骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定

目的：构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法：通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A（包含FS N端和结构域FSⅠ）和结构域FSⅠ;利用PCR方法分别从鼠基因组、人血液基因组和pcDNA3.1（+）载体上扩增出MCK增强子、ACTA 1启动子和BGHpolyA。将上述4个片段分别连接到真核表达载体pGKneotpAlox2上,构建骨骼肌特异性表达FSⅠ-Ⅰ（包含FS N端和2个连续FSⅠ结构域）的载体pGK-MCK-ACTA 1-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA;用FuGENE
R　HD转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。 结果：成功构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的表达载体pGK-MCK-ACTA1 promoter-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论：获得了骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过核移植方法获得表达FSⅠ-Ⅰ转基因猪提供了供体细胞。     

中、外文医学文献的引文分析及比较研究

采用引文分析法,对中、外文医学文献进行大样本的引文统计分析,得出中文医学文献的平均引文数、引用外文文献的峰值年、外文医学文献的半衰期、外文医学核心期刊的范围及文种比例等重要数据,并通过与国外医学期刊的对比,分析我国医学文献引文的差距,探讨我国引进大量外文期刊的开发利用。     

慢病毒介导的猪CD4启动子在白血病Jurkat细胞中的启动作用

目的:研究异种基因启动子在Jurkat细胞中调节外源基因表达的作用,为人类白血病动物模型的建立提供理论依据。方法：利用生物信息学手段预测并克隆出猪CD4基因启动子,然后利用克隆的猪CD4基因启动子构建和包装慢病毒载体。包装的病毒经过滴度检测和侵染293T细胞及Jurkat细胞后进行绿色荧光蛋白检测,比较猪CD4基因启动子与EF-1α启动子启动的外源基因表达情况。结果:成功预测出猪CD4基因启动子,成功构建慢病毒载体并包装出病毒。经过病毒滴度测定及侵染293T细胞和Jurkat细胞表明,2种启动子在细胞中的启动绿色荧光蛋白的效果相近。结论：猪CD4基因启动子在白血病 Jurkat 细胞中没有特异性启动外源基因,猪CD4基因启动子可以作为一种在Jurkat细胞中启动外源基因的不同选择。     

关于确定我国护理学外文核心期刊的研究

在我国,护理学已成为一门独立的学科,近年发展很快,从事护理工作的专业人员高达93万。纵观世界各国护理学发展史,都离不开国际间的学术交流。因此,对国外先进护理理论与技术的引进、吸收和利用,对于促进我国护理人员知识更新,推动我国护理事业发展十分重要。在当今信息社会,期刊以其能敏捷而直接地反映学科动态、涉及面广、信息量大、出版迅速、报道及时等特点成为国际间学术交流的主要形式和获取信息的主要来源。然而,当前医学科学高度发展,全世界每年出版的医学期刊达4000余种,任何图书馆都不可能订购齐全,且学科交叉渗透,护理人     

Internet网上医学资源

我国把Internet译为因特网,也称为国际计算机互联网,它起源于美国国防部高级研究项目组织ARPA建立的计算机网络ARPAnet.首先是为美国政府的研究部门、教育机构服务,由于其巨大的成功,Internet迅速发展.目前Internet已连接了13.4万个网络,覆盖了180多个国家和地区,网络用户超过3000万.现在Internet已成了网络信息资源的代名词,其包含的内容涉及人类生活的方方面面.