳性率(36.4%)与正常肝组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).原发性肝癌患者中,肿瘤直径≥5 cm者VEGF表达升高者所占比例(85.7%)显著高于肿瘤直径＜5 cm者;2年内复发者肝组织VEGF表达升高者所占比例(87.5%)显著高于1年内复发者,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 原发性肝癌组织中VEGF的表达明显高于正常肝组织,且VEGF的表达与肿瘤大小及复发有关.     

外源性血管内皮生长因素在成骨细胞内的表达及其对成骨细胞生长的影响研究

血管内皮生长因子（VEGF）是目前所知唯一特异作用于血管内皮细胞的细胞因子，能促进血管内皮细胞有丝分裂，加快血管形成。与正常人组织的生长、修复，及某些组织的异常增生、实体瘤的生长及转移中新生血管的形成密切相关。在胚胎形成时期，骨形成即与血管生成密切相关。骨生发中心即位于血管化的环境中，成骨细胞和骨祖细胞在新骨形成过程中总是比邻血管内皮细胞存在的。     

真核表达载体pcDNA3．1-RASSF1的构建及其对肝癌细胞凋亡的影响

目的构建pcDNA3．1－RASSFl真核表达载体,并检测其对肝癌细胞系HepG2凋亡的影响。方法应用聚合酶链反应技术从人RASSFlcDNA中扩增出RASSF1基因后,以内切酶XhoI和EcoRI进行双酶切,将其克隆人用相同酶处理的载体pcDNA3．1;将重组质粒pcDNA3．1－RASSF1转染肝癌HepG2细胞,应用Westernblot法检测RASSF1的表达水平;用AnnexinV／PI法检测细胞的凋亡情况。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pcDNA3．1．RASSF1构建成功;Westernblot法结果表明转染pcDNA3．1-RASSF1后HepG2细胞中RASSFl表达升高;AnnexinV／PI法用流式细胞术检测凋亡,空白组、pcDNA3．1组和pcDNA3．1-RASSFl组HepG2细胞的凋亡率分别为（5．8±0．42）％、（7．48±0．68）％和（35．1±3．15）％。结论真核表达载体pcDNA3．1-RASSF1构建成功;RASSF1蛋白在HepG2细胞中高表达,并促进细胞凋亡。