《寄生虫检验学》课程教学改革的初步研究

《寄生虫检学》是医学检验专业的一门专业主干课．为更好地发挥教师和学生救与学的积授性．创造良好的教学效果．我们对“往的教学方式进行了改革．精心进行课堂教学设计．大力采用多媒体教学手段．理论教学与实验操作紧密结合．增加学生动手操作内容．对考试方式也进行改进。     

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白疟疾疫苗的研究进展

疟疾是一种危害严重的虫媒传染病，在疟原虫对抗疟药物的耐药性及媒介蚊对杀虫剂耐药性日益增强的今天，寻求一种新型，高效，安全的抗疟途径－抗疟疾疫苗的研制备受科研人员的关注。本对恶性疟原虫裂殖子表面蛋白抗疟疾疫苗的研究进展作一概述。     

恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白2真核表达重组质粒的构建

目的 构建恶性疟原虫海南分离株（FCC1／HN）裂殖子表面蛋白2（MSP2）融合HBsAg基因片断真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS及重组真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2，为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。方法 （1）采用PCR技术对恶性疟原虫FCC1／HN株MSP2原核表达质粒PET28α-MSP2的MSP2基因进行扩增，扩增产物经纯化后用Bam H I酶切；质粒pVXORF1-PvMSP1.19-HBS用相同的酶酶切，经纯化后用T4DNA连接酶将其与酶切后纯化的MSP2基因连接；（2）分别用BamHI Xho双酶切PET28α-MSP2质粒DNA和pVXORF1质粒DNA，纯化后2将目的基因片段用T4DNA连接酶连接；将（1），（2）连接产物分别转化大肠杆菌DH5α。于氨苄青霉素阳性LB培养平板上筛选阳性克隆，酶切电泳鉴定。结果 筛选出的重组子为编码FCC1／HN MSP2基因片段的重组质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS及pVXORF1-PfMSP2。结论 编码FCC1／HN MSP2基因片断真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS和pVXORF1-PfMSP2的构建为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定了基础。     

两种饲血方法对雷州半岛中华按蚊的实验室驯化研究

目的:将野外捕抓的按蚊移回实验室进行饲养繁殖。方法:在常规人工饲养方法的基础上,两种饲血方法进行比较。结果:在室温26±1℃.相对湿度80%的条件下,两种饲血方法均可在35cm×35cm×35cm笼内从人工交配繁殖逐步过渡到自然交配繁殖。结论:在相同实验条件下,饲以活鼠血及鸡素囊装以鲜抗凝兔血均可作为人工饲养繁殖按蚊的饲血方法,从人工交配过渡到自然交配建立按蚊实验品系。     

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2融合HBS基因重组质粒的免疫原性研究

目的　构建恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)裂殖子表面蛋白 2 (MSP2 )融合HBsAg基因片断真核重组表达质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS ,观察该DNA疫苗的免疫特性。方法　 (1)以恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)基因组为模板 ,扩增出pfMSP2 DNA片断 ,将该片段克隆入质粒pVXORF1-HBS中HBS的上游并与之紧密相连 ,构建质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS ;构建真核重组表达质粒 pVXORF1-PfMSP2 以作为对照。 (2 )用上述构建的质粒及空质粒 pVXORF1免疫KM小鼠 ,以ELISA检测血清IgG抗体。 结果　 (1)筛选出的重组子为编码FCC1/HNMSP2 基因片断的重组质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS及 pVXORF1-PfMSP2 。 (2 )裸DNA尾根多点注射KM小鼠 ,显示 pVXORF1-PfMSP2 -HBS组小鼠较pVXORF1-PfMSP2 组小鼠产生抗PfMSP2 蛋白的抗体效价明显增高 ,二者比较 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。结论　PfMSP2 融合HBsAg基因片段激发机体产生抗PfMSP2 抗体的能力显著增强 ,提示PfMSP2 融合HBsAg基因有可能作为高效抗红内期恶性疟原虫复合多价基因疫苗的有效组成部分     

恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白2真核表达重组质粒的构建

目的　构建恶性疟原虫海南分离株 ( FCC1/ HN)裂殖子表面蛋白 2 ( MSP2 )融合 HBs Ag基因片断真核表达质粒 p VX-ORF1- Pf MSP2 - HBS及重组真核表达质粒 p VXORF1- Pf MSP2 ,为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。　方法　 ( 1)采用 PCR技术对恶性疟原虫 FCC1/ HN株 MSP2 原核表达质粒 PET2 8α- MSP2 的 MSP2 基因进行扩增 ,扩增产物经纯化后用 Bam H 酶切 ;质粒 p VXORF1- Pv MSP1 .1 9- HBS用相同的酶酶切 ,经纯化后用 T4DNA连接酶将其与酶切后纯化的 MSP2 基因连接 ;( 2 )分别用Bam H +Xho 双酶切 PET2 8α- MSP2 质粒 DNA和 p VXORF1质粒 DNA,纯化后将目的基因片断用 T4DNA连接酶连接 ;将 ( 1)、( 2 )连接产物分别转化大肠杆菌 DH5α。于氨苄青霉素阳性 L B培养平板上筛选阳性克隆 ,酶切电泳鉴定。　结果　筛选出的重组子为编码 FCC1/ HN MSP2 基因片断的重组质粒 p VXORF1- Pf MSP2 - HBS及 p VXORF1- Pf MSP2 。　结论　编码 FCC1/ HN MSP2 基因片断真核表达质粒 p VXORF1- Pf MSP2 - HBS和 p VXORF1- Pf MSP2 的构建为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定了基础。     

恶性疟原虫重组质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS在小鼠骨骼肌的表达

目的 观察恶性疟原虫海南分离株(FCC1／HN)裂殖子表面蛋白2(MSP2)融合HBsAg基因片断真核表达质粒pVXORF1-PiMSP2-HBS在小鼠骨骼肌的表达。方法KM小鼠分3组，用0．5％盐酸布比卡因对3组小鼠行预处理后，在同一部位Ⅰ组注射浓度为1μg／μl的重组质粒pVXORF1-PiMSP2-HBS100μl，Ⅱ组注射浓度为1μg／μ的质粒pVXORFI1-HBS100μl，Ⅲ组为正常对照组，注射pH7．4PBS100μl。分别在免疫后4周和8周用免疫组织化学实验检测小鼠注射部位肌肉组织中重组蛋白MSP2的表达。结果小鼠经DNA疫苗注免疫4周和8周后肌肉组织呈特异性阳性反应。结论重组质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS免疫小鼠后，肌肉组织有重组蛋白MSP2的表达。     

医学寄生虫学与寄生虫检验学课程双语教学初探

医学寄生虫学与寄生虫检验学是医学检验本科专业的主干课程之一。为贯彻教育部《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》中各高校在3年内开设5％一10％双语课程的规定。学院做了深入研究及充分准备。对医学检验本科专业开展了以英语作为母语外的第一外语的双语教学实践活动。     

龙胆草与仙鹤草配伍对伯氏疟原虫的抗疟实验研究

目的探讨植物生药龙胆草和仙鹤草伍用对伯氏疟原虫的抑制作用。方法86只昆明种小鼠,每只小鼠腹腔接种2×107个伯氏疟原虫,随机分为6组。24h后,Ⅰ、Ⅵ组以生理盐水1ml/1次/d灌胃作为对照,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别以浓度为1g/ml的龙胆草、仙鹤草、龙胆草+仙鹤草提取液灌胃治疗,1ml/(d×7d),观察小鼠存活率和存活时间,感染后第3d自小鼠断尾采血,计算小鼠红细胞疟原虫感染率和药物对疟原虫的抑制率;Ⅴ组分3小组,用龙胆草+仙鹤草提取液按每小组不同浓度进行灌胃治疗,1ml/(d×3d),疗程结束后24h按上法计算不同浓度药物对鼠红细胞疟原虫的感染抑制率。结果龙胆草+仙鹤草组疟鼠累积生存率与感染对照组比较,差异有显著性(P<0.05);龙胆草与仙鹤草伍用,在0.5-1.5g/ml生药浓度范围内对疟原虫抑制率随药物浓度的增加而增强。结论龙胆草与仙鹤草伍用具有抑制伯氏疟原虫的生长,对小鼠的存活状况有改善作用。     

龙胆草与仙鹤草配伍的非特异免疫抗疟作用

目的探讨植物生药龙胆草与仙鹤草伍用的非特异免疫抗疟作用。方法通过腹腔巨噬细胞吞噬实验、单核-吞噬细胞系统(MSP)吞噬功能实验等实验方法检测不同用药组和感染对照组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分比、吞噬指数及MPS的吞噬指数。结果龙胆草加仙鹤草组疟鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能分别与仙鹤草组和感染对照组比较,差异均有显著性(P均<0.01);龙胆草加仙鹤草组对疟鼠MSP吞噬指数分别与仙鹤草组和感染对照组比较,差异均有显著性(P均<0.01)。结论龙胆草与仙鹤草配伍可以提高感染疟原虫小鼠的免疫功能,显著提高小鼠腹腔巨噬细胞及MPS的吞噬活力。