肺癌A549细胞诱导RAW264.7破骨细胞分化中AMPK信号通路的作用

目的:探讨AMPK信号通路在体外肺癌细胞诱导破骨细胞分化中的作用。方法:将肺癌A549细胞与RAW264.7细胞共培养后随机分为阴性对照组、阳性对照组、AICAR组,药物干预后行TRAP染色观察破骨细胞的分化,流式细胞仪观察破骨细胞细胞凋亡情况,qPCR检测破骨细胞AMPK、mTOR和CTSK mRNA的表达,Western blot检测破骨细胞AMPK、p-AMPK、mTOR和p-mTOR蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,AICAR组破骨细胞数明显减少,差异具有统计学意义（P＜0.05）;对诱导破骨细胞凋亡的作用无差异;上调AMPK的mRNA和蛋白表达,下调mTOR的mRNA和蛋白表达,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:AICAR可以抑制肺癌细胞诱导破骨细胞分化,而AMPK/mTOR信号通路可能参与了肺癌细胞诱导破骨细胞分化过程。     

三氧化二砷通过抑制NF-κB增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用研究

【摘要】 目的 研究三氧化二砷(As2O3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及对核转录因子-kappaB(NF-κB)表达的影响。方法 采用As2O3、TRAIL单用和联合作用于体外培养的A549细胞,以四甲基偶氮唑蓝比色法测细胞增殖抑制率和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κB mRNA的表达,Western blot检测NF-κB蛋白的表达,酶联免疫吸附(ELISA)检测NF-κB的活性。结果 As2O3与TRAIL联用对A549细胞增殖的抑制作用均比单药组强(P<0.05);联合用药组诱导凋亡作用强于单药组(P<0.05);联合用药组明显抑制NF-κB表达,并抑制其活性(P<0.05)。NF-κB mRNA、蛋白及其活性与细胞凋亡率呈负相关（P均<0.05）。结论 As2O3可能通过NF-κB通路,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用。     

ATO联合TRAIL对肺癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合三氧化二砷（ATO）对裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用及其可能机制。方法将裸鼠肺癌移植瘤模型随机分为阴性对照组、TRAIL组、ATO低剂量组（ATO1组）、ATO高剂量组（ATO2组）、TRAIL联合ATO组,称取瘤质量并计算抑瘤率,采用免疫组化法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）的表达。结果与阴性对照组比较,ATO1组、ATO2组对裸鼠肺癌移植瘤均具有抑制作用,TRAIL联合ATO组具有协同增效作用,并且上调Caspase-3的表达,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 ATO能增强TRAIL对裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用,其机制可能与促进Caspase-3表达有关。     

三氧化二砷联合TRAIL抑制肺癌A549细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抑制肺癌A549细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法采用不同浓度的As2O3与TRAIL联合作用于体外培养的肺癌A549细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和Hoechest染色观察检测其对A549细胞的抑制作用。以流式细胞术检测其对A549细胞的凋亡诱导作用和细胞周期。结果不同浓度的As2O3与TRAIL联用对A549细胞增殖的抑制作用均比单药组强。联合用药组从形态学观察及流式细胞术结果显示联合用药组可检测到大量凋亡A549细胞,明显多于单药组;并将A549细胞阻滞在G2/M期。结论 As2O3与TRAIL联用于人肺癌A549细胞可协同抑制其增殖,机制可能是将细胞阻滞在G2/M期;并可诱导细胞凋亡。     

三氧化二砷逆转A549细胞对TRAIL耐药的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)逆转人非小细胞肺癌A549细胞对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)耐药的机制。方法将处于对数生长期的A549细胞分为对照组(仅加入DMEM)及实验组,实验组又分为As2O3组(1μmol/LAs2O3处理)、TRAIL组(100μg/L TRAIL处理)及联合组(1μmol/L As2O3、100μg/L TRAIL联合处理)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549细胞核因子kappa B(NF-κB)、caspase-3、survivin mRNA的表达。结果作用24、48、72h后,联合组A549细胞的增殖抑制明显增强(P<0.05),且呈时间依赖性。As2O3、TRAIL联合作用48h可明显下调NF-κB、survivin mRNA,上调caspase-3mRNA的表达。结论 As2O3通过NF-κB通路下调survivin,上调caspase-3,从而增强TRAIL诱导A549细胞的凋亡。     

