阿霉素海藻酸钠—壳聚糖微囊的释药及其体内外抗癌作用

目的：考察阿霉素海藻酸钠—壳聚糖微囊(ADM—ACM)的释药特性及其体内外抗癌作用。方法：采用乳化胶凝法制备ADM—ACM，考察微囊的释药特性。以调亡细饱的原位末端转移酶标记技术(TUNEL)及SRB活细胞染色法考察ADM—ACM的体内外抗癌活性。结果：本制备的ADM—ACM具较高的载药量，当药载比为2mg／ml，载药量达U随右。载药微囊中ADM在PBS(pH＝7．4)中突释后缓慢释放，t2h时达45％左右。体外抗癌实验表明，空白微囊对BGC—823、Bel—7402及Hela三种癌细饱株无毒性，ADM—ACM对它们的抑制作用明显优于ADM溶液。TUNEL实验显示ADM—ACM(60．85％)引起兔肢体VX2肿瘤细胞凋亡的阳性率远高于原料药(3．98％)及空白微囊(3．97％)。结论：本制备的ADM—ACM的体内外抗癌活性均显强于原料药。     

双硒唑烷-1的动物体内抗肿瘤作用

目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Eb)的动物体内抗肿瘤作用.方法:建立Lewis肺癌(1ewislung cancer,LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg和12.5 mg/kg两个剂量的Eb作为实验组,以2.0 mg/kg剂量的顺铂(DDP)作为阳性对照,以溶剂5g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射药物7 d,探讨Eb对荷瘤鼠的存活期、肿瘤的生长速度、浸润级别、细胞形态、细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:Eb能够明显抑制肿瘤生长和侵袭(高剂量Eb的肿瘤抑制率为80.31%),延长荷瘤鼠的存活期;形态学观察发现,给予Eb后肿瘤细胞核浓缩深染,分裂相细胞减少;流式细胞仪检测结果表明,Eb能够促进肿瘤细胞的凋亡.结论:新型有机硒化合物Eb在C57/BL小鼠体内能够明显抑制LLC的生长和侵袭,促进肿瘤细胞的凋亡,具有较强的抗肿瘤活性.     

小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血硫氧还蛋白还原酶活性的相关性

背景与目的：研究表明硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase，TrxR）在肿瘤组织中的表达较正常组织中明显增多且活性升高．但关于肿瘤生长与血TrxR活性的关系报道却很少。本实验的目的是研究小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血TrxR活性的关系。方法：建立H22肝癌昆明小鼠皮下移植瘤动物模型，分为5组：空白组不接种肿瘤细胞，模型组接种肿瘤细胞，这两组小鼠均给予5％。羧甲基纤维素钠灌胃作为对照；乙烷硒啉低、中、高剂量组均接种肿瘤细胞，并分别灌胃给予36mg／kg、72mg／kg、216mg／kg乙烷硒啉。于肿瘤接种前、肿瘤生长至100mm，给药前、给药第1天、给药第4天及给药第10天5个时间点行眼眶取血，二硫代双硝基苯甲酸（dithio-bis-nitrobenzoic acid，DTNB）法测定血浆TrxR活性。处死小鼠剥离皮下肿瘤，DTNB法测定肿瘤组织TrxR活性。结果：给药结束时低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠的抑瘤率分别达到59．5％、74.3％、74．9％。空白组小鼠血TrxR活性稳定：接种肿瘤后小鼠血TrxR活性随肿瘤体积增大而增加，呈明显正相关；给药结束时，低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠血TrxR活性抑制率分别为59．2％、68．4％、68．9％，而肿瘤组织中TrxR活性抑制率分别为15．3％、25．8％、29．8％。结论：H22肝癌小鼠血TrxR活性与其肿瘤生长呈正相关；不同剂量的TrxR抑制剂乙烷硒啉干预后,血TrxR活性能够被不同程度地抑制，与肿瘤生长的抑制呈一致性．     

