间充质干细胞调控炎性巨噬细胞极化的机制研究进展

间充质干细胞(MSCs)是具有多向分化潜能的干/祖细胞,广泛应用于再生医学试验过程中,其免疫调节和抗纤维化活性逐渐受到关注.在炎症反应中,移植的MSCs介导M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化,进而调控炎症反应、维持组织稳态、促进炎症反应组织修复和再生.MSCs通过白细胞介素-10、诱导型一氧化氮合酶、吲哚胺2,3-双加...     

人脐血间充质干细胞分泌生物活性因子肿瘤坏死因子α-刺激基因-6蛋白对小鼠骨髓来源巨噬细胞亚型转化的影响

背景:干细胞以旁分泌或远距分泌的方式对炎症反应产生调节作用,是干细胞移植治疗疾病的主要机制之一。移植的干细胞分泌大量生物活性分子,如转化生长因子β、前列腺素E2、白细胞介素10和肿瘤坏死因子α-刺激基因-6蛋白(tumor necrosis factorαstimulating gene-6protein,TSG-6)等,影响单核/巨噬细胞从促炎M1表型转化为抑炎M2表型,协调促炎和抗炎因子的平衡,是其调节炎症反应的重要机制,而目前干细胞分泌因子促进单核/巨噬细胞亚型转化的作用机制尚不明确。目的:探讨人脐血间充质干细胞分泌的生物活性分子之一TSG-6对小鼠骨髓来源巨噬细胞表型变化及炎症因子水平的影响,并探究TSG-6蛋白介导的巨噬细胞M2极化的机制。方法:(1)无菌提取6-8周龄Balb/c小鼠骨髓单核细胞,脂多糖及干扰素γ诱导为M1巨噬细胞,分M1(M1)、MT(M1+rh TSG-6)、MM(M1+MSCs)、MMsi(M1+MSCs+TSG-6si RNA)4组共培养3 d,收集巨噬细胞和上清液,流式检测巨噬细胞表型比例;ELISA检测炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素12、肿瘤...     

心肌缺氧状态下间充质干细胞对巨噬细胞 M2 极化的影响及其机制研究

目的 探讨心肌缺氧状态下间充质干细胞（MSC）对巨噬细胞极化的影响,并揭示其调控巨噬 细胞极化的机制。方法 在M0 型巨噬细胞培养液中加入无糖无氧培养的心肌细胞上清液,与MSC 共培养。 采用流式细胞术、Western blotting 及逆转录聚合酶链反应检测M1/M2 型巨噬细胞生物学标志,以判断MSC 在模拟心肌缺氧状态下对巨噬细胞极化的影响,并观察MSC 对巨噬细胞髓样分化因子88 及其上游TLR2、 TLR4 受体表达的影响,以及其下游的细胞核转录因子-κB（NF-κB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK） 信号通路磷酸化的水平。结果 与M0 组比较,模拟心肌缺氧状态下培养的M0 巨噬细胞成功诱导M1 极化 （P <0.05）;与MSC 共培养促进M1 向M2 极化（P <0.05）。同等条件下加入不同浓度髓样分化因子88 抑制剂后, 与M0+OGD 组比较,M2 型巨噬细胞比例随着ST2825 剂量的增加逐渐升高（P <0.05）。与M0+OGD 组比较, M0+OGD+MSC 组白细胞介素10、转化生成因子-β1 表达水平升高（P <0.05）。Western blotting 检测显示 MSC 共培养后,巨噬细胞TLR2、TLR4 及髓样分化因子88 表达下调,其下游的NF-κB 和MAPK 信号通 路标志分子P65、IKKAα/β、JNK1/2、P38、ERK1/2 等磷酸化水平降低。结论 在心肌缺氧状态下,MSC 促进巨噬细胞M2 极化。其机制之一可能是MSC 下调巨噬细胞TLR2、TLR4 及髓样分化因子88 表达,抑制 TLR2/4- 髓样分化因子88 信号及其下游的NF-κB 和MAPK 通路。     