三氧化二砷增强TRAIL杀伤人A549细胞的作用及机制研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)增强重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人非小细胞肺癌细胞(A549)的作用及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测As2O3及联合TRAIL对人A549的IC50值;不同浓度As2O3与TRAIL联合作用48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Survivin、Caspase-3 mRNA表达变化。结果 As2O3有抗肿瘤活性,IC50值为(42.44±0.66)μmol.L-1;As2O3与TRAIL联用时IC50值为(7.04±0.19)μmol.L-1;As2O3协同增强TRAIL的抗肿瘤活性,CDI值为0.94。联合药物组作用48h后,随As2O3浓度增高Survivin mRNA的表达降低,Caspase-3mRNA的表达增强。结论 As2O3是有效的化疗药物,通过下调Survivin mRNA的表达,上调Caspase-3 mRNA的表达,逆转A549的耐药性,协同TRAIL增强对肺癌细胞的杀伤作用。     

三氧化二砷增强TRAIL对肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL）联合三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用及可能机制。方法:将裸鼠肺癌移植瘤模型随机分为生理盐水组、TRAIL组、ATO组及TRAIL+ATO组,称瘤重并计算抑瘤率,用RT-PCR检测NF-κB、Caspase-3、Survivin基因表达变化。结果:与生理盐水组比较,ATO组对裸鼠肺癌移植瘤具有抑制作用,联合用药具有协同增效作用,抑制NF-κB 表达,下调Survivin mRNA,上调Caspase-3的表达。结论:ATO可能通过NF-κB通路,下调Survivin,上调Caspase-3增强TRAIL对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。     

As2O3对TRAIL抑制人肺癌A549细胞增殖及调节DR4 mRNA、DR5 mRNA表达作用的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）抑制人肺癌A549细胞增殖作用的影响及机制。方法体外培养A549细胞至对数生长期后随机分为As2O3组、TRAIL组、联合组及对照组,As2O3组分别加入1、10μmol／LAs2O3,TRAIL组加入100μg／LTRAIL,联合组分别加入1μmol／LAs2O3＋100μg/LTRAIL、10μmol／LAs2O3＋100μg／LTRAIL,对照组加入DMEM培养液。四组均继续培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况,计算细胞增殖抑制率（IR）;用RT-PCR法检测死亡受体4（DR4）mRNA、死亡受体5（DR5）mRNA表达变化。结果 联合组IR显著高于As2O3,组及TRAIL组,尤以作用48h和72h为著（P均〈0．05）;联合组DR4 mRNA和DR5 mRNA表达均明显强于As2O3组及TRAIL组（P均〈0.05）。结论 As2O3,可增强TRAIL对A549细胞增殖的抑制作用,机制可能为上调DR4m RNA和DR5 mRNA表达;此为肺癌的临床靶向治疗根供了依据．     

三氧化二砷对肺癌作用的研究进展

三氧化二砷（arsenic trioxide AS2O3）是传统中药砒石的主要成分,是一种剧毒化合物。但低剂量AS2O3却是一种有效的中药,能治疗牛皮癣,梅毒和类风湿性关节炎等多种疾病。近年研究发现,AS2O3对急性早幼粒细胞性白血病（APL）具有诱导细胞凋亡的作用。此后,国内外对AS2O3的研究发展很快,相继在肝癌、胃癌等腹腔实体肿瘤中取得较大的研究进展。但目前国内外关于AS20,对肺癌的作用研究还处于初始阶段,有关报道尚少。现将其对肺癌作用的研究进展作一综述。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与肺癌治疗

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是近年新发现的一种凋亡诱导配体,可以激活多信号传导途径诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有杀伤作用.TRAIL能诱导肺肿瘤细胞发生凋亡而对正常细胞没有毒性,这为肺癌的治疗提供了新的途径.