肝细粒棘球蚴病肝组织细胞免疫及体液免疫反应的免疫组化定量研究

本研究用OK系列单克隆抗体对肝包虫患者肝组织的B、T淋巴细胞及其亚群进行免疫组化染色,且对其细胞密度、比值进行定量分析。发现肝包虫患者肝组织(距病灶>5cm),外囊及毗邻肝组织中CD_3~+、CD_(19)~+、CD_4~+及CD_8~+细胞密度均较对照组显著增高(P<0.01),外囊及毗邻肝组织CD_4~+/CD_8~+细胞的比值较肝包虫肝组织及对照组均有显著降低(P<0.01)。肝包虫肝组织内CD_(19)~+细胞与CD_3~+细胞密度间无显著性差异(P>0.1)。在肝实质区的灶状坏死区内,CD_8~+细胞占优势。实验结果表明,在肝包虫感染时体液免疫及细胞免疫均增强,局部组织反应中CD_8~+细胞占优势提示细胞免疫以抑制性免疫为主,且此抑制性免疫反应有梯度变化,距包虫囊越近则免疫抑制越强,CD_4~+细胞与CD_8~+细胞密度改变可能与肝组织纤维化有关。包虫病时体液免疫与细胞免疫为两个独立的免疫系统,无相关关系。本文研究结果可为包虫病患者化疗、预后提供科学依据。     

鸡胚发育过程N-Cadherin和Neurofilament在视顶盖中的表达模式研究

目的:阐明鸡胚发育过程中神经钙黏蛋白(N-Cadherin)和神经丝蛋白(Neurofilament,NF)在视顶盖中的表达模式.方法:从鸡胚发育第6天(E6)开始到孵化的E20,分别取材、固定、包埋和冰冻切片,采用荧光免疫组织化学法检测N-Cadherin和NF蛋白在视顶盖各层的表达.结果:在鸡胚发育过程中,从E6开始,N-Cadherin和NF便呈强阳性表达,并且表现出明显各层分布的差异,E10-E14时,在NF强表达的区域与N-Cadherin重叠,E14之后NF的表达减弱,N-Cadherin无明显变化.结论:N-Cadherin和NF在鸡胚发育过程视顶盖的表达呈明显的层的分布,二者的表达既存在差异又有重叠.     

小白鼠肾上腺髓质发育分化的组织学和组织化学观察

本文报道了雄性BALB/c小白鼠胚胎14d至生后成年的肾上腺髓质发育分化的组织学和10种组织化学指标的观察结果。胚胎15d时髓质原基贴近并开始穿入皮质原基,17d时完全穿入皮质原基内。生后1周末出现间接嗜铬反应,并能清楚地区别肾上腺素细胞和去甲肾上腺素细胞。生后2周末时髓质细胞在组织学上和组织化学上发生了比较明显的变化,4周末时接近成年水平。作者根据上述结果对小白鼠肾上腺髓质的结构和功能分化进行了讨论,并将其发育分化过程分为生长分化、机能分化和成熟分化三个阶段。     

Reeler小鼠海马齿状回形态结构与组织化学研究

目的 分析 reelin 基因突变小鼠,即reeler小鼠海马锥体细胞和颗粒细胞的组织化学特征,了解Reelin缺乏对海马皮质发育的影响,为认识Reelin功能提供形态学证据. 方法 用免疫荧光双重标记法, 分别标记野生型和reeler 小鼠海马锥体细胞、颗粒细胞和苔藓细胞; 结果 Reeler小鼠海马皮质板发育明显障碍,表现为锥体层和颗粒层细胞扩散,海马片层状细胞构筑紊乱.颗粒层细胞明显增殖并向门区迁移,以致颗粒层与门区的界限消失,呈鼓槌状结构. 结论 Reelin作为神经细胞迁移的终止信号和细胞增殖的调控信号对神经细胞迁移、发育过程中皮质板的片层化,特别是对调节颗粒细胞的增殖有明显影响.     

小白鼠肾上腺皮质发育分化的组织学和组织化学观察

本文报道了雄性 BALB/c 小白鼠胚胎14 d 至生后成年的肾上腺皮质发育分化的组织学和九种组织化学指标的观察结果。小白鼠胚胎时期,肾上腺皮质由永久皮质和胎儿皮质两部分组成。出生前,球状带和束状带已分化出来,而网状带在生后两周末才分化出来。X-带来源于胎儿皮质,于生后两周和三周时最明显,第四周末完全消失。大部分组化指标在生后第四周末接近或达到成年水平。作者根据上述结果对小白鼠肾上腺皮质的结构和功能分化进行了讨论。     

小白鼠肾上腺髓质细胞的电镜观察

本实验对正常成年雄性BALB/c小白鼠肾上腺髓质细胞进行了透射电镜观察。肾上腺髓质细胞内含有丰富的膜包分泌颗粒,根据分泌颗粒的大小、形态、电子密度及空晕的不同,髓质细胞可以分为两种,即肾上腺素细胞和去甲肾上腺素细胞。这两种细胞根据胞质电子密度不同,又都可以分为明暗两种类型。戊二醛不但是肾上腺髓质细胞的良好的固定剂,也是区别肾上腺素颗粒和去甲肾上腺素颗粒的良好的组化试剂。本实验还应用体视学方法对肾上腺素颗粒和去甲肾上腺素颗粒进行了处理,得出了这两种颗粒的总体平均直径,并从视体学角度对以前的两种测量方法的错误进行了分析。     

海马发生以及细胞与纤维构筑的形成

海马是中枢神经系统中了解最多的器官之一.有关海马结构研究很多,但对其功能及其病理变化的了解还很不够.海马属于异形皮质(allocortex),其片层化结构较为简单,仅为3层,而不同于具有6层结构的同形皮质(isocortex).在功能上,海马属于边缘系统,与情绪变化、学习记忆密切相关,故海马历来是神经科学研究的理想模型,受广大科学工作者的青睐,被广泛应用于神经科学许多领域的科学研究.因此对海马的发育以及细胞与纤维构筑的形成做一概述,有利于对海马功能及病理学意义的理解.     

小鼠子宫内电转基因方法的建立

目的:建立小鼠子宫内电转基因技术,比较分析转染绿色荧光蛋白(GFP)后对胚胎发育及相关蛋白表达的影响.方法:将怀孕15d的小鼠,水合氯醛麻醉后,取出两侧子宫,用毛细管注射针将2μg/μl的pCAGGS-GFP质粒0.5～1 μl准确注射到胎鼠侧脑室,在电压40 V、每次脉冲60 ms,间隔940 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后24 h取材,甲醛固定冷冻冠状切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化,荧光免疫组织化学检测α-SMA的表达差异.结果:妊娠15d孕鼠转染24 h后小鼠成活率80％(8/10),胚胎成活率为54.2％(13/24),存活胚胎GFP阳性表达率为61.5％(8/13),GFP阳性表达胚胎脑组织切片,基因转染区域和正常组织区组织形态结构和α-SMA表达不存在差别.结论:成功建立了小鼠子宫内电转基因的方法.     

齿状回层的形成

中枢神经系统大部分结构内的神经元及其纤维成层排列,尤以大脑皮质、小脑皮质和海马(hippocampus)最为明显.这种层状结构对中枢神经系统完成其功能非常重要,皮质神经元排列紊乱的突变小鼠表现出功能上的障碍.我们曾以联合器官型脑片培养技术(organotypic slice co-culture)为主要手段对海马结构内齿状回(dentate gyrus)层的形成进行了深入细致的研究,结果表明,齿状回内细胞和纤维层的形成受不同因子的控制和调节.