去甲斑蝥素致凋亡K562细胞中miRNA表达的变化

目的研究去甲斑蝥素(CA)致白血病细胞凋亡后miRNA表达谱的变化,寻找差异表达的miRNA。方法应用不同质量浓度的去甲CA处理K562细胞,四甲基偶氮唑盐法检测其细胞生长抑制率,筛选有效的药物质量浓度和作用时间;提取细胞内miRNA,微阵列杂交技术筛选药物作用后细胞内发生变化的miRNA;实时定量PCR技术验证微阵列杂交结果。结果 20 mg.L-1的去甲CA作用36 h为理想的药物浓度和作用时间;miRNA微阵列杂交筛选出表达升高的miRNA 160多种,降低的miRNA 120多种;实时定量PCR进一步分析发现miR-193B、miR-511、miR-212等的表达降低,而miR-769、miR-125A、miR-100等的表达显著升高。结论去甲CA可诱发白血病细胞凋亡,并引起细胞内多种miRNA的改变。     

S 腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因沉默抑制乳腺癌MCF7细胞生长的研究

目的探讨S 腺苷甲硫氨酸脱羧酶（SAMDC）基因沉默对乳腺癌MCF 7细胞增殖及侵袭能力的抑制作用。方法用特异性沉默SAMDC基因表达的RNA干扰真核表达载体SAMDC shRNA表达载体(pGPU6 SAMDC)转染乳腺癌MCF 7细胞,采用RT PCR和Western blot技术分别检测SAMDC mRNA和蛋白质表达水平;细胞增殖实验（CCK 8法）和细胞周期分析评价SAMDC基因沉默对乳腺癌MCF 7细胞增殖的影响,肿瘤侵袭实验观察SAMDC基因沉默对乳腺癌细胞MCF 7侵袭活性的影响。结果SAMDC shRNA表达载体转染后,MCF 7细胞SAMDC mRNA水平下调43.8％,蛋白表达水平下降66.5％;MCF 7细胞的增殖活性和侵袭能力均受到明显抑制,细胞增殖活性下降37%,细胞周期分析G1期细胞增加。结论SAMDC基因沉默可通过延长细胞周期的G1期而抑制乳腺癌MCF7细胞的增殖,并能降低癌细胞侵袭活性,提示SAMDC可作为乳腺癌基因治疗的靶分子。     

胃癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义

目的从mRNA和蛋白质水平研究鸟氨酸脱羧酶在胃癌中的表达，探讨其在胃癌形成中的作用。方法采用半定量RT PCR技术检测胃癌及相应癌旁组织中ODC mRNA的表达量，采用Western blot在蛋白质水平检测胃癌及相应癌旁组织中ODC的表达量，并做统计学分析。结果21例胃癌组织中ODC在mRNA和蛋白质水平的表达量均高于癌旁组织（P<0.01）。ODC的表达量低分化胃癌组织显著高于高中分化（P<0.01）。结论ODC表达增强在胃癌发生发展中起重要作用，提示ODC可作为胃癌的基因诊断与治疗的靶点。