人ARPC2基因的克隆与表达

目的 构建人His-ARPC2融合蛋白表达载体，并在原核细胞中进行表达与纯化．以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白。方法 采用PCR方法从人肝cDNA文库扩增ARPC2基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pET-14b载体中。对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。转化BL21(DE3)大肠杆菌株，用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达，并利用Ni-NTA亲和层析纯化该融合蛋白。结果 所构建的人ARPC2的His融合蛋白表达载体是正确的，该载体可在大肠杆菌内高效表达，用Ni-NTA纯化获得了相对分子质量约36000的融合蛋白。结论 成功构建了人His-ARPC2融合蛋白表达载体，并在原核细胞中获得了高效表达和纯化，为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

Toll样受体4与心血管疾病

Toll样受体是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体 ,在天然免疫反应中具有重要的作用。TLR4是介导LPS信号跨膜转导的主要受体 ,对于革兰氏阴性菌的感染性炎症至关重要。由于心血管疾病的发生和发展与感染密切相关 ,近来 ,有关TLR4及其介导的信号转导在心血管疾病发病中的作用受到人们的关注。深入研究TLR4在心血管疾病中作用 ,不仅能极大地扩展我们对病原体与宿主免疫反应之间相互作用复杂性的认识 ,更能为进一步揭示心血管疾病的发病机制 ,寻求有效的防治措施提供重要的理论基础。     

左肾上腺血管瘤1例报告

１临床资料患者,女,５０岁,因腹痛伴腰背部酸胀２月入院。查体：神志清楚,生命体征平稳,心肺未见异常。腹平软,无压痛及反跳痛,肝脾无肿大,未触及包块。肾区无叩击痛,未闻及血管杂音。入院后查三大常规正常,血沉２８ｍｍ／ｈ,肝肾功、电解质均无明显异常,ＣＴ示："腹膜后低密度软组织形,性质考虑为神经源性肿瘤"。拟诊为"腹膜后肿瘤性质待查"。在全麻下行腹膜后探查及肿瘤切除术。术中见在肾上腺有约４ｃｍ×６ｃｍ×４ｃｍ血管瘤,左肾、右肾及右肾上腺正常,将肿瘤完整切除。手术顺利,术中血压平稳。病理报告为肾上腺海绵状…     

人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。     

抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获得两株杂交瘤细胞B2．2和E10，其分泌单抗的亚型均为IgG2b。经ELISA、Westernblot和流式细胞仪鉴定，证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE，且两株抗体识别的位点为远隔表位，所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE。这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具。     

严重急性呼吸综合征患者细胞因子与趋化因子表达谱的特征

由于严重急性呼吸综合征(SARS)的免疫病理机制尚未阐明,目前尚无有效药物或治疗方法能够控制这种疾病.为了探讨SARS发病的免疫学机制,我们研究了SARS患者外周血细胞因子与趋化因子的表达谱以及肺和淋巴组织的免疫病理改变.采用液相芯片技术,动态扫描了23例诊断明确的SARS患者血中14种细胞因子与趋化因子;应用反转录PCR、免疫组化和免疫荧光技术对SARS死亡患者经尸体解剖的肺和淋巴组织进行免疫病理学观察.     

组蛋白修饰对炎症反应的调控

表观遗传学（epigenetics）是指在基因的DNA序列不发生改变的情况下,基因的表达水平与功能发生改变,并产生可遗传表型的遗传现象。表观遗传学的研究内容主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑和非编码RNA调控等。     

我国东部地区结节性痒疹患者中医体质类型分布规律

目的探讨我国东部地区结节性痒疹患者中医体质类型的分布特点。方法采用病例对照设计方法,选取120例结节性痒疹患者作为病例组,120例健康体检者作为对照组,参照《中医体质分类与判定表》进行中医体质类型调查,分析其分布规律。结果结节性痒疹患者年龄(41.58±16.27)岁,性别男女比例约1∶1.2,体质类型分布前四位的是湿热质23例、血瘀质20例、气郁质19例、特禀质13例;健康体检者体质类型分布前四位的是平和质33例、气虚质19例、阳虚质14例、痰湿质13例;与对照组相比,病例组偏颇体质明显增多(P<0.01),2组体质构成比亦有显著性差异(P<0.01),其中湿热质、气郁质、血瘀质、特禀质较对照组转化分增加(P<0.05)。结论结节性痒疹的发病与湿热质、血瘀质、气郁质、特禀质偏颇体质类型密切相关。     

成人肾母细胞瘤的临床特点

目的 探讨成人肾母细胞瘤的临床特点.方法肾母细胞瘤患者6例.男4例,女2例.年龄21～58岁,平均31岁.临床表现为腰腹痛4例,其中伴肉眼血尿1例,伴发热1例;腰腹部肿块2例.查体腹部能触及肿块者4例,有肾区叩击痛5例,下腹部压痛1例.6例尿常规检查2例红细胞(++).6例B超检查发现5.0 cm×5.0 cm～22.0 cm×25.0 cm的低回声团块,边界尚清.4例CT检查均发现密度不均、边界不清的实质性肿块,其中1例增强后肿物不均匀强化,中心有出血坏死;CT值11～40 HU,平均22.5 HU,增强后CT值35～78 HU,平均63.5 HU.2例MRI检查,提示实性占位性病变.3例IVU检查提示肾影增大,肾盏受压变细,肾盂积水1例.术前诊断肾肿瘤5例、盆腔包块1例.6例均手术治疗.根治性肾切除术5例,卵巢切除术1例,均同时行腹膜后淋巴结清扫术.术中见肿瘤侵犯胰尾1例,侵犯侧腹壁1例,侵犯下腔静脉1例;2例肾门淋巴结＞1.5 cm×1.5 cm.剖开肿物见切面灰黄或灰白色,4例包膜完整,3例肿瘤中心出血坏死.术后接受化疗加放疗4例,单纯化疗2例.结果 按美国国家肾母细胞瘤研究组(NWTS)分期:Ⅰ期1例、Ⅱ期2例、Ⅲ期2例、Ⅳ期1例.6例均顺利手术切除肿瘤.肿瘤直径4.5 cm～25.0 cm,平均11.8 cm.术后病理确诊,其中组织学分型显示分化良好型5例,分化不良型1例.有淋巴结转移者2例,局部浸润者3例,肺转移者1例(同时存在局部浸润).术后随访1～7年,平均3.5年.5例无瘤生存,1例术后2年死于肺转移. 结论 成人肾母细胞瘤患者就诊时大多已有肿瘤转移或浸润,发生血行转移者也明显多于其他肾肿瘤,早期诊断、根治性手术及术后放化疗可提高生存率.