检验科实习带教的质量控制与实践

检验医学涉及多专业、多学科,近年来检验医学的发展突飞猛进,同时对检验医学质量管理及检验专业人员的要求也日益提高。那么,作为检验后备力量的实习生也面临着更高的要求。笔者总结多年带教经验认为,与时俱进修订符合时代发展的教学大纲、提高对带教师的要求、全方位注重能力素质的培养及加强实习考核范围与力度,是全面提升实习生带教水平的必由之路。     

慢性肾病患者血清Klotho，HE4，UMOD表达水平与疾病预后的相关性研究

目的　研究慢性肾病(chronic kidney disease, CKD)患者血清Klotho,人附睾蛋白4(HE4)和尿调节素 (UMOD)表达水平在评估疾病预后中的参考价值。方法　对120例CKD患者及100例健康体检对照者血清同时应用ELISA检测Klotho和HE4,电化学发光法检测UMOD表达水平,分析各因子与肾小球滤过率(GFR)之间的关系。患者随访12个月后,根据GFR下降幅度分为恶化组和稳定组,比较两组之间血清因子变化差异,采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清因子与预后的关系。结果　CKD患者血清Klotho,UMOD,GFR和HE4表达水平与健康对照组相比,差异均有统计学意义（t=22.492,58.235,23.668和33.341,均P<0.05）。Klotho,UMOD与GFR呈现正相关性（r=0.682,0.582,P<0.001）,HE4与GFR呈负相关性（r=-0.627,P<0.001）。随访结束时血清Klotho,UMOD水平明显低于随访前,HE4水平明显高于随访前,恶性组患者的变化幅度与稳定组相比差异有统计学意义（t=13.263,18.600和16.645,均P<0.001 5）。随访12个月后患者死亡45例（37.50%）,高Klotho,UMOD水平组不良预后风险低于低Klotho,UMOD水平组,高HE4水平组不良预后风险高于低HE4水平组,差异均有统计学意义（χ2=4.511,3.960,7.484;P=0.034,0.047,0.006）。结论　慢性肾病患者血清中Klotho,HE4,UMOD均存在异常表达,其中血清Klotho,UMOD水平降低以及HE4水平升高可增加肾功能恶化风险,三种血清因子联合可提高对预后评估的参考价值。     

检验科预防医院感染对策

随着科学技术的不断发展,检验医学从可测项目范围到技术先进程度得到了空前的发展,临床实验室(检验科)在临床诊疗过程中的作用也越来越重要[1]。但同时由于检验科每个实验室每天都要接触大量的临床标本,包括血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、穿刺液、胆汁等,其工作人员不仅需要与患者手拉手地采集标本,还要通过多次工序对上述临床标本进行处理,这大大增加了工作人员感染的可能性[2]。姚齐龙等通过调查研究发现检验科各实验室作为医学实验室是医院感染高危科室之一[4]。因此加强管理,在检验科开展预防医院感染的工作已是刻不容缓。1现状及存…     

Eu标记RT-PCR检测丙型肝炎病毒RNA

目的 采用一种新的铕螯合物BHHCT，制备高灵敏度荧光标记物，建立检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA的方法。方法 采用柱层析纯化的方法抽提血清中HCV RNA。以5′端带有生物素的引物进行RT－PCR Tth酶一步法扩增，通过固定于微孔板上的捕获探针与带有生物素的PCR扩增产物杂交后，利用标记有铕的链霉亲合素与生物素的特异性结合，将铕连接到待测核酸上，在特定波长的激光光激发下发出荧光，进行检测。结果 铕标记检测法与酶标法的变异系数、敏感性、特异性分别为10．43％、100％，100％与16．25％，94％，100％。结论 Eu标记RT－PCR Tth酶一步法检测HCV RNA，具有敏感、特异、快速、重复性好、不受环境因素影响和无溴乙锭污染等优点，可望取代酶标法及电泳法。     

