可溶性CD40分子与EGFP融合基因的构建及在树突状细胞中的表达及功能鉴定

CD40与T细胞表面对应的配体CD154（CD40L）相互作用后，可以进一步刺激抗原提呈细胞，上调其CD80／CD86的表达，促进T细胞的活化。可溶性CD40蛋白（soluble CD40，sCD40）由CD40信号肽和胞外功能区构成，能够与膜表面CD40竞争性结合CD40L的功能区域。     

胰岛素瘤11例诊治体会

目的：提高胰岛素瘤的诊断与治疗水平。方法：对11例胰岛素瘤的诊治资料进行回顾性总结。结果：术前B超阳性率18％,CT阳性率27％,术中探查阳性率90．9％。种肿瘤摘除10例。远段胰腺切除1例。结论：Whipple三联征是诊断的主要依据。手术是治疗胰岛素瘤的最佳方法,术中仔细探查,监测血糖是保证疗效的关键。     

大鼠肝癌免疫微环境中Treg与IL-10水平的变化及意义

目的：探讨大鼠肝癌免疫微环境中Treg的数量与IL-10表达水平的变化及意义。方法40只雄性Wistar大鼠随机分成三组,肝癌模型组（20只）、生理盐水组（10只）、空白对照组（10只）,肝癌模型组大鼠按100 mg/kg给予腹腔注射DEN（二乙基亚硝胺）诱导肝癌模型。光镜下观察肝组织病理改变,流式细胞术检测肝组织CD 4＋CD 25＋Treg的百分率,应用免疫组织化学SABC法检测肝组织Treg和IL-10的表达水平,并对Treg和IL-10的变化及意义进行研究。结果成功制备大鼠诱导性肝癌模型,在镜下观察到纤维化、癌结节和癌细胞形成。流式细胞术检测显示肝癌模型组肝癌组织中Treg占CD 4＋T细胞的比例为（14.32±4.84）%,显著高于空白对照组的（5.64±6.10）%和生理盐水组的（7.95±3.55）%,差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组化法检测肝癌模型组肝癌组织中Treg和IL-10的表达高于空白对照组和生理盐水组（P＜0.05）。CD 4＋CD 25＋Treg与IL-10的水平呈明显正相关（P＜0.05）。结论大鼠肝癌免疫微环境中IL-10和Treg相互作用,共同参与了对肝癌免疫微环境的免疫抑制调节作用。     

肠道缺乏胆汁酸对大鼠肝再生的影响

目的 探索肠道缺乏胆汁酸对肝再生的影响.方法 通过喂养大鼠0.2%胆酸(胆酸负荷组)、2%考来烯胺(胆酸缺乏组)建立干扰肠道胆汁酸代谢的动物模型,以喂养标准饲料作为对照组,所有大鼠均行70%肝部分切除术(PH).比较PH后0、1、2、3、7 d三组大鼠的肝脏再生情况,并检测法尼酯衍生物X受体FXR及其靶基因胆汁酸合成限速酶CYP7a1的mRNA表达.结果 胆酸缺乏组的肝再生率在PH后3、7 d显著低于胆酸负荷组和对照组(P＜0.05),1 d时PCNA和Ki-67标记指数(22.21%±2.31%、17.25%±6.50%)显著低于胆酸负荷组(44.4%±4.92%、30.83%±3.91%)和对照组(38.74%±6.42%、27.04%±7.22%),且标记指数高峰延迟.在PH后,胆酸缺乏组FXR mRNA表达显著低于其他两组,而FXR的靶基因CYP7al的mRNA则随时间升高,明显高于其他两组.结论 肠道缺乏胆汁酸可延迟肝脏再生,并伴随FXR mRNA表达下降.     

应激性溃疡研究进展

一、概念认识应激性溃疡是指机体在严重损伤应激状态下特別并发休克感染时,胃十二指肠粘膜发生浅表糜烂或溃疡,临床主要表现是上消化道出血,很少发生穿孔。本病Celsus首次报道后,多年来定义一直存在争议,命名有急性糜烂性出血性胃     

