大、小鼠支气管肺泡灌洗术的研究进展

支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统及其病变的一种重要的动物实验技术,它可以获得呼吸道及肺部深处多种生化因子、炎症介质和免疫细胞等,为动物实验研究提供重要的评价指标和参考依据,是探讨呼吸系统性疾病的一种有效可靠的方法。目前应用于人的支气管肺泡灌洗术已经逐步标准化并在临床广泛开展,但没有一套针对实验动物大小鼠的支气管肺泡灌洗操作的标准。支气管肺泡灌洗液的检测结果受诸多因素共同影响,如灌洗液、灌注压力、灌洗量和回收量以及灌洗液在肺部停留时间等,成功而高效获取灌洗标本是研究和评价呼吸系统性疾病的关键所在。本文总结了目前国内外研究人员常用的灌洗操作方法,为今后进一步开展相关的实验研究提供参考。     

PPARα转基因对小鼠的生理、生化等影响研究

目的 通过与正常C57BL/6小鼠作对照,在不同月龄分析PPARα转基因小鼠生理、生化等数据,比较其差异性,观察PPARα基因对小鼠的生理、生化是否会产生影响.丰富转基因小鼠数据库内容,为该模型实际应用于临床前药物评价提供理论依据.方法 实验分为4组,分别为PPARα雄性组、PPARα雌性组、C57BL/6雄性组和C57BL/6雌性组,9只/组.在动物10周龄、14周龄、18周龄、22周龄、34周龄分别检测血常规、血生化指标,在动物26周龄时观察其心、肝、肾脏器病变情况,并观察动物的一般生长情况.结果 PPARα转基因小鼠与C57B L/6小鼠比较①体重：6周龄到23周龄的PPARα转基因小鼠体重与C57BL/6小鼠体重比较差异无显著性（P＞0.05）.②血常规：10周龄PPARα雌性转基因小鼠红细胞计数（RBC）、嗜碱性粒细胞百分比（BAS％）、淋巴细胞百分比（LYM％）明显高于C57BL/6雌性小鼠,差异有显著性（P＜0.01）.14周龄PPARα雄性转基因小鼠白细胞计数（WBC）、淋巴细胞百分比（LYM％）明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.③血生化：10周龄PPARα雄性小鼠血尿素氮（BUN）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.14周龄PPARα雄性小鼠天冬门氨酸氨基转移酶（AST）、甘油三酯（TG）明显低于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.④组织病理：26周龄PPARα转基因小鼠与C57BL/6小鼠比较,心脏无明显的改变,但肝细胞出现透明病变,肾小管上皮细胞出现脂肪变性.结论 系统收集了PPARα转基因小鼠的体重、血常规、血生化、病理等背景资料,成功分析了其与野生型C57BL/6小鼠之间的差异,为该模型的应用提供参考数据.     

PPARα转基因小鼠在药物毒性评价中的应用

目的 研究PPARα转基因小鼠在评价PPARα激动剂类药物毒性时，是否比传统动物更敏感。方法 8周龄PPARα转基因小鼠（Tg）和C57BL/6J小鼠（WT），雌雄各半，分别随机分成3组，氯贝丁酯高剂量组（400mg/kg）、氯贝丁酯低剂量组（300mg/kg）、溶媒对照组（10%羧甲基纤维素钠）。连续灌胃一个月，给药结束后检测血生化指标、心肝肾脏器系数及病理改变，并观察动物的一般生长情况。结果 ①血生化：Tg♂高、低剂量组肌酐（CREA）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）分别显著高于各对应的野生型对照组（P＜0.01，P＜0.05）。②脏器系数：Tg高、低剂量组肾脏系数与Tg溶媒对照组比较均有显著增加（P＜0.01，P＜0.05）。③组织病理：Tg各剂量组肝脏、肾脏病理损伤较WT各剂量组更严重。 结论 PPARα转基因小鼠评价PPARα激动剂药物肝脏毒性和肾脏毒性时比常规C57BL/6J野生小鼠更敏感，是一个新的动物模型。     

利用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠评价药物心脏毒性的初步探索

目的：研究具有潜在心脏毒性的药物西布曲明（Sibutramine）对心脏特异性CYP2E1（细胞色素P450 2E1，Cytochrome P2E1）基因修饰小鼠（心脏特异性CYP2E1转基因小鼠，α-MHC CYP2E1 transgenic mice，Tg(+)和心脏特异性CYP2E1基因沉默小鼠，α-MHC CYP2E1 silence mice，sTg(+)）的心脏、肝脏、肾脏等的影响，探索使用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠来评价药物的毒性作用，Tg(+)型小鼠是否在评价药物的心脏毒性中具有更高的敏感性。方法：8周龄雄性Tg(+)型小鼠、sTg(+)型小鼠、野生型C57BL/6小鼠（WT），各50只，分别随机分成5组，每组10只，溶媒对照组（灌胃给予纯净饮用水）及4个实验组（分别灌胃给予50mg/kg 、100mg/kg 、150mg/kg 、300mg/kg西布曲明）。给药过程中进行一般症状观察以及存活率的测定；给药15d 后取血并解剖取心脏、肝脏、肾脏三个脏器，测定各组实验小鼠血生化指标（心脏毒性指标（乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB））、肝脏毒性指标（丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP））和肾脏毒性指标（尿素氮（UN）、肌酐（CREA））、脏器系数等，并进行病理组织学检查，免疫组织化学方法观察心脏组织缝隙蛋白43（Connexin 43 ，CX43）的表达情况。结果：1、从心脏损伤血生化指标结果来看，在给药剂量50mg/kg和100mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于WT型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；在给药剂量50mg/kg、100mg/kg和150mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；而在给药剂量300mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著低于WT和sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01），且sTg(+)型小鼠减小的程度最小。2、病理组织学结果显示，Tg(+)和WT型小鼠各个给药组均表现出心脏损伤的迹象。3、免疫组织化学染色显示，随着给药剂量的加大，Tg(+)、sTg(+)和WT型三种小鼠CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量均逐渐下降，且染色颜色逐渐变浅；而CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量下降程度和染色颜色变浅程度由高到低分别为，Tg(+)型小鼠，其次是WT型小鼠，sTg(+)型小鼠。结论：Tg(+)型小鼠在评价药物潜在心脏毒性试验中可能比WT型小鼠具有更高的敏感性，而sTg(+)型小鼠则是一个很好的心脏毒性保护模型。