MTT显色反应实验条件分析

目的 :检验分析MTT实验方法本底高、灵敏度低、稳定性差的影响因素 ,改进实验条件提高灵敏度和稳定性 ,降低本底。方法 :用MTT比色方法 ,细胞毒试验及细胞增殖实验 ,分析比较不同条件下MTT显色反应的性能特点。结果 :比较了 13种溶剂对Formazan的溶解性能。分析检验了琥珀酸脱氢酶在细胞上的分布特点、pH值对MTT反应体系的影响、酚红和牛血清对检验结果的影响 ,提出相应对策。检测了MTT反应时间曲线和细胞活力曲线。分析了改进后的MTT实验方法的灵敏度和稳定性。结论 :以MTT为底物的酶在细胞代谢中主要分布在细胞膜表面。MTT反应体系的pH值为 6 7,比较好的Formazan溶剂是正丙醇、异丙醇和乙二醇乙醚。去掉细胞培养上清 ,检测细胞上的酶 ,用溶剂使蛋白质变性 ,经沉淀去掉蛋白质影响 ,能使MTT实验方法的本底降低 ,灵敏度提高。通常情况下该方法检测K 5 62细胞和人淋巴细胞的灵敏度分别为 10 0 0和 10 0 0 0个细胞左右。     

白介素-2治疗晚期肺癌临床应用剂量与疗效的关系

目的：为了探讨基因重组白介素２（ｒ Ｉ Ｌ２） 治疗肺癌临床应用剂量与疗效的关系。方法：采用临床观察和体外实验（ Ｍ Ｔ Ｔ） 两个途径观察ｒ Ｉ Ｌ２ 不同剂量的效应变化。结果：显示ｒ Ｉ Ｌ２ 的剂量与诱导活性呈非线性关系,临床观察与体外 Ｍ Ｔ Ｔ实验结果相符。结论：提示临床应用ｒ Ｉ Ｌ２ 时应注意,不是ｒ Ｉ Ｌ２ 剂量越大效果就一定越好,而应根据用药部位和用药途径,来选择合适的剂量。     

细胞因子使用方法与用药途径选择

近年来由细胞因子介导的过继免疫疗法，作为免疫治疗的一个分支，在肿瘤、感染、造血功能及免疫性疾病治疗方面取得明显临床效果。随着基因工程技术的发展，以ＩＬ－２，ＩＦＮ为代表的细胞因子产业化生产，为临床应用提供了广阔前景。细胞因子的研究相当深入，但是研究成果距离实际应用转化成临床疗效还有多远？目前已成为基础研究和临床应用人员共同关心的问题，很需要一些既懂理论又熟悉临床的专业人员从事中间转化工作。了解细胞因子作用原理，正确选择使用方法和用药途径，对于提高临床疗效具有重要意义。１细胞因子的种类细胞因子的研…     

不同降温速度对保存的角膜内皮细胞活性的影响

目的通过调节程序控制降温仪的降温速度保存兔角膜，以提高保存角膜的内皮细胞的存活率（ESR）。方法供体角膜150只随机分为对照组和实验组。对照组不做冷冻处理；实验组冷冻147只角膜，带巩膜缘1～2mm的角膜片分别在4种不同浓度梯度的冻存液中预处理各10min，再经过两个阶段（0～-18℃，-18～-80℃）49种不同程序逐步降温至-80℃，最后放入液氮中保存。1个月后水浴复苏供体角膜，洗脱冻存液、染色、同定，行镜下形态学观察并计算角膜内皮细胞存活率。结果镜下观察第一阶段降温速度为2℃／min、第二阶段降温速度为5℃／min时的方法较好，计数细胞的存活率达到75％以上，与其他不同速度下比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论不同阶段不同降温速度下，深低温保存兔角膜对角膜的内皮细胞存活率有明显影响。     

食管癌高发区不同人群血浆维生素B2水平与Antipyrine代谢的实验研究

 关于食管癌高发区的研究报告认为食管癌高发与膳食中营养素如核黄素、烟酸、镁和锌的含量偏低有关。致癌物的氧化代谢研究发现,不同器官的内质纲(特别是肝脏)含有许多酶系统,该酶系统能使许多化学致癌原氧化介毒。     

乳光牙齿漂白胶治疗色素牙的实验与临床研究

目的：研制一种适合于患者家庭使用的疗效好、使用安全、方便、价格低廉的色素牙漂白剂。方法：在传统的色素牙漂白剂——过氧化氢中加入适量盐酸奎宁，应用灵敏的酶联免疫实验方法对过氧化氢的氧化作用进行了４个月的连续检测。结果：发现含不同浓度的盐酸奎宁－过氧化氢随贮存时间延长，其氧化作用有不同程度的降低。呈剂量依赖关系。在实验使用浓度范围内，盐酸奎宁浓度越高，其稳定作用越强，最高浓度与对照组比较，高４～６倍。结论：实验证明用过氧化氢制成色素牙漂白胶加入适量奎宁，漂白效果好，有效期长，无任何毒副作用，便于患者家庭使用     

色素牙漂白胶中过氧化氢稳定性的检测

过氧化氢（ＨｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅＨＰ）漂白色素牙已延用多年。ＨＰ是一种强氧化剂，容易分解，性能不稳定，有效作用时间短，以往只在诊室内临时使用〔１〕。我们研究发现喹宁具有稳定过氧化物的作用。把ＨＰ配制成粘稠的胶剂，通过特制的牙列防护套，让患者带回家中自己漂白色素牙，非常方便，其中加入适量盐酸喹宁，有效作用时间可延长４—６倍。现报道如下：１　材料和方法１１　试剂３０％过氧化氢（ＡＲ　郑州市光华化工公司）；盐酸喹宁（上海医药公司）；辣根过氧化物酶标记的人ＩｇＧ（ＨＲＰ－ｈＩｇＧ，上海生物制…     

酶反应比色法检测细胞介导的细胞毒作用的原理与问题

同位素标记法和酶反应比色法（如ＭＴＴ比色法、ＮＡＧ释放法）是检测ＣＴＬ、ＮＫ细胞、ＬＡＫ细胞等免疫效应细胞细胞毒作用的常用方法。由于后者有简便、经济及不使用放射性同位素等特点,近年来得到了广泛应用,但是它与同位素方法在测定原理上有本质的差别。根据检测原理、计算公式和癌症及癌症化疗患者效应细胞对靶细胞胞毒作用的检测结果,我们认为酶反应比色法并非普遍适用于检测细胞介导的细胞毒作用,特别对用细胞毒药物治疗的患者不宜用此法。     

LAK细胞对晚期肿瘤免疫治疗

观察胎脾、胸腺ＬＡＫ细胞治疗晚期肿瘤的疗效。方法从胎儿脾脏、胸腺制备ＬＡＫ细胞。ＬＡＫ细胞和ＩＬ┐２经外周静脉输注。治疗前后测患者ＮＫ活性。结果ＬＡＫ＋小剂量ＩＬ┐２治疗１４例，ＳＤ１２例，ＰＤ２例。ＬＡＫ＋中剂量ＩＬ┐２治疗５２例，ＣＲ６例，ＰＲ１４例，ＳＤ２８例，ＰＤ４例，有效率３８．４％。治疗后患者ＮＫ活性显著提高。结论ＬＡＫ细胞治疗效果依赖于ＩＬ┐２用量。静注疗效有限