儿童臀部硬纤维瘤手术治疗37年回顾(附31例报告)

目的探讨儿童臀部硬纤维瘤的临床特点和治疗方法。方法回顾性分析本院自1977年1月至2014年8月收治的31例臀部硬纤维瘤患儿临床资料,患儿均进行手术边缘性切除,术后病理检查均证实为硬纤维瘤。结果 31例中,术后获随访28例,随访时间2个月至37年,平均随访时间12年3个月。12例术后原位复发,复发率为42.9%。复发时间为术后3个月至3年,多在术后2年内复发。结论硬纤维瘤是一种极端混合性质的肿瘤,其生物学行为多变,复发率高,目前主要采取以广泛手术切除肿瘤为主的多学科联合和个体化治疗。     

异种移植排斥反应及其对策研究进展

同种异体组织和器官移植的供体来源有限,使异种移植再度成为研究热点.然而异种移植将面临比同种异体移植复杂得多的排斥反应.本文就异种移植排斥反应及其对策的研究近况作一综述.     

靶向慢病毒载体RNA干扰小鼠血管内皮细胞异种抗原的研究

目的 使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)方法抑制小鼠血管内皮细胞异种抗原半乳糖α1,3-半乳糖(Galα1,3-Gal)的表达.方法 经体外设计合成针对α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)mRNA的序列特异性小发夹RNA(shRNA),并构建携带α1,3-GT shRNA的重组慢病毒载体,以慢病毒感染小鼠血管瘤内皮细胞系EOMA细胞.采用荧光实时定量聚合酶链反应检测转染后的EOMA细胞α1,3-GT mRNA表达水平的变化;免疫荧光法和流式细胞术检测转染后的EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal表达水平的变化.并将转染后的EOMA细胞与人血清混合培养,用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞存活率.结果 成功获得携带α1,3-GT shRNA的成熟重组慢病毒颗粒,转染EOMA细胞效率可达75%.与空白对照组、空转染组以及阴性siRNA对照组比较,重组慢病毒转染EOMA细胞后,能有效抑制α1,3-GT的表达,抑制率为88%(P＜0.05);Galα1,3-Gal抗原表达水平明显降低(P＜0.05);而空白对照组、空转染组和阴性siRNA对照组间的差异无统计学意义(P＞0.05).重组慢病毒转染后的EOMA细胞与人血清混合培养后的存活率较各对照组明显提高(P＜0.05).结论 成功构建靶向α1,3-GT基因的重组慢病毒载体,通过RNAi沉默α1,3-GT基因,抑制EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal的表达,在体外实验中可减轻异种超急性排斥反应.     

经脐单一切口腹腔镜手术治疗小儿胆总管囊肿的疗效及对炎性因子的影响

目的探讨小儿胆总管囊肿采用经脐单一切口腹腔镜手术治疗的疗效及手术前后炎性因子水平的变化。方法 41例胆总管囊肿患儿,17例行传统四孔腹腔镜囊肿切除及Roux-en-Y肝管空肠吻合术者为对照组,24例行经脐单一切口腹腔镜囊肿切除及Roux-en-Y肝管空肠吻合术者为观察组。记录2组切口长度、手术时间、术中出血量等;分别于术前及术后7 d检测2组肝功能、炎性因子;比较2组术后7 d并发症发生情况。结果观察组切口长度[(2.01±0.45)cm]较对照组[(6.34±1.57)cm]短,手术时间[(3.46±0.67)h]较对照组[(2.78±0.71)h]长(P0.05),术中出血量、留置引流管时间、术后进食时间、住院时间与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05);观察组、对照组术后7 d谷丙转氨酶[(36.94±7.38)、(38.76±7.44)u/L]、谷草转氨酶[(33.71±8.04)、(32.91±7.97)u/L]、γ-谷氨酰转肽酶[(41.93±10.07)、(39.48±9.64)u/L]、总胆红素[(14.36±5.17)、(15.11±5.26)μmol/L]、直接胆红素[(6.37±1.34)、(6.21±2.05)μmol/L]水平均低于术前[观察组:(147.36±23.17)u/L、(151.47±24.38)u/L、(243.92±55.89)u/L、(87.39±12.17)μmol/L、(55.91±11.37)μmol/L;对照组:(145.18±22.94)u/L、(150.77±22.76)u/L、(239.86±56.16)u/L、(88.06±11.91)μmol/L、(55.43±10.67)μmol/L](P0.05),2组术前、术后组间比较差异无统计学意义(P0.05);观察组、对照组术后7 d高敏C反应蛋白[(5.19±1.38)、(4.97±1.44)mg/L]、白细胞介素-6[(50.39±9.66)、(49.81±9.53)ng/L]、白细胞介素-8[(12.34±4.06)、(13.01±3.84)ng/L]均低于术前[观察组:(12.19±3.67)mg/L、(68.37±10.55)ng/L、(20.02±4.39)ng/L;对照组:(12.26±3.58)mg/L、(69.18±10.67)ng/L、(19.86±4.41)ng/L](P0.05),2组术前、术后组间比较差异无统计学意义(P0.05);术后7 d,2组均未发生胆漏、胆管炎、切口疝、吻合口狭窄等并发症。结论经脐单一切口腹腔镜手术治疗小儿胆总管囊肿切口小,安全性高,且不增强炎性反应,对肝功能的改善与传统四孔腹腔镜法相近。     