纹带棒状杆菌感染临床特征及耐药性分析

目的 分析纹带棒状杆菌感染的临床特征及对常用抗生素的耐药情况,为临床合理用药提供实验室依据。方法 收集2017年3月～2018年12月临床标本中分离的纹带棒状杆菌42株,鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK-2compact全自动微生物鉴定仪及配套的厌氧菌-棒状杆菌(ANC)鉴定卡。用微量肉汤稀释法检测20种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。结果 42株纹带棒状杆菌主要来源为下呼吸道标本(83.3%),分离率以老年病科最高(35.7%)。万古霉素、利萘唑胺及利福平对纹带棒状杆菌有较高的敏感率,庆大霉素、红霉素和阿奇霉素等次之,而β-内酰胺酶类抗生素对纹带棒状杆菌耐药率都在90%以上,其他抗生素如亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素和四环素等敏感率较低。结论 纹带棒状杆菌在临床标本中的分离率增高,多侵犯免疫力低下人群,分离株多为多药耐药菌株,万古霉素、利萘唑胺和利福平为临床首选用药。     

2015-2019 年儿童呼吸道感染嗜血杆菌分离检出及耐药性变迁分析

目的　探讨儿童呼吸道嗜血杆菌的感染情况及耐药性变迁，为临床合理用药提供参考。方法　对2015 年1 月 ~2019 年12 月儿科门诊就诊及住院患儿痰标本中分离的233 株嗜血杆菌属细菌的临床感染特征及药敏试验结果进行回 顾性分析。结果　嗜血杆菌的总检出率为5.1%（233/4575），其中副流感嗜血杆菌51.1%（119/233），流感嗜血杆菌 36.9%（86/233），溶血嗜血杆菌6.4%（15/233）、惰性嗜血杆菌3.0%（7/233）和嗜沫嗜血杆菌2.6%；流感嗜血杆菌 和副流感嗜血杆菌对氨苄西林和复方新诺明耐药率均超过60%，耐药率呈逐年上升趋势；对头孢哌酮/ 舒巴坦及第三、 四代头孢菌素、左氧氟沙星、亚胺培南和阿奇霉素敏感率均大于70%；总β- 内酰胺酶阳性率为44.9%，产酶株全部对 氨苄西林耐药，产酶阴性株中氨苄西林耐药率为22%。结论　嗜血杆菌在儿童呼吸道标本中的检出率较高，对临床常 用抗菌药物耐药率呈逐年上升趋势，临床应根据药敏试验数据合理应用抗生素才能减缓耐药菌株产生。     

曲古抑菌素A通过上调KLF4表达诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡

目的:观察组蛋白乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响,并研究其与Krupell样因子4(Krupell-like factor 4,KLF4)的关系。方法:0、50、100、200、300、500ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h,或100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞0、4、8、12、24、48 h,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况,qRT-PCR检测Ishikawa细胞中KLF4 mRNA的表达情况;将KLF4真核表达载体pcDNA3-KLF4转染Ishikawa细胞,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况。结果:100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h后,Ishikawa细胞的凋亡率显著高于对照组[(30.6±4.5)%vs(7.53±0.93)%,P<0.05];不同质量浓度TSA处理Ishikawa细胞24 h后或100 ng/ml TSA作用Ishikawa细胞不同时间后,KLF4 mRNA表达水平以剂量依赖和时间依赖方式明显增高(P<0.05);pcDNA3-KLF4转染后Ishikawa细胞凋亡率显著增加[(27.3±2.7)%vs(4.53±1.75)%,P<0.05]。结论:TSA能通过诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞中KLF4的表达,促进Ishikawa细胞发生凋亡。     

以寡聚精氨酸为PTD的嵌合基因的表达及其对HER2阳性SGC-7901胃癌细胞的杀伤作用

目的:构建以寡聚精氨酸(R9)为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3的真核表达载体,并检测瞬时转染该载体对HER2阳性SGC-7901肿瘤细胞及HER2阴性HeLa肿瘤细胞生长的影响。方法:用PCR法获得融合了R9的活性caspase-3基因片段,并将其克隆入含有HER2单链抗体e23sFv基因的真核表达载体,以脂质体法转染SGC-7901细胞及HeLa细胞,用间接免疫荧光、细胞计数等方法,检测其在两种细胞中的表达及其对两种细胞生长的影响。结果:成功构建了以R9为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3基因真核表达载体pCMV-e23sFv-R9-casp3,瞬时转染该质粒发现SGC-7901细胞和HeLa细胞均以分泌形式表达e23sFv-R9-casp3蛋白,但SGC-7901细胞生长受到明显抑制,细胞形态发生改变,出现核浓缩等凋亡特征;而HeLa细胞生长未受抑制,细胞形态无明显变化。结论:以分泌形式表达的嵌合蛋白,其HER2抗体部分能够介导靶向识别,R9可以辅助效应分子活化、转位至细胞液,活性caspase-3能高效杀伤细胞。