食管癌的新辅助治疗进展

新辅助治疗是在成功的术后辅助治疗经验基础上提出的术前辅助治疗。其目的是增加手术切除肿瘤的可能性并提高患者的生存率,包括新辅助化疗、新辅助放疗和新辅助放化疗。本文拟就食管癌的新辅助治疗作一综述。     

Ⅳ期非小细胞肺癌化疗同期胸部三维适形放疗基于常规血液学指标建立的预后评分模型探讨

目的:基于常规血液学指标建立Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗同期胸部三维适形放疗(3DCRT)的预后模型。方法:回顾性分析230例接受化疗同期3DCRT的Ⅳ期NSCLC临床资料及治疗前1周内的血液学指标,Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank法组间比较及单因素预后分析,根据多因素Cox比例风险回归模型分析的偏回归系数β值对独立危险因素赋值并建立临床预测模型。结果:全组患者中位生存时间和中位无进展生存期分别为12.4个月和7.1个月,1、2、3年OS分别为55.2%、19.8%和11%。单因素分析显示吸烟史、体重下降、白细胞、血小板、白蛋白、中性粒细胞绝对值、纤维蛋白原、转移器官数目、脑转移、骨转移、化疗周期数对OS有影响(P=0.013、0.03、0.003、0.044、0.011、0.001、0.001、0.014、0.02、0.023、0.001);多因素Cox比例风险回归模型分析显示中性粒细胞绝对值、纤维蛋白原、白蛋白、脑转移、化疗周期数是OS的独立的预后因素(HR:2.502、1.635、2.020、1.517和2.107;P<0.05)。根据评分将NSCLC患者分为:低危组、中危组、高危组,各组对应的1年和2年生存率分别为76.3%、45.4%、16.1%和20.3%、16%、3.2%(χ~2=37.59,P<0.001)。结论:中性粒细胞绝对值、纤维蛋白原、白蛋白、脑转移、化疗周期数是Ⅳ期NSCLC化疗同期胸部3DCRT的独立预后因素,基于血液学指标建立的预测模型能很好的预测Ⅳ期NSCLC患者预后。     

G蛋白调节信号5在肿瘤中的作用

G蛋白调节信号5(RGS5)是G蛋白信号调节蛋白(RGS)家族中的一员,负性调节该信号通路的传导.RGS5主要表达在血管周细胞,与血管的发生、发展及成熟密切相关.RGS5基因缺失可引起周细胞成熟和肿瘤血管正常化,此期间联合化疗或免疫治疗可提高疗效,提示RGS5可能成为抗肿瘤治疗的新靶点.RGS5还与肿瘤转移、细胞凋亡有关,可通过诱导细胞凋亡来增加抗肿瘤治疗的效果.     

BMAL1基因抑制耐放射鼻咽癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力机制研究

目的探究BMAL1基因对耐放射鼻咽癌细胞株（5‐8FR）增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法 小剂量分次照射构建鼻咽癌耐放射细胞5‐8FR,运用克隆形成实验结果拟合多靶单击模型并计算放疗增敏比。通过蛋白质印迹实验检测5‐8FR和对照组5‐8F细胞株中PI3K/Akt/MMP‐2/9信号通路相关蛋白的表达。构建BMAL1基因的高表达及敲除载体,分别转染鼻咽癌细胞株5‐8F和耐放射细胞株5‐8FR,获得BMAL1基因过表达（pcDNA‐BMAL1）及其对照组（pcDNA）和干扰（BMAL1‐shRNA）及对照组（con‐shRNA）的稳转细胞株。蛋白质印迹法验证感染效率,检测两组细胞过表达或干扰BMAL1基因后PI3K/Akt/MMP‐2/9信号通路相关蛋白的改变情况。采用CCK‐8法、划痕实验、Transwell法检测过表达及干扰BMAL1基因后耐放疗细胞株5‐8FR增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 鼻咽癌耐放射细胞株中BMAL1基因表达下调,PI3K/Akt通路蛋白及下游相关分子MMP‐2、MMP‐9表达增加,TIMP‐2、TIMP‐1表达降低。过表达BMAL1基因可抑制PI3K/Akt通路蛋白及下游相关分子MMP‐2、MMP‐9表达,促进TIMP‐2、TIMP‐1表达,抑制耐放射鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,干扰BMAL1基因则结果相反。结论 BMAL1基因可以逆转耐放射鼻咽癌细胞株PI3K/Akt/MMP‐2/9信号通路相关蛋白的表达,并抑制耐放射鼻咽癌细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。     

