走马胎生物转化产物S1的抗肿瘤活性及对Bel-7402肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究走马胎中的生物转化产物S1对不同肿瘤细胞株增殖的影响,并检测S1对肝癌细胞Bel-7402凋亡及周期的影响。方法:利用燕麦曲霉对走马胎中的化合物Ag3进行生物转化,得到新的化合物S1。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT比色法)检测S1的抗肿瘤活性;筛选对S1较敏感的细胞株,观察细胞形态学变化、检测细胞凋亡和细胞周期。结果:S1作用于Bel-7402、MCF-7、A549等6株肿瘤细胞后的半数抑制浓度(IC50)范围为12.8~27.3μmol/L,其中Bel-7402细胞株对S1最为敏感。含S1培养基(终浓度为0、5、10、20μmol/L)干预Bel-7402细胞24h后,早期凋亡较明显,凋亡率分别为0.91%、3.13%、43.26%、71.34%,中、高剂量组凋亡最为明显,凋亡率具有明显的浓度依赖性,各剂量组与阴性对照组比较均有显著差异;S1将细胞阻滞于G2/M期,该期细胞明显增多,S期细胞明显减少,通过抑制细胞增殖达到抗肿瘤活性。结论:S1对6种肿瘤细胞株均有一定的抑制作用,对Bel-7402细胞的抑制作用较强,诱导Bel-7402细胞的凋亡机制可能与阻滞细胞周期相关。     

走马胎中三萜皂苷成分H1对6株肿瘤细胞增殖及对A549肺癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究紫金牛科紫金牛属植物走马胎Ardisia gigantifolia中的三萜皂苷成分H1对不同肿瘤细胞株增殖的影响,并检测H1对A549肺癌细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:以细胞密度为3×107/L细胞悬液每孔90μL接种于96孔板中,培养24 h后,各组分别加入不同浓度(终浓度分别为0,1.25,2.5,5,10,20μmol·L-1)的H1药液分别作用于MCF-7,HepG2,HeLa,A549,Bel-7402,BGC-823肿瘤细胞株24,48,72 h,并设阴性对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT比色法)检测H1对肿瘤细胞株增殖的影响,筛选对H1敏感的细胞株,用荧光倒置生物显微镜观察细胞形态学变化、采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:H1作用于MCF-7,HepG2,HeLa等6株肿瘤细胞24,48,72 h后的IC50为4.26~6.45μmol·L-1,其中A549细胞株对H1最为敏感。终浓度为0,1.25,2.5,5μmol·L-1的H1干预A549细胞24 h后,中、高剂量组的细胞凋亡形态明显,发生早期凋亡;总凋亡率分别为2.2%,7.0%,14.2%,56.4%,各剂量组与正常组比较均有统计学意义;细胞阻滞发生在G2期,使S期急剧增加。结论:H1对6种肿瘤细胞株有一定程度的抑制作用,对A549细胞增殖的抑制作用较显著,其诱导A549细胞的凋亡机制可能与对细胞周期阻滞有关。     

甲泼尼龙联合氯雷他定治疗过敏性紫癜的临床疗效

目的:探讨甲泼尼龙联合氯雷他定治疗过敏性紫癜的临床疗效及安全性.方法:选取80例过敏性紫癜患者,随机分为常规治疗组与联合治疗组,每组各40例.常规治疗组采用常规药物治疗,联合治疗组在常规治疗组基础上加用甲泼尼龙联合氯雷他定进行治疗,对比2组治疗结果及安全性并进行分析.结果:联合治疗组总有效率为95.0％,常规治疗组总有效率为70.0％,差异有显著性统计学意义(P＜0.01);联合治疗组患者不适症状消失时间及化验指标明显好转时间均显著短于常规治疗组,差异有统计学意义(P＜0.01).2组患者不良反应发生率及复发率无明显差异(P＞0.05).结论:甲泼尼龙联合氯雷他定治疗过敏性紫癜效果显著.     

HPLC-ELSD同时测定走马胎中3种三萜皂苷含量

目的建立同时测定走马胎中3种三萜皂苷类成分的RP-HPLC-ELSD方法。方法选用HPLC Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇55%CH3OH⁹0%CH3OH梯度洗脱40 min,流速0.8 mL·min-1。Althche 2000ES ELSD检测器,漂移管温度:100。C,空气流速2.8 L·min-1。结果结果表明3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(a),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-6-O-乙酰基吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(b),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)--D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-16-羟基-13,28-环氧-齐墩果烷(c)的检测分别在3.00090%CH3OH梯度洗脱40 min,流速0.8 mL·min-1。Althche 2000ES ELSD检测器,漂移管温度:100。C,空气流速2.8 L·min-1。结果结果表明3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(a),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-6-O-乙酰基吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(b),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)--D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-16-羟基-13,28-环氧-齐墩果烷(c)的检测分别在3.000⁹.000μg,8.6859.000μg,8.685³7.635μg,3.30037.635μg,3.300¹0.450μg线性关系良好。药材中三种成分的平均回收率(n=9)为99.64%(RSD 0.78%),99.93%(RSD 0.65%),100.07%(RSD 1.37%)。结论该方法操做简单、结果准确具有较好的重复性和稳定性,为走马胎药材质量控制提供了一个很好的依据。