应用蛋白质印迹技术提高癌胚抗原对胆道肿瘤的诊断特异性

目的　采用测定胆汁中癌胚抗原 (CEA)含量并结合蛋白质印迹 (Westernblot)技术排除CEA相关物质的干扰 ,提高CEA检测胆道恶性肿瘤的特异性。方法　对临床可疑为胆道恶性肿瘤的患者采用酶联免疫吸附 (ELISA)法测定其血液、胆汁中CEA含量 ,对胆汁CEA含量升高的患者进一步应用Westernblot半干转移技术区分CEA及CEA相关物质。结果　所有CEA含量升高的胆道恶性肿瘤患者的胆汁经Westernblot检测均表现为包含有一条相对分子质量为 2 10 0 0 0的特异条带 ,而胆道良性疾病患者既使其CEA含量高于正常也均不含有该条带。结论　采用Westernblot技术检测胆汁CEA可排除CEA相关物质的干扰 ,提高CEA检测胆道恶性肿瘤的特异性。     

器官冷冻损伤的机理及其预防(文献综述)

器官冷冻保存的关键在于将完好的脏器冷冻到一个适当的保存温度(Pegg认为是-80℃)。然后再将其无损伤地复温。在这种一定的条件下(-80℃),有机体的腐败和变质是非常缓慢的,在-196℃时则被认为几乎是没有变化的。所以,如果在降温和复温的时候,能完全地避免损伤,从理论上讲保存器官的时间应该是无限的。迄今,人类在单细胞和胚胎冷冻保存的研究方面已取得了巨大的成功。为了解决移植时器官供需之间的矛盾,寻求长期保存脏器的有效方法,最终建立器官库(Organ Bank),早在60年代,国外就有学者对器官的冷冻保存进行实验研究。但近十     

MAGE-A3抗原肽负载树突状细胞诱导乳腺癌患者免疫应答的研究

目的研究MAGE-A3抗原肽负载对乳腺癌患者树突状细胞(DC)的功能的影响,探讨其是否可以在体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.方法体外培养HLA-A2乳腺癌患者外周血来源的DC,并经孵育携带MAGE-A3抗原肽,用以刺激CTL,用3H-TdR渗入法检测抗原肽负载前后DC刺激同种淋巴细胞增殖能力(MLR),并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL对靶细胞的杀伤效应.结果DC:T为1:10时,单纯DC组刺激能力显著高于抗原肽负载组DC(DC-P)(P＜0.05),但当DC:T低于1:20时后DC-P组刺激能力显著强于单纯DC组(P＜0.05).DC-P组和单纯DC组所激发的CTL对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性有显著性差异,而对细胞株Raji无显著性差异,DC-P组对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性明显高于对细胞株Raji的杀伤活性.结论负载MAGE-A3抗原肽的DC在体外可以诱导乳腺癌患者特异性的CTL免疫应答,为临床以DC为基础的过继免疫治疗的应用提供理论基础.     

急性白血病胸腔浸润1例

患者,女,28岁.20余天前感冒后出现咳嗽,咳白色粘液痰,乏力并伴有胸闷、腹部不适、纳差、,无发热、头痛及恶心、呕吐,睡眠欠佳,鼻腔内易出血,遂到当地医院就诊.用青霉素、庆大霉素及氨苄西林等静脉注射(剂量不详)治疗,12d后上述症状减轻.因劳累后症状再次加重,且下肢出现出血点及紫斑,即来我院就诊.     

胰腺囊腺瘤与囊腺癌6例临床分析

胰腺囊性肿瘤为少见疾病。多数临床医师对其缺乏认识,易误诊误治。我院1981年以来收治6例,均经手术和病理证实。现予报告并结合文献进行讨论。 1 临床资料 例1,男,69岁。上腹不适伴体重下降二月。B超示上腹部肿物。81年10月16日手术,肿物位于胰体尾部,囊性,结节状,10cm×9cm×4cm。囊内容为胶冻状粘液。内     

异种器官移植(文献综述)

由于供体器官来源困难,世界器官移植界重新认识异种移植的价值.本文着重探讨异种超急性排斥的机理,补体、自然抗体、内皮细胞在超急性排斥中的作用以及异种器官移植基础研究的进展.     

原发性结肠冗长引起顽固性便必的外科治疗

报告３２例原发性结肠冗长引起便秘的外科治疗，男性１７例，平均４１．５岁；女怀１５例，平均３８岁。便秘史平均５．５年，排便周期平均５－８天。结肠冗长分为全结肠型及乙状结肠型，其中并发急性乙状结肠扭转５例。钡灌肠Ｘ线检查是主要上科治疗采用左半结肠切除１５例，余为乙状结肠切除，术后随访除２例，疗效略差外，余３０例术后便秘症状均消除，就结肠冗长便秘的概况，手术指征及术中操作的注意点进行了讨论。     

自发免疫耐受大鼠移植肝内调节性T细胞的生物学特性

目的研究大鼠肝移植后自发免疫耐受的形成与移植肝内CD4~ CD25~ 调节性T细胞(Tr细胞)的关系。方法按供、受者不同将实验分为3组。急性排斥组:DA大鼠为供者,LEW大鼠为受者;自发耐受组:LEW大鼠为供者,DA大鼠为受者;同基因组:供、受者均为DA大鼠。各组均建立大鼠原位肝移植模型。分别在肝移植术后4、7、14、30和90 d时采用密度梯度离心法分离移植肝内淋巴细胞,免疫磁珠分离(MACS)法分选出CD4~ CD25~ Tr细胞;用流式细胞术(FCM)检测细胞纯度,同时分析CD4~ CD25~ Tr细胞比例的变化;体外细胞增殖试验研究CD4~ CD25~ Tr细胞对CD4~ CD25~-T细胞的免疫抑制作用。结果肝移植早期,急性排斥组和自发耐受组移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例均明显增加,其中急性排斥组增加更为明显;移植后4 d左右,两组CD4~ CD25~ Tr细胞比例开始下降,急性排斥组的下降幅度较大;移植后30 d,自发耐受组受者的移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例达到第2次高峰,约在移植后90 d时下降至正常生理水平。移植后7 d左右,急性排斥组受者均因发生排斥反应而死亡,而自发耐受组受者均存活。此外,CD4~ CD25~ Tr细胞能有效抑制CD4~ CD25~-T细胞的增殖。结论CD4~ CD25~ Tr细胞是一种具有特异免疫调节功能的T细胞亚群,其主动的免疫抑制功能可能是诱导大鼠肝移植自发免疫耐受的机制之一。     

人类疱疹病毒6型刺激人脐带血单个核细胞产生α-干扰素的研究

用生物活性法检测人类疱疹病毒6型(HHV-6)GS株和CN8南京地方株感染的人脐带血单个核细胞培养上清中干扰素(IFN),结果表明感染后24h即可检出,48～72h达到峰值,以后逐渐下降。用IFN-α、β、γ的单抗分别处理感染细胞上清,仅IFN-α的单抗可以显著中和其干扰素活性。双向琼脂扩散试验与对流免疫电泳试验以及耐酸性(pH2.0,1h)、热稳定性(56℃,30min)试验都提示上清中的IFN为IFN-α。     

大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞的分离培养及其功能分析

目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。