时钟基因Bmal1对鼻咽癌移植瘤放疗敏感性的影响

目的:探讨双向调控时钟基因Bmal1(brain and muscle arnt-like1)对鼻咽癌CNE1裸鼠移植瘤生长的影响及与放疗敏感性的关系。方法:采用慢病毒感染方法,构建Bmal1基因CNE1OE(过表达组)、CNE1OENC(过表达对照组)、CNE1sh3(低表达组)、CNE1shNC(低表达对照组)4株细胞,Western blot验证各组细胞Bmal1蛋白表达情况;4株细胞分别皮下注射相应的4组裸鼠,移植瘤生长后测量其体积;给予6-MeV电子线15 Gy照射裸鼠移植瘤,观察放疗后各组移植瘤体积变化情况。剥离移植瘤,RTPCR及Western blot分别检测Bmal1、P53、P21 mRNA及蛋白表达情况。结果:Western blot结果提示,与各自对照组对比,CNE1OE组Bmal1蛋白过表达,CNE1sh3组Bmal1蛋白低表达,表明细胞转染成功。成功构建裸鼠移植瘤模型,CNE1OE组裸鼠移植瘤体积明显小于CNE1OENC组,CNE1sh3组体积明显大于CNE1shNC组(P<0.05)。放疗后,CNE1OE、CNE1OENC、CNE1shNC组裸鼠移植瘤体积均缩小(P<0.05),其中CNE1OE组缩小最明显。CNE1sh3组放疗前后自身体积变化差异无统计学意义。Bmal1基因、P53及P21的mRNA及蛋白相对表达量在CNE1OE组明显高于CNE1OENC组(P<0.05),CNE1sh3组则明显低于CNE1shNC组(P<0.05)。结论:Bmal1基因过表达能抑制鼻咽癌CNE1裸鼠移植瘤生长,增强其放疗敏感性,可能与P53、P21蛋白上调相关;敲低则促进移植瘤生长,导致其辐射抗拒,可能与P53、P21蛋白下调相关。     

重组人血管内皮抑制素对大鼠放射性心肌纤维化的影响

目的 建立放射性心脏纤维化大鼠模型,观察重组人血管内皮抑制素（恩度）对心肌纤维化的影响,初探转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）与心肌纤维化的相关性。方法 将40只SD大鼠按随机数表法分为4组,每组10只,A组为健康对照组;B组为恩度干预组,恩度（6 mg/kg）腹腔连续注射14 d;C组为单纯照射组,心脏照射25 Gy/5次,连续5 d;D组为照射+恩度干预组,恩度给药方法同B组、心脏照射方法同C组。照射后第1、3个月各麻醉处死5只大鼠。Masson染色评估心肌纤维化情况,Western blot检测心肌TGF-β1、CTGF及胶原蛋白Ⅰ（COL-Ⅰ）型表达。结果 照射后1和3个月,B组未见明显的心肌纤维化表现,C组和D组可见胶原纤维分布于心肌细胞间质。照射后1个月,半定量分析结果显示A组的心肌胶原容积分数（CVF）为（5.20±0.75）%,C组（10.12±2.17）%和D组（10.32±1.36）均高于A组（t=4.74、4.93,P<0.01）,C组和D组的CVF差异无统计学意义（P>0.05）;照射后3个月C组的CVF（13.17±2.67）%仍比A组（5.23±1.32）%高（t=4.49,P<0.01）,C组的CVF低于D组（16.92±3.58）%（t=3.19,P<0.05）。照射后1个月,A组TGF-β1的表达量为0.441±0.063,C组0.817±0.079高于A组（t=5.81,P<0.01）;照射后3个月,A组TGF-β1的表达量为0.501±0.110,C组0.832±0.150高于A组（t=4.19,P<0.01）,D组1.403±0.133高于C组（t=7.24,P<0.01）。照射后1、3个月,各组间CTGF及COL-I的变化趋势与TGF-β1的变化趋势相似。结论 射线可引起心肌纤维化的形成,重组人血管内皮抑制素可能会加重晚期放射纤维化的形成。     