转染可溶性CD40基因的树突状细胞在体外对T淋巴细胞功能的抑制作用

目的探讨转染可溶性CD40(sCD40)基因的树突状细胞(DC)在体外对T淋巴细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的细胞毒活性的影响。方法采用脂质体转染法,将携带鼠CD40胞外区和绿色荧光蛋白的融合基因的质粒pEGFP-N1/sCD40转染小鼠DC细胞株(DC 2.4)。以Balb/c小鼠淋巴细胞为反应细胞,分别以转染组DC、空载体转染组(空载体组)DC和未行转染处理的DC(空白DC)作为刺激细胞,进行单向混合淋巴细胞培养,四唑氮化合物比色法检测细胞增殖情况。用乳酸脱氢酶释放试验和流式细胞术检测转染组DC及其培养上清液对CTL细胞毒活性及其凋亡的影响。结果转染组DC及其培养上清液对同种细胞刺激的淋巴细胞增殖反应有显著的抑制作用(P<0.05),并对特异性CTL的细胞毒活性具有明显的抑制作用(P<0.05);转染组DC可诱导CTL凋亡(P<0.05)。结论稳定表达sCD40-EGFP融合蛋白的DC,在体外对T淋巴细胞的增殖和CTL的细胞毒活性具有明显的抑制作用,并可诱导CTL凋亡。     

核因子-κB活化在梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障功能损害中的作用

目的：探讨NF-КB的活化在梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障功能损害中的作用。方法：30只体重为230g～260g雄性Wistar大鼠随机分三组：假手术组（sham operation，SH组）（n=10）、梗阻性黄疸组（obstructivejaundice，OJ组）（n=10）、四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂治疗组（OJ＋PDTC组）（n=10）。建立梗阻性黄疸的动物模型，术后3周分批行下腔静脉采血后处死，取胰腺和回肠末段组织。检测血浆内毒素、D-乳酸、TNF—α、IL-6及细菌易位的变化情况，观察各组大鼠回肠黏膜的形态学变化，免疫组织化学S-P法检测回肠黏膜NF．KB的活化。结果：OJ组细菌易位、血浆内毒素、D-乳酸、TNF-α、IL-6浓度比SH组明显升高，差异有统计学意义（P〈O．05）。OJ＋PDTC组细菌易位、血浆内毒素和D-乳酸浓度比OJ组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。SH组回肠黏膜少见NF-КB活化的细胞。而OJ组出现大量核内NF-КB活化，比SH组明显增多，差异有统计学意义（P〈0．05）。OJ＋PDTC组NF-КB活化细胞明显少于OJ组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：NF-КB活化在梗阻性黄疸时肠道黏膜屏障功能损伤中可能起重要调控作用。     

生长抑素抑制人类肝癌细胞株 HepG2生长的机制及对p16基因表达水平的影响

 目的　探讨生长抑素（SST）抑制人类肝癌细胞株生长的机制及对p16基因表达水平的影响。方法　取液氮保存的人类肝癌细胞株HepG2培养后,随机分为三组：对照组（A组）不含SST、低浓度组（B组）SST为10-8mol／L、高浓度组（C组）SST为10-5mol／L,用流式细胞术（FCM）检测细胞周期,RT-PCR法检测p16基因mRNA表达变化。结果　HepG2经不同浓度SST作用24 h后FCM检测细胞周期发现,A组、B组、C组G1期细胞所占比例均值分别为（51.41±3.27）%、（65.43±3.41）%、（69.02±3.75）%,而S期细胞所占比例均值为（36.86±2.31）%、（20.34±2.52） %、（18.50±3.09）%,G2期细胞所占比例均值为（11.46±1.96） %、（14.23±3.83）%、（12.48±3.18）%。与A组相比,B组、C组G1期细胞明显增多,而S期细胞相对减少。经RT-PCR法检测,各组均表达p16基因mRNA,但B组、C组表达明显增强。结论　SST对人类肝癌细胞的抑制可能是通过提高p16基因表达而发挥作用的。     

原发性甲状旁腺功能亢进症的临床特点与外科治疗

近年来，由于诸多因素的影响，我国的剖宫产率有增无减，并出现了一些并发症，现就这一现象的成因、弊端、干预情况表述如下。     

乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中对线粒体的作用。方法采用健康杂交狗全肝缺血再灌注模型,检测肝功能、线粒体Na+-K+-ATP酶活性及电镜观察线粒体形态的变化。结果实验组缺血15min后Na+-K+-ATP酶活性为0.128±0.012,而对照组为0.089±0.011(P<0.05);再灌注1h后实验组Na+-K+-ATP酶活性为0.121±0.011,对照组为0.092±0.025(P<0.05)。实验组线粒体结构损伤较对照组明显减轻。结论乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中对线粒体有明显保护作用,其机制是稳定线粒体膜结构及增强线粒体Na+-K+-ATP酶活性。