复方丹参滴丸联合人脐血间充质干细胞移植对急性心肌梗死小鼠作用机制研究

目的 观察复方丹参滴丸（CDDP）联合人脐血间充质干细胞（hUCB-MSCs）移植对急性心肌梗死（AMI）小鼠脾脏和外周血单核细胞 M1/M2 亚型转化、心肌炎症反应和心功能的影响。 方法 雄性Balb/C 小鼠结扎冠状动脉左前降支，制备 AMI 模型。 32 只造模成功小鼠随机分为 4 组，对照组、移植组、CDDP 组和联合治疗组，每组 8 只。 造模术后 24 h，各组均接受生理盐水 0.2 mL 注射及 0.2 mL 灌胃，CD-DP 组将 CDDP 270 mg/（kg窑d）溶于灌胃生理盐水，移植组将 1×106 hUCB-MSCs 溶于注射生理盐水，联合治疗组接受两种治疗。 治疗 7 d 后，每组随机选取 5 只小鼠行超声心动图检测心功能，HE 染色观察心肌病理变化和心梗区白细胞计数，Masson 染色观察胶原沉积情况，流式细胞仪检测外周血及脾脏单核细胞M1/M2 比值，ELISA 检测外周血 IL-10 水平。 结果 HE 染色结果显示各组小鼠梗死区均有不同程度心肌细胞丢失，由大量平行或交错的胶原纤维束组成，形成疤痕组织，可见白细胞浸润。 与对照组比较，其余三组残存心肌细胞数量较多，白细胞浸润减少，三组左室射血分数（LVEF）、外周血 IL-10 水平升高（P<0.05），心梗区白细胞计数、胶原沉积比、脾脏和外周血单核细胞 M1/M2 比例降低（P<0.05）。 与 CDDP 组比较，移植组心梗区白细胞计数增加，联合治疗组心梗区白细胞计数减少，移植组和联合治疗组 LVEF、IL-10 水平升高，外周血单核细胞 M1/M2 比例下降（均 P<0.05）。 与移植组比较，联合治疗组外周血单核细胞 M1/M2 比例下降（P<0.05）。 结论 CDDP 联合 hUCB-MSCs 移植治疗可促进 AMI 小鼠心外单核巨噬细胞 M1/M2亚型转化，减低小鼠心肌梗死局灶炎症反应，并改善心功能，疗效优于单纯 hUCB-MSCs 移植。     

GAD-7和PHQ-9自评心理测评量表评估心内科门诊患者焦虑、抑郁状态

目的目前临床上已有多个量表用于检测患者抑郁和焦虑状态,本研究探讨GAD-7和PHQ-9自评心理测评量表对综合医院心血管疾病患者抑郁和焦虑状态评估。方法连续收集2016年3月至6月我院心内科门诊就诊患者400例,采用近期世界卫生组织推荐的广泛性焦虑量表(GAD-7)、9项患者健康问卷(PHQ-9)评估心内科门诊患者焦虑、抑郁状态,并与汉密尔顿焦虑、抑郁量表(HAMA/HAMD)、Zung焦虑/抑郁自评量表(SAS/SDS)进行比较,评价不同的心理测评量表对患者焦虑、抑郁状态检出效率。结果纳入资料完整的385例患者,HAMA他评量表患者焦虑检出率为39.5%,GAD-7量表患者焦虑检出率为42.9%,两者比较无显著差异,但均显著显高于SAS检出率(31.7%)(P0.05);HAMD他评量表患者抑郁检出率为36.1%,PHQ-9量表患者抑郁检出率为38.6%,两者比较无显著差异,但均显著显高于SDS检出率(26.2%,P0.05)。对经HAMA、HAMD他评量表诊断焦虑、抑郁状态患者,GAD-7和PHQ-9量表检测焦虑、抑郁灵敏性高于SAS、SDS量表,GAD-7和PHQ-9量表检测特异性、阴性预测值均大于90%以上;GAD-7和PHQ-9量表检测焦虑、抑郁评分与HAMA、HAMD他评量表评分显著相关。结论 GAD-7/PHQ-9自评心理测评量表与HAMA/HAMD他评心理测评量表对综合医院心内科门诊患者并焦虑、抑郁状态检出率相似,是筛选综合医院心血管疾病患者抑郁和焦虑的适用评估工具。