宫颈癌发生与ApoE、 CLU和RelB表达调控的关系及意义

目的：以往研究显示,宫颈癌发生可能与体内ApoE、 CLU、 RelB和mTOR等血浆蛋白质表达水平变化存在一定的关系。此研究探讨宫颈癌发生与肿瘤组织中上述蛋白质的表达水平的关系,为建立宫颈癌早期预警指标提供依据。方法收集维吾尔族和汉族妇女宫颈鳞癌（ cervical squamous cell carcinoma, CSCC）组织标本36例和正常对照组织25例。设计与合成ApoE、 CLU、 RelB和mTOR的mRNA序列特异性引物,采用定量RT?PCR方法,对宫颈癌和正常对照组织RNA进行mRNA表达水平鉴定。结果肿瘤组织中ApoE、 CLU和RelB 3种基因的转录水平上调,与正常对照组比较有显著差异（P＜0．05）,但是mTOR表达水平无统计学差异（P＞0．05）,其中ApoE、 CLU和RelB表达水平变化与以往研究报道的血浆水平变化一致。结论宫颈癌的发生与肿瘤组织内ApoE、 CLU和RelB表达水平上调存在密切关系,与血浆水平变化一致,证明这些基因可能成为宫颈癌早期预警的组织和血浆检测指标。     

HPV16编码蛋白与宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2表达的关系

目的：研究人乳头瘤病毒16（HPV16）编码蛋白的表达与宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2基因表达水平的关系,探讨依赖于HPV感染的宫颈癌发病机制。方法：设计与合成HPV16编码基因E6和E7序列特异性短发夹RNA（shRNA）寡聚核苷酸片段,构建表达shRNA的pRNAi载体,其中携带绿色荧光蛋白（GFP）报告基因,以此感染HPV16阳性的SiHa宫颈癌细胞,采用荧光成像和实时荧光定量PCR（qPCR）分析等方法,评价载体转染效率、抑制效率及候选基因转录表达水平的变化。结果：在激光共聚焦显微镜下,观察到释放绿色荧光的细胞群,转染成功;根据定量qPCR分析,HPV16编码基因E6和E7的mRNA表达水平明显下降,shRNA表达载体转染产生抑制效率;CDK4和BCL-2 mRNA表达水平明显下降,推测抑制HPV基因转录后,可能抑制宫颈癌细胞生长,引起细胞周期停滞;抑制E7基因表达后,CALCA和TFPI-2 mRNA表达水平明显上升,而抑制E6基因表达后,对上述基因表达水平的影响不明显。结论：HPV16编码蛋白质E7可能引起宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2基因表达下调,此为揭示依赖于HPV感染的宫颈癌发病机制提供了依据。     

东北菱粗多糖的提取和纯化方法的评价

目的:研究提取东北菱多糖的最佳溶剂,比较4种多糖纯化方法对东北菱粗多糖的纯化效果。方法:将东北菱粗提物分为3份,分别用甲醇、乙醇和丙酮作为溶剂提取粗多糖。分别采用Sevag法、三氯乙酸法、盐酸法和活性炭法对东北菱粗多糖进行脱蛋白处理。用比色法检测东北菱提取物中多糖水平和纯化后样品中多糖水平和蛋白质水平,比较纯化效果。结果:3种提取物中,以丙酮为溶剂的东北菱提取物中多糖水平最高,为33.69%,蛋白质水平为5.51%。经Sevag法、三氯乙酸法、盐酸法和活性炭法处理后的溶液中多糖水平分别为46.53%、43.44%、41.24%和36.66%;蛋白水平分别为5.64%、5.41% 、5.41%和5.51%。结论:丙酮为提取东北菱粗多糖的最佳溶剂。4种纯化方法各有优缺点,Sevag法对于多糖水平的提高效果明显,适合东北菱粗多糖的提取。