生物钟基因BMAL1及缺氧诱导因子HIF-1α影响鼻咽癌细胞的增殖、迁移

目的:从蛋白水平探讨生物钟基因BMAL1与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)间的关系及两者对鼻咽癌细胞增殖、迁移的影响.方法:通过感染慢病毒方式构建细胞株,蛋白质印迹分析验证感染效率及鼻咽癌细胞中BMAL1与HIF-1α间的关系;采用CCK-8细胞增殖实验检测鼻咽...     

外周血PD-1、CTLA-4、T-reg、pDC与鼻咽癌患者临床特征及疗效的相关性

目的:探讨初治鼻咽癌患者治疗前外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与患者临床特征及即刻疗效的关系，以及以上指标在鼻咽癌患者及健康人群中的表达差异。方法:收集112例初治鼻咽癌患者治疗前临床资料及淋巴细胞亚群和树突细胞亚群数据，进行外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与鼻咽癌患者临床特征及即刻疗效的相关性分析，从112例鼻咽癌患者中随机选取30例患者作为病例组，年龄、性别匹配的30例同期体检健康者作为对照组，分析两组外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC表达差异。结果:112例初治鼻咽癌患者中，年龄≥50岁组与年龄<50岁组相比，外周血PD-1/CTL(%)更高。CTLA-4/CTL(%)与T分期、N分期、TNM分期呈负相关；CTLA-4/CT(%)越高，疗效越好。T-reg(%)与N分期呈正相关；T-reg(%)与M分期存在“S”型曲线关系。pDC与N分期、TNM分期呈负相关。病例组与对照组外周血PD-1/CTL(%)、 T-reg(%)差异存在...     

PD-1抑制剂对心肌炎症微环境及放射性损伤影响的实验研究北大核心CSCD

目的从免疫微环境的角度初探PD-1抑制剂对小鼠心肌损伤的影响及其潜在机制。方法建立小鼠放射性心肌损伤(RIMI)模型, 将20只C57BL/6小鼠随机分为4个组, 每组5只。A组为对照组;B组为PD-1抑制剂组;C组为单纯照射组, 心脏单次照射15 Gy;D组为照射+PD-1抑制剂组。照射后1个月麻醉处死小鼠, HE和Masson染色观察心肌组织形态学改变和评估心肌纤维化;流式细胞术检测心肌CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8淋巴细胞亚群及细胞因子(IL-4、IL-6、IL-17A、TNF-α、TGF-β1、INF-γ)水平;TUNEL检测心肌细胞凋亡率。结果照射后1个月, B组未见明显的心肌纤维化表现, C组和D组可见胶原纤维分布于心肌细胞间质。A、B、C、D组心肌胶原容积分数(CVF)分别为(1.97±0.36)%、(2.83±1.03)%、(5.39±0.77)%、(7.72±1.43)%, A组与B组间的CVF相似(P=0.314), 其余各组间均不同(均P<0.05)。与A组比较, B、C、D组的CD3+T淋巴细胞的绝对值和百分比均增高(均P<0.01), D组高于B组和C组(均P<0.01);A、C、B、D组的CD3+CD4+T淋巴细胞的绝对值和百分比相近(均P>0.05);D组的CD3+CD8+T淋巴细胞的绝对值和百分比都高于A、B、C组(P<0.001)。D组的IL-6、IL-17A、TGF-β1水平均高于A、B、C组(均P<0.001)。A、B、C、D组的凋亡指数逐渐增加, 各组间比较差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论 PD-1抑制剂可通过促进心肌免疫炎症反应加重RIMI。