活体供肝肝移植成功的初步经验--附3例报告

目的 报告3例活体供肝肝移植成功的初步经验。方法 回顾性分析1例肝细胞癌伴肝硬化、1例先天性肝内胆汁淤积症及1例药物性肝炎病人活体供肝肝移植经过和供受体恢复情况。结果 供肝均取自病人父亲，1例为右半肝，另2例为扩大左外叶，供肝重量分别为835g、295g及320g。第1例供体术后有一过性黄疸，且有轻度胆漏，另2例供体术后恢复顺利，无手术并发症。3例病人手术均顺利，1例成人一成人活体供肝肝移植胆道重建为胆管端端吻合，术后定期行全身化疗预防肿瘤复发。2例成人-儿童活体供肝肝移植胆道重建为胆管、空肠Roux-en-Y吻合。3例病人均行肝静脉整形以保证静脉回流通畅。随访至今，供受体已分别健康生存16、14、13个月。结论 严格的病例选择，完善的术前准备，精细的手术操作及正确的术后处理是活体供肝肝移植成功的关键。     

肝移植术后胆道并发症及其处理(附150例次报道)

目的 对肝移植术后胆道并发症的病因、诊断、治疗进行探讨。方法 回顾分析2001年4月～2004年6月我科施行的150例次(共147例)肝移植患者的临床资料，对35例次胆道并发症患者进行病因分析，并结合文献讨论。结果 有12例次患者(34．2％)出现早期并发症，23例次患者(65．8％)出现迟发性并发症。其中吻合口狭窄13例次(37．1％)，由于排异、肝动脉血栓形成、巨细胞病毒(CMV)感染、化疗等原因造成肝内、外胆管多发狭窄和坏死分别为2、6、1、2例次(5．7％、17．1％、2．9％、5．7％)，吻合口胆漏7例次(20．0％)，拔除T管后发生胆漏3例次(8．7％)，由于Oddi’s括约肌失调致胆管炎、胆管结石1例次(2．9％)。结论 肝移植术后胆道并发症发生的病因机制仍有许多方面值得研究探讨，及时预防、诊断、处理胆道并发症将明显地提高肝移植患者的生活质量和生存期。     

精准医疗时代肝癌肝移植围手术期诊断与治疗策略

肝癌肝移植后肿瘤复发转移是影响疗效的重要因素之一。精准医疗时代利用多组学、高通量基因测序分析、大数据和人工智能等技术筛选能准确预测患者预后的生物标志物,全面评估肝移植后患者免疫状态、诱导免疫耐受,选择敏感药物对高复发风险的患者进行有效预防,重视复发转移的个体化治疗,将明显改善肝癌肝移植预后。笔者结合自身经验和查阅相关研...     

比较机器人外科手术系统与腹腔镜肝切除治疗肝细胞癌的初步结果

目的 通过与腹腔镜肝切除治疗肝细胞癌的结果进行比较,初步总结机器人外科手术系统辅助肝切除手术的技术特点、安全性及初步疗效.方法 2010年1～10月,应用机器人外科手术系统辅助肝切除手术(机器人组)治疗3例肝细胞癌患者,均伴不同程度肝硬化,肿瘤均为单发,分别位于Ⅲ段(2例)、Ⅵ段(1例),并与同期完成的腹腔镜肝切除治疗的15例肿瘤大小、位置相似的肝细胞癌患者(腹腔镜组)进行比较.结果 机器人组的中位肿瘤直径为3 mm(2.0～3.5 cm),腹腔镜组为4 cm(1.7～9.0 cm).机器人组的中位手术时间为120 min(90～180 min).腹腔镜组为150 min(100～220 min).机器人组的中位术中出血量为100 mL,腹腔镜组为75 mL,两组各有1例患者术中输血.腹腔镜组有1例患者中转开腹手术.机器人组术后中位住院时间为5 d(4～6 d),腹腔镜组为6 d(4～8 d).机器人组无手术并发症发生,腹腔镜组有1例因术后双侧胸腔积液而需引流.随访至今腹腔镜组有1例发生肝内复发.结论 初步结果显示,对周边型(如Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ段)肝细胞癌患者,机器人外科手术系统辅助肝切除手术的治疗效果与腹腔镜肝切除相似.     

大鼠小体积肝移植模型的建立及技术改进

目的:建立稳定的大鼠30%比例小体积肝移植模型。方法:采用SD大鼠,"二袖套法"行30%比例原位肝移植25例。经腹主动脉插管原位快速灌注获取供肝,冷缺血时间设定为1 h。结果:术后2 d存活率和1周存活率分别为72%(18/25)和64%(16/25)。结论:成功建立了大鼠30%比例的小体积肝移植模型,该模型手术成功率较高、便于操作,与临床部分肝移植(如活体肝移植)的手术十分相似,是研究肝移植缺血再灌注损伤的理想途径。     

血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除

目的 建立血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除方法并观察其去除效果.方法 应用Agilent公司去除人14种高丰度蛋白的多重亲和排除系统(Human 14 Multiple Affinity RemovalSystem),去除血清中自蛋白、IgG和抗胰蛋白酶等14种高丰度蛋白,并用SDS-PAGE评价去除的效果.结果 建立血清中高丰度蛋白的去除方法,可去除白蛋白等14种高丰度蛋白.SDS-PAGE图谱中去除高丰度蛋白后条带更清晰,部分低丰度蛋白得以显现.结论 成功建立血清中高丰度蛋白的去除方法,可为下游的蛋白质组学技术奠定基础.

