评价副溶血弧菌毒力的Raw-264细胞模型的建立与应用

 目的建立评价副溶血弧菌毒力的Raw-264细胞模型,并以此评价副溶血弧菌临床分离株RIMD2210633株与其重要致病相关基因opaR基因敲除株的毒力。方法以Raw-264细胞为靶细胞,RIMD2210633株及其opaR基因敲除株为效应细胞,通过优化条件,利用CytoTox96Non-RadioactiveCytotoxicityAssay建立细胞模型。结果以5倍于靶细胞的菌量感染靶细胞,37℃孵育1.5h,离心所得上清稀释10倍后,加底物液避光显色10min,反应条件最佳。opaR基因敲除后,菌株的Raw-264细胞毒性升高,并有统计学差异。结论利用副溶血弧菌标准强毒株RIMD2210633菌株建立了评价副溶血弧菌毒力的RAW-264细胞模型,并利用此平台比较了该毒株与其opaR基因敲除株的毒力,为研究副溶血弧菌的致病机制奠定了基础。     

两株副溶血弧菌标准株的肠毒性及细胞毒性和溶血活性比较

目的 评价两株副溶血弧菌标准株在肠毒性、细胞毒性和溶血活性上的毒力差异.方法 通过兔回肠袢实验、Raw264细胞毒性实验和兔红细胞溶血实验比较临床分离株RIMD2210633（tdh＋、T3SS1＋、T3SS2α＋、T3SS2β-、trh-）和环境分离株S251（tdh-、T3SS1＋、T3SS2α-、T3SS2β-、trh-）的毒力表型差异.结果 S251株产生的肠积液量、对Raw264细胞的细胞毒性均弱于RIMD2210633株[（12.37±1.07）ml vs.（1.50±1.50） ml; （35.69±3.07）％ vs.（14.07±0.91）％],且有统计学差异（P＜0.05）,另外S251株对兔红细胞的相对溶血活性明显弱于RIMD2210633株,且具有统计学差异（P＜0.01）,这与基因预测结果相符.结论 S251株的肠毒性、Raw264细胞毒性和溶血活性均弱于RIMD2210633株,该两株菌可作为后续副溶血弧菌致病机制研究的模式菌株.     

CMU/1和CMU/2长爪沙鼠与F344大鼠及BALB/c小鼠4项凝血指标分析

目的测定近交系CMU/1和CMU/2长爪沙鼠和近交系F344大鼠及BALB/c小鼠4项凝血指标,比较不同动物间差异,明确脑缺血模型近交系长爪沙鼠的凝血特性。方法采用MC-4000四通道血凝仪检测4组动物凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和凝血酶时间(TT)。应用SPSS23.0软件对数据进行统计分析。结果 CMU/1的APTT、FIB和CMU/2的FIB标准差较大;CMU/1和CMU/2的PT、FIB与F344大鼠差异显著,APTT与BALB/c小鼠和F344大鼠差异显著。结论脑缺血模型长爪沙鼠近交系动物凝血4项指标与近交系BALB/c小鼠接近,与近交系F344大鼠差异显著。     

腔镜筋膜下交通支离断术联合腔内激光治疗术对静脉性溃疡的疗效

探讨腔镜筋膜下交通支离断术联合腔内激光治疗术对静脉性溃疡的临床疗效。将2017年1月—2020年1月菏泽市中医医院血管外科收治的60例静脉性溃疡患者随机分为观察组(30例)和对照组(30例),观察组采用腔镜筋膜下交通支离断术联合腔内激光治疗术,对照组采用大隐静脉高位结扎剥脱联合交通支结扎术,对比两组患者的治疗效果。结果表明,观察组治疗后1个月和3个月的静脉临床严重程度评分分别为(10.17±2.46)分、(7.63±2.01)分;对照组治疗后1个月和3个月的静脉临床严重程度评分分别为(12.40±2.34)分、(9.10±1.94)分。2种方案均可有效改善患者静脉临床严重程度评分(P<0.05),观察组方案优于对照组(P<0.05)。观察组治疗后1个月和3个月的溃疡面积分别为(3.50±2.33)cm^(2)、(1.82±1.43)cm^(2);对照组治疗后1个月和3个月的溃疡面积分别为(7.34±4.01)cm^(2)、(4.27±2.92)cm^(2)。2种方案均可有效缩小患者溃疡面积(P<0.05),观察组方案优于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组溃疡状态评分2.00(1.00~3.00)分,对照组溃疡状态评分3.00(2.00~4.00)分,较治疗前均有下降(P<0.05),观察组治疗后溃疡状态评分低于对照组(P<0.05)。观察组住院总费用高于对照组(P<0.05)。腔镜筋膜下交通支离断术联合腔内激光治疗术和大隐静脉高位结扎剥脱联合交通支结扎术均为治疗静脉性溃疡的合理方案,腔镜筋膜下交通支离断术联合腔内激光治疗术疗效更为显著。