千金藤素通过抑制TLR4-NLRP3炎症小体及炎症因子治疗痛风性关节炎

[目的] 评价千金藤素的体内外抗炎效果，探讨其治疗痛风性关节炎的作用机制。[方法]采用噻唑蓝(3-(4，5-Dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltet -razolium bromide，MTT)比色法检测千金藤素对RAW264.7巨噬细胞的活性抑制作用。采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测千金藤素对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)和 IL-6分泌的影响。以免疫印迹法分别检测千金藤素对Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88，MYD88)、NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3，NLRP3)/凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC)/半胱天冬酶-1(caspase-1)炎症小体的蛋白表达的影响。采用尿酸钠诱导SD大鼠关节炎模型，通过炎症指数以及TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子及TLR4-NLRP3相关蛋白的表达，评价千金藤素的体内抗炎作用。[结果] 千金藤素抑制RAW264.7细胞活力的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration，IC50)为(62.51±5.36) μmol·L-1，弱于秋水仙碱(26.89±5.14) μmol·L-1。在RAW264.7细胞中，1～10 μmol·L-1千金藤素显著抑制尿酸钠晶体诱导的炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌与mRNA表达，也抑制了尿酸钠晶体诱导的TLR4、MYD88及NLRP3炎性小体的蛋白表达。在关节炎大鼠模型中，1～10 mg·kg-1千金藤素能够剂量依赖性地减轻关节肿胀，并抑制TNF-α、IL-1β和IL-6分泌及TLR4-NLRP3炎症小体的蛋白表达。[结论] 千金藤素可通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达，以及抑制尿酸钠介导的TLR4-NLRP3炎症小体的表达，发挥抗关节炎作用。