Abstract：

Objective To establish the method for removing high-abundance proteins in serum proteomics research and evaluate the removal efficiency of the high-abundance proteins. Methods Human 14 Multiple Affinity Removal System of Agilent Technologies was applied to eliminate the high-abundance proteins in serum, such as albumin, IgG and α-l-antitrypsin, etc. The efficiency of removal was evaluated by 1-dimensional sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Results The method for removing serum high-abundance proteins was established. The protein lanes of SDS-PAGE map were clearer and some low-abundance proteins were visualized after depletion. Conclusion An effective method of removing high-abundance proteins in serum is established, which provids basis for further strategies in proteomics research.     

大鼠部分肝移植(PLT)的肝叶切除方法及体会

 目的 通过不同的肝叶切除方法,建立30%和60%比例的大鼠部分肝移植(partial liver transplantation,PLT)模型。方法 60% PLT组,在体切除(n=50)或者离体切除(n=50)肝左外叶、尾叶,保留中叶、右叶、右前叶;30% PLT组(n=50),在体切除肝左外叶、尾叶、右叶、右前叶,仅保留中叶。 结果 各实验组获取的部分供肝比例与临床部分肝移植相似,移植后存活率较高。结论 通过在体切除或者离体切除不同的肝叶组合,建立30%和60%比例大鼠PLT模型,能较好地模拟临床部分肝移植过程,为深入进行肝移植的基础研究提供了良好平台。     

肝癌患者肝移植术后肿瘤复发相关的血清蛋白质标记物筛选

目的 筛选与肝癌患者肝移植术后肿瘤复发相关的术前血清生物标记物,并建立肿瘤复发的预测模型.方法 76例受者被纳入本项研究,其中35例术后发生肿瘤复发和转移(复发组),其余41例均无瘤存活(无瘤存活组).移植前收集受者血清,采用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术获取受者的蛋白质指纹图谱,利用"生物标记物向导"软件对两组受者间的蛋白峰进行比较.随机选择60例受者(复发组30例,无瘤存活组30例)的血清蛋白指纹图谱作为建模组,通过"生物标记物模型"软件(BPS)建立预测模型.取另外16例(复发组5例,无瘤存活组11例)受者的血清蛋白指纹图谱作为验证组,采用盲法验证该模型的灵敏性和特异性.结果 复发组和无瘤存活组受者的临床资料及病理特征间仅术前肿瘤大小和血管侵犯程度的比较,差异有统计学意义(P＜0.05).建立血清蛋白质指纹图谱后,在质荷比(M/Z)2000～3000范围内,共检测出368个蛋白峰,两组间有显著差异的蛋白峰共有22个,其中9个在复发组中表达上调,13个表达下调.通过对原始图谱的初步判断及利用建模组受者上述22个有显著差异的蛋白质,建立决策树预测模型,该模型可以显著地将复发组和无瘤存活组受者区分开.将16例验证组受者的血清蛋白指纹图谱代入决策树预测模型,验证结果显示,5例复发组受者中肿瘤复发4例,无瘤存活1例;11例无瘤存活组受者中无瘤存活受者8例,肿瘤复发3例.该模型的灵敏性为80.0%(4/5),特异性为72.7%(8/11).结论 由SELDI-TOF-MS筛选出的血清差异蛋白质可作为肝癌患者肝移植术后肿瘤复发相关的生物标记物,决策树预测模型对肝癌患者接受肝移植的适应证、有无肝外微小转外灶及制定肝移植诊疗计划具有一定临床指导意义.     

与肝癌肝移植术后复发相关的肿瘤组织标记物筛选

 目的 在肝肿瘤细胞中筛选与肝癌肝移植术后复发相关的差异蛋白,为预测患者预后寻找更灵敏、特异的生物标记物。方法 19例符合“上海标准”的肝癌肝移植患者纳入本项研究,6例术后出现肿瘤复发和转移(复发组),其余13例患者均无瘤存活(无瘤生存组)。利用表面加强激光解吸电离 飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectroscopy,SELDI TOF MS)建立肝肿瘤细胞蛋白质指纹图谱,生物信息软件(Biomarker Wizard)比较两组之间的蛋白质差异。结果 利用弱阳离子交换(weak cation exchange,WCX2)蛋白质芯片在质核比(m/z)2 000～30 000范围内共检测出163个蛋白峰。在建立的蛋白指纹图谱中,复发和无瘤生存组相比较,6个蛋白差异有统计学意义 (P＜0.05)。复发组中上调蛋白4个,m/z分别为212 9、220 3、295 0和306 2;下调2个,m/z分别为370 8和118 56。 结论 由SELDI-TOF筛选出的肿瘤细胞差异蛋白对判断肝癌肝移植患者预后可能有重要意义,差异蛋白可能与微血管癌栓形成有关。     

肝移植术后间质性肺炎的诊治经验

总结诊治肝移植患者术后间质性肺炎的经验.方法 回顾分析2001年4月至2009年6月期间诊治的8例同种异体肝移植术后间质性肺炎病人的临床资料.结果 8例肝移植术后间质性肺炎患者的发病时间为术后17~117 d,平均84 d,其中7例发生于术后2~4个月.8例均有发热,其中抗巨细胞病毒(CMV)特异性抗体CMV-IgM阳性及CMV-DNA阳性4例,胸部CT均有明显间质性肺炎表现.经调整抗排斥药物用量、使用更昔洛韦及呼吸支持治疗后,4例患者临床症状明显好转,胸部CT恢复正常;4例患者病情进展,继发细菌或真菌感染,死于呼吸衰竭.结论 肝移植后间质性肺炎临床表现无特异性,病死率高,应及时予胸部CT检查,同时加强病原体的监测.确诊后予调整免疫抑制剂用量、早期抗病毒治疗及对症支持治疗,以提高治愈率.