HCMV感染诱导血管平滑肌细胞同源盒基因表达改变及TLX2基因的克隆与原核表达

目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人血管平滑肌细胞同源盒基因(homeobox gene,HOX)表达的影响,并克隆受HCMV诱导表达的同源框基因,为其功能研究奠定基础。方法以1MOI的HCMV感染人血管平滑肌细胞,分别于感染后24h,48h及72h用基因表达谱芯片检测血管平滑肌细胞基因表达水平的改变,筛选差异表达的同源框基因并进行全长cDNA的克隆和原核表达。结果人血管平滑肌细胞感染HCMV后24、48、72h有9个HOX基因的表达发生变化。其中上调基因3个(HHEX、ZEB2、HOXD8),下调基因6个(EMX2OS、SIX5、PKNOX1、IRX3、MEIS1、ESX1)。在HCMV感染后48、72h,TLX2基因表达上调。成功构建pGEX-4T-1/TLX2重组原核表达质粒,转化BL21后经IPTG诱导表达58×103的重组蛋白,该蛋白能被相应抗体识别。结论 HCMV感染可诱导人血管平滑肌细胞多个HOX基因表达的改变,构建的pGEX-4T-1/TLX2重组质粒获得体外表达,为进一步研究TLX2的功能及HCMV致血管平滑肌增生性疾病的分子机制奠定了基础。     

血管活性肠肽和表皮生长因子对支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞黏附功能的影响

目的：观察肺内调节肽对嗜酸性粒细胞（EOS）与支气管上皮细胞（BEC）黏附功能的影响。方法：选择血管活性肠肽（VIP）和表皮生长因子（EGF）两种调节肽作为研究对象，观察它们对BEC白细胞介素（ILs）分泌及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。结果：VIP、EGF可使O3应激的BEC分泌ILs能力下降，并下调气道上皮ICAM-1的表达。结论：VIP、EGF抑制BEC与EOS的黏附。对气道炎症起负性调节作用，有利于减轻局部的损伤。     

医学微生物学中的教与学探讨

医学微生物学是连接基础医学与临床医学的一门实践性很强的桥梁学科,具有内容覆盖面广和跨度大等特点,学生学习被动,效果不佳。为提高医学微生物学教学质量,使用有效的教学方法,让学生运用科学的方法学习,充分调动了学生的积极性。灵活运用多种教与学的方法,提高了教学质量,培养了学生的综合素质。     

HIV-1 Ta填核表达载体的构建及在Huh-7细胞中表达

目的构建1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)反式激活因子(Tat)基因真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞中的有效表达。方法以含有HIV-1全长基因的质粒pNL4-3为模板,通过PCR扩增HIV-1tat第一外显子,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入真核表达质粒pCDNA3.1( ),构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入人体肝癌细胞系Huh-7细胞。RT-PCR检测其基因转录情况,Westernblot鉴定其是否能够表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了Tat基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,RT-PCR和Westernblot方法证实该质粒能在Huh-7真核细胞中有效表达HIV-1Tat目的蛋白质。结论成功构建了HIV-1Tat基因的真核表达质粒载体,并在Huh-7细胞中表达,为在Huh-7细胞模型中研究Tat的功能奠定了基础。     

神经肽与气道微环境调控

气道神经肽 (airwayneuropeptides ,ANP)是由支配气道的神经纤维、气道上皮神经内分泌细胞 (pulmonaryneu roendocrine,PNE)及气道内其它细胞合成 ,内外环境的改变可刺激ANP的释放。ANP与气道中的免疫反应物质形成网络调控 ,参与气道炎症损伤反应、气道损伤修复与重塑、气道防御与细胞保护等多种生理过程。     

从课程学习中培养病原生物学研究生的创新能力

课程学习对研究生创新能力培养具有重要意义,尝试从课程学习入手,通过优化课程知识结构,科学安排教学内容,更新教学方法等手段,提升病原生物学研究生的科研思维和创新能力.     

臭氧应激促进炎症细胞与气道上皮细胞的黏附

目的 :为了探讨支气管上皮细胞 (brochialepithlialcells,BECs)炎症过程中一些具有保护作用的调节因子的调节效应 ,建立有效的细胞研究模型。方法 :用臭氧 (O3)应激建立细胞损伤模型 ,观察O3应激引起的BECs与中性粒细胞 (polymorphonuclearleukocyte ,PMNs)、嗜酸性粒细胞 (eosinophil,EOS)黏附的影响 ,及在炎症损伤中的作用 ;同时观察ICAM 1抗体对黏附的阻断及ICAM 1蛋白的表达。结果 :O3应激可增加BECs与PMNs、EOS的黏附率 ,产生应激反应 ;抗细胞间黏附分子 1(intercellularadhesionmolecule ,ICAM 1)抗体能阻断BECs与PMNs ,EOS的黏附 ;O3应激使ICAM 1蛋白表达增加。结论 :O3应激引起气道炎症 ,且介导BECs与PMNs,EOS黏附的黏附分子是ICAM 1。     

臭氧应激促进炎症细胞与气道上皮细胞的黏附

目的：为了探讨支气管上皮细胞（brochial epithlial cells,BECs)炎症过程中一些具有保护作用的调节因子的调节效应，建立有效的细胞研究模型。方法：用臭氧（O3）应激建立细胞损伤模型，观察O3应激引起的BECs与中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte,PMNs)、嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS)黏附的影响，及在炎症损伤中的作用；同时观察ICAM－1抗体对黏附的阻断及ICAM－1蛋白的表达。结果：O3应激可增加BECs与PMNs、EOS的黏附率，产生应激反应；抗细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)抗体能阻断BECs与PMNs,EOS的黏附；O3应激使ICAM－1蛋白表达增加。结论：O3应激引起气道炎症，且介导BECs与PMNs,EOS黏附的黏附分子是ICAM－1。     

医学微生物学双语教学的思考与探索

双语教学是我国高等院校教育改革的一项重要内容,为适应我国社会高速发展对人才的更高要求,提高学生自身专业外语水平,本文阐述了医学院校开展医学微生物学双语教学的重要性和必要性,总结了双语教学的英文教材,教学课件与授课方法,初步探讨了医学微生物学双语教学模式,从而使医学院校学生达到既学习本专业基础知识又提高英语水平的目的.