在线镉柱还原—流动注射法测定水中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮

目的探索一种测定水中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的简单快捷方法。方法利用在线镉柱还原—流动注射法,测定养殖海水、地表水、自来水、地下水等水样中的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮。结果硝酸盐氮检出限为0.64μg/L,在20.0~2 000.0μg/L范围内呈理想线性关系,相关系数r=0.9999,相对标准偏差为0.97%,样品测定频率为60样/h,实际水样的加标回收率为90%~106%;亚硝酸盐氮的方法检出限为0.12μg/L,在2.0~200.0μg/L范围内呈理想线性关系,相关系数r=1.0000,相对标准偏差为0.35%,样品测定频率为90样/h,实际水样的加标回收率为92%~109%。结论在线镉柱还原—流动注射分析法简单快捷,测定结果满意。     

miR-654-3p靶向GMFB抑制骨肉瘤细胞增殖的作用及机制研究

目的 探究miR-654-3p对骨肉瘤细胞增殖的影响，预测其靶基因并评估靶基因对骨肉瘤患者生存预后的干预情况。方法 选择GEO数据库中GSE70367数据集进行差异分析，筛选骨肉瘤细胞中异常表达的miRNA，通过RT-qPCR检测miR-654-3p在骨肉瘤细胞系143B、MG-63、SAOS2和HOS中的表达情况。通过TargetScan和miRmap数据库预测miR-654-3p的靶基因，采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-654-3p与GMFB基因的结合。用CCK8实验和CFU实验分析miR-654-3p和GMFB对骨肉瘤细胞MG-63和HOS增殖的影响。下载TCGA数据库中肉瘤患者的GMFB表达数据和临床信息，通过R软件包绘制GMFB对生存预后影响的KM曲线以及预测肉瘤患者1年、3年和5年生存率的列线图。结果 与人正常成骨细胞hFOB1.19相比，骨肉瘤细胞系143B、MG-63、SAOS2和HOS中miR-654-3p的表达均明显降低（P＜0.05）。miR-654-3p与GMFB基因结合，并负调控GMFB的表达。miR-654-3p模拟物在体外明显抑制骨肉瘤细胞的增殖，而GMFB转染能够逆转抑制作用（P＜0.05）。GMFB高表达的骨肉瘤患者的总体生存率明显低于低表达患者（P＜0.05），且通过列线图能够预测患者的1年、3年和5年生存率。结论 miR-654-3p通过靶向负调控GMFB基因表达，抑制骨肉瘤细胞的增殖，且GMFB高表达与骨肉瘤患者的预后呈负相关。