新生儿阑尾炎12例诊治分析

目的探讨新生儿阑尾炎的临床特点、诊断和治疗方法。方法回顾性分析我科2013年5月至2019年12月收治的12例新生儿阑尾炎患儿的临床资料。结果男7例,女5例,手术治疗11例(手术及病理均证实为阑尾炎),保守治疗1例。手术治疗患儿中,10例行阑尾切除术,1例行阑尾切除+回肠造瘘术;12例患儿中10例治愈出院,死亡2例。结论新生儿阑尾炎临床表现多无特异性,早期诊断难度较大,腹部超声检查可帮助诊断,积极手术和细致的围手术期治疗是提高治愈率的关键。     

小鼠α1,3-半乳糖基转移酶RNA干扰重组慢病毒的构建与鉴定

背景:研究表明,通过抑制α1,3-半乳糖基转移酶的生成而减少甚至避免供体Gala(1,3)Gal的生成,是渡过器官移植后超急性排斥反应的一条切实可行的方法.目的:构建小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的RNA干扰慢病毒载体,有效沉默小鼠血管内皮细胞的α1,3-半乳糖基转移酶基因表达,以期为有效控制异种移植超急性排斥反应提供稳定的转染细胞载体.设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-07/2007-05在天津医科大学总医院普外研究所完成.材料:慢病毒载体系统(四质粒)购自Tronolab公司,包装细胞293T细胞株购自中科院上海细胞所.方法:在线软件设计小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因发卡小分子干扰RNA片段.合成的双链DNA片段并将其连接到Tele-sh003/U6.2载体的黏性末端,产生重组质粒Tele-sh003/U6.2-shRNN/α1,3-半乳糖基转移酶.对干扰质粒做测序分析.用磷酸钙法将得到的阳性重组子与慢病毒包装质粒共转化293T细胞,72 h后收集含病毒上清液,超速离心后得到重组慢病毒.用实时定量聚合酶链反应测定病毒滴度.主要观察指标:干扰质粒的测序分析,慢病毒颗粒的包装和滴度测定.结果:小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因小发卡RNA片段被成功克隆进Tele-sh003质粒中,测序结果显示干扰质粒小干扰RNA编码序列与设计片段的序列完全一致.所得慢病毒亦为阳性克隆,经定量聚合酶链反应测定病毒滴度为2×108 Tu/mL.结论:成功构建出小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的小发卡RNA慢病毒RNA干扰表达载体,为进一步控制异种移植超急性排斥反应提供了稳定的转染细胞的载体.     

异种移植超急性与急性排斥反应及其对策研究进展

器官移植作为治疗终末期器官衰竭患者的一种比较有效的方法,在临床上得到了越来越广泛的应用,然而这也使人类器官供体相对缺乏的状况越来越严重,激起人们对异种移植的强烈兴趣。考虑到器官的功能特点、形状和大小,基因调控和控制病毒传播的难易程度等因素,使得猪成为理想异种移植供体之一。     

3D腹腔镜技术治疗婴幼儿先天性巨结肠的可行性研究

目的探讨3D腹腔镜技术在婴幼儿先天性巨结肠治疗中的可行性。方法选取2015年7月-2017年3月郑州大学第三附属医院住院期间经造影及直肠黏膜活检诊断为先天性巨结肠的患儿13例,采用3D腹腔镜技术进行治疗。结果 13例手术均获得成功,无中转开腹手术。术后腹胀消失,无排便困难、无吻合口瘘,术后2周常规扩肛。随访6~24个月复查无腹胀、大便失禁和肛门狭窄等并发症发生。结论 3D腹腔镜技术具有高清、三维立体的优点,运用治疗婴幼儿先天性巨结肠是安全可行的。     

慢病毒载体介导RNA干扰质粒转染小鼠血管瘤内皮细胞的条件优化

目的 优化在慢病毒介导下将含有针对小鼠α1,3GT的RNA干扰质粒导入小鼠血管瘤内皮细胞(EOMA)时的转染条件.方法 按是否加入促转染剂Polybrene(8μg/ml),感染复数(MOI)分别为1、5、10、15和20,感染时间分别为4、6、12和24 h,将EOMA细胞分为40个纽,分别加入相应的慢病毒转染混合液,于转染后140 h在荧光显微镜下计数阳性细胞率,台盼蓝染色法检测各转染条件下的EOMA细胞活性.结果 不同病毒感染复数、不同感染时间及有、无促转染剂Polybrene的各组间病毒对EOMA细胞的转染效率差异有统计学意义,其中当加入Polybrene(8 μg/ml),MOI=5,感染时间为6 h时,转染效率达到最高(83%),细胞活性良好,存活率为96%,此后再增加MOI值和感染时间,转染效率未继续增加,而对细胞的毒性作用明显增强.结论加入Polybrene(8 μg/ml),MOI=5,感染时间为6 h时可以实现慢病毒载体对EO-MA细胞的高效转染并保持较高的细胞活性.