mTOR通路抑制剂雷帕霉素对真菌性角膜炎小鼠角膜瘢痕化的影响

目的　探讨mTOR通路抑制剂雷帕霉素对真菌性角膜炎小鼠角膜瘢痕化的影响。方法　取96只SPF级C57BL/6J雄性小鼠,随机分为雷帕霉素组和对照组，每组各48只。两组小鼠同时建立真菌性角膜炎模型。雷帕霉素组模型制作前1 d按6.0 mg·kg^-1雷帕霉素对小鼠进行腹腔注射预处理，之后按0.2 g·L^-1浓度在结膜下注射5 μL，持续3 d；对照组注射PBS溶液。造模后对各组小鼠进行角膜临床评分，Western blot和实时荧光定量PCR分别检测造模后各组小鼠不同时间角膜LC-3Ⅱ、α-SMA和 TGF-β1表达情况。结果　造模后24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、336 h，对照组小鼠角膜临床评分均明显高于雷帕霉素组，差异均有统计学意义(均为P＜0.05) 。造模后144 h、216 h雷帕霉素组小鼠角膜LC-3Ⅱ表达上调，LC-3Ⅱ蛋白和mRNA相对表达量与对照组相比，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；而在造模后72 h及336 h两组LC-3Ⅱ蛋白和mRNA相对表达量差异均无统计学意义（均为P>0.05）。与对照组相比，造模后144 h、216 h雷帕霉素组小鼠角膜α-SMA蛋白及 mRNA相对表达量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；造模后144 h、336 h雷帕霉素组TGF-β1 mRNA相对表达量亦下降，与对照组相比，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　雷帕霉素通过促进自噬作用下调角膜瘢痕化相关因子的表达，减轻了真菌性角膜炎模型小鼠角膜瘢痕化程度。     

基质金属蛋白酶-8对角膜基质胶原的作用研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-8(MMP-8)对角膜的作用.方法 选取健康C57BL/6J小鼠15只,右眼角膜基质内注射10μL MMP-8作为实验组,左眼给予等量生理盐水作为对照组.于0、4、8h使用双光子显微镜二次谐波成像技术对活体小鼠角膜逐层扫描,Imaris软件对所得图像三维重建,计算图像信号强度.4、8h在裂隙灯下评价角膜混浊度.8h角膜取材,测定各角膜羟脯氨酸水平.结果 0h实验组及对照组小鼠角膜基质纤维信号强度分别为89.7±11.2、85.3±7.0,4h分别为14.5± 3.4、46.6±14.0,8h分别为11.0±4.6、34.6±12.5,4h及8h,实验组较对照组角膜基质信号强度明显降低(P<0.05);4h及8h,实验组较对照组角膜明显混浊(P<0.05);8 h测得实验组与对照组角膜羟脯氨酸水平分别为(0. 433±0.090)、(0. 590± 0. 133)μg/mg,实验组明显低于对照组(F=7. 193,P=0. 014).结论 MMP-8对小鼠角膜基质胶原有明显的降解破坏作用,导致角膜透明度下降.     

不同年龄段人血清中酸性肽的HPLC分析

目的:了解不同年龄人群血清中酸性肽的含量,以寻找神经退行性改变的早期预警的生物标志物。方法:采用内标法和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析法。结果:分析结果显示:1～10岁组(A组),20～30岁组(B组),40～59岁组(C组)和60～80岁组(D组)人群血清中酸性肽的含量分别为2.943±1.340、2.338±0.371、2.052±0.328、(2.778±0.499)mg/ml。A组与B组相比P=0.082,A组与C组相比P=0.012,A组与D组相比P=0.628。结论:20～30岁组和40～59岁组人群血清中酸性肽的含量比1～10岁组和60～80岁组人群血清中酸性肽的含量低,具有统计学意义。     

猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠血清磷水平与骨密度的影响

背景:有报道显示美国处于高风险的骨质疏松妇女中磷水平较高,这是否意味着降低血磷水平的物质将会为防治骨质疏松提供新的有效手段?目的:观察猪骨蛋白对骨质疏松大鼠骨密度和血清中钙及磷水平的影响.方法:以肌肉注射地塞米松建立Wistar大鼠骨质疏松模型.造模后以数字表法随机分为生理盐水组、接骨七哩片组、50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组,不作任何处置大鼠作为正常对照.治疗12周后,分离血清并用生物化学方法测定血清磷和血钙水平,同时收集大鼠胫骨制作成骨切片,以QDR-4000双能X射线吸收仪测定各组大鼠胫骨吸光度值;苏木精-伊红染色观察胫骨骨髓腔变化.结果与结论:各组之间血清钙浓度比较差异无显著性意义(P＞0.05).与生理盐水组比较,50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组大鼠血清磷浓度下降(P＜0.05).50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组、接骨七哩片组骨密度值高于生理盐水组(P＜0.05).正常对照组大鼠胫骨的骨髓腔是小的,生理盐水组大鼠胫骨的骨髓腔特别大,50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组、接骨七哩片组大鼠胫骨骨髓腔比生理盐水组大鼠胫骨骨髓腔小.结果提示猪骨蛋白不改变骨质疏松大鼠血清钙的水平,但它能降低骨质疏松大鼠血清磷的浓度,增加骨密度.不过,在该实验浓度范围内,没有显示剂量效应关系;猪骨蛋白也能缩小骨质疏松大鼠胫骨骨髓腔.     

猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠血清磷水平与骨密度的影响

背景: 有报道显示美国处于高风险的骨质疏松妇女中磷水平较高,这是否意味着降低血磷水平的物质将会为防治骨质疏松提供新的有效手段？ 目的：观察猪骨蛋白对骨质疏松大鼠骨密度和血清中钙及磷水平的影响。 方法：以肌肉注射地塞米松建立Wistar大鼠骨质疏松模型。造模后以数字表法随机分为生理盐水组、接骨七哩片组、50,100, 200 mg/kg猪骨蛋白组,不作任何处置大鼠作为正常对照。治疗12周后,分离血清并用生物化学方法测定血清磷和血钙水平,同时收集大鼠胫骨制作成骨切片,以QDR-4000双能X射线吸收仪测定各组大鼠胫骨吸光度值;苏木精-伊红染色观察胫骨骨髓腔变化。 结果与结论：各组之间血清钙浓度比较差异无显著性意义(P > 0.05)。与生理盐水组比较,50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组大鼠血清磷浓度下降(P < 0.05)。50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组、接骨七哩片组骨密度值高于生理盐水组(P < 0.05)。正常对照组大鼠胫骨的骨髓腔是小的,生理盐水组大鼠胫骨的骨髓腔特别大,50,100,200 mg/kg猪骨蛋白组、接骨七哩片组大鼠胫骨骨髓腔比生理盐水组大鼠胫骨骨髓腔小。结果提示猪骨蛋白不改变骨质疏松大鼠血清钙的水平,但它能降低骨质疏松大鼠血清磷的浓度,增加骨密度。不过,在该实验浓度范围内,没有显示剂量效应关系;猪骨蛋白也能缩小骨质疏松大鼠胫骨骨髓腔。     

猪骨蛋白对骨质疏松大鼠血中AKP和OST的影响

目的:探讨猪骨蛋白对骨质疏松大鼠血中碱性磷酸酶(AKP)和骨钙素(OST)水平的影响.方法:取3月龄Wistar大鼠60只,随机分成对照组(A组)、生理盐水组(B组)、阳性对照组(C组)、200 mg骨蛋白组(D组)、100 mg骨蛋白组(E组),50 mg骨蛋白组(F组).A组大鼠灌胃2.5 ml/d生理盐水,其它各...     

小鼠角膜γδT细胞去除效率的双光子活体动态监测

目的　比较抗体中和后角膜与耳部皮肤γδT细胞的去除效率，探寻一种能够活体动态监测角膜γδT细胞数量变化的替代方法。方法　应用双光子激光扫描显微镜对抗体中和前后小鼠耳部皮肤γδT细胞数量进行监测，同时于抗体中和后6 h、12 h、24 h对小鼠角膜进行取材染色，计数角膜中的γδT细胞，比较两者去除效率是否一致。结果　正常小鼠角膜的γδT细胞常分布于角膜缘上皮及浅基质层，上皮层的γδT细胞形态不规则，常伴有突起，基质层γδT细胞多呈圆形或椭圆形，细胞数量为（27±4）个。抗体中和后，小鼠角膜γδT细胞数量逐渐减少，6 h、12 h和24 h细胞数量均明显少于去除前（P=0.03、0.00、0.00），去除效率分别为48%、78%、96%。正常小鼠耳部皮肤γδT细胞呈树突状，均匀分布于皮肤表皮层，细胞数量为（60±9）个，抗体中和后6 h、12 h和24 h，耳部皮肤γδT细胞数量与去除前相比亦明显减少（P=0.00、0.00、0.00），去除效率分别为43%、72%、95%。结论　抗体中和后角膜与耳部皮肤γδT细胞数量均逐渐下降，两者去除效率随时间变化一致，监测小鼠耳部皮肤γδT细胞是动态监测角膜γδT细胞数量变化的理想替代方法。     

酸性肽对血管性痴呆小鼠学习记忆力和脑组织APP、BACE和tau蛋白表达的影响

目的:观察酸性肽对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE)及tau蛋白表达的影响.方法:60只健康昆明种小鼠,随机分成6组,每组10只.除对照组外,其余5组小鼠给予高脂食物灌胃、颈动脉局部缺血及再灌注手术,建立VD小鼠模型.随后分别灌胃生理盐水(模型组)、0.3 g/kg脑...