新型有机硒化合物双硒唑烷-1的动物体内免疫调节作用

目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Ethaselen-1, Eb1)的动物体内免疫调节作用.方法:建立Lewis肺癌(Lewis lung cancer, LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg 和12.5 mg/kg两个剂量的Eb1作为实验药物,以左旋咪唑(levamisole,LMS) 2.0 mg/kg作为阳性对照,以溶剂5 g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射7 d药物,探讨Eb1对正常及肿瘤鼠的相对脾重、脾淋巴细胞转化活性、自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性、淋巴因子-激活杀伤(lymphokine-activated killer,LAK)细胞活性及淋巴细胞CD4+,CD8+亚群阳性细胞百分数的影响.结果:高剂量Eb1能够使正常鼠和肿瘤鼠的相对脾重增加150.59%和122.55%,脾淋巴细胞转化活性增加162.25%和561.98%,NK细胞活性增加78.60%和219.42%,脾淋巴细胞CD4-CD8+亚群阳性细胞百分含量增加104.72%和105.87%,高剂量Eb1亦能使肿瘤鼠的LAK细胞活性增加195.11%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:新型有机硒化合物Eb1在C57/BL小鼠体内具有明显的免疫调节作用.     

1,2-[二(1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)]乙烷的体外抗肿瘤活性

硒是机体必需的微量元素,具有广泛的生物功能和复杂的生物学作用机制.硒与健康密切相关,对肿瘤具有预防和抑制作用[1-4].肿瘤的发生与体内硒含量呈负相关.国外已有selenazofurin作为抗癌、抗病毒药物进入Ⅰ期临床,ebselen作为抗炎抗氧化新药进入Ⅲ期临床研究的报道[5]. 硒又是一个安全限度狭窄的微量元素,其毒性和化学形态密切相关[6].有机硒化合物的硒原子较难进入硒库,毒性一般较低,为当今硒化合物的研究方向[5].我们以模拟谷光甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)最成功的小分子有机硒化合物ebselen[7]为先导化合物,合成了系列新型ebselen衍生物,选取抗癌活性较好的新型有机硒化合物1,2-[二(1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)]乙烷(1,2-[bis(1,2-Benzisoselenazolone-3(2H)-ketone)]ethane,BBSKE)作为研究对象,用体外微量培养方法研究其体外抗肿瘤活性.     

新型有机硒化合物Eb抗肿瘤,免疫活性及硒组织分布特点

目的研究新型有机硒化合物Eb的组织分布特点、体外抗肿瘤及免疫活性,同时对其体内的抗肿瘤前景进行探讨.方法昆明种小鼠连续灌胃给药Eb后,用荧光法测定心、肝、脾、肾、肺、胃、脑、肌、骨组织的硒含量,来考察Eb组织分布特异性.用MTT法检测其体外抗肿瘤活性.用淋巴细胞转化,溶血素抗体生成实验及吞噬细胞吞噬实验检测其免疫活性.结果连续灌胃Eb治疗剂量(0.1 g·kg-1·d-1)7天后,肝、脾、肺、肾、骨组织的硒含量增高,其中肝、脾组织的硒含量增高显著.心、胃、脑、肌肉组织的硒含量基本没变化;Eb对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞、胃癌BGC-823细胞、肺癌Calu-3细胞具有生长抑制作用;Eb具有促进淋巴细胞转化、溶血素抗体生成及增强吞噬细胞吞噬功能的作用.结论Eb具有体外抗肿瘤,免疫增强活性及在肝、脾、肺、肾、骨组织的靶向性蓄积作用,表明Eb有作为抗肝、肺、肾、骨等组织肿瘤及增强免疫功能药物进一步研究的意义.     

先用权在中药领域的适用探讨

文章在解析先用权的最新法规和司法解释的基础上,探讨了先用权制度的意义,以及先用权适用中的限制条件,包括"专利申请日/优先权日之前"、"制造相同产品、使用相同方法或者已经作好制造、使用的必要准备"、"原有范围"、"合法获得"、"转让与继承限制"等,并在剖析两个实际案例的基础上,阐明了笔者对先用权在中药领域中适用问题的理解...     

制药企业规避方法专利侵权风险的策略初探

制药行业是一个高科技、高风险、高投入、高产出、关系着国计民生的重要产业.随着知识经济时代的到来和我国加入世界贸易组织（WTO）,药品领域的知识产权保护问题越来越受到医药行业乃至全社会的高度重视和普遍关注.随着知识产权管理国际法规的逐步接轨,制药企业研究分析各国知识产权的相关法规,充分利用各国专利制度的自身特点,从中寻找创新发展的新思路,业已成为企业利用专利制度、规避侵权风险的又一新课题.