HLA-G与NK细胞

自然杀伤细胞(natural killer,NK)是天然免疫系统的主要效应细胞,是机体抵抗肿瘤和病毒感染的第一道防线。人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,是机体内一个重要的免疫耐受分子。HLA-G抗原对NK细胞的免疫调节功能一方面是依赖于一系列杀伤细胞免疫球蛋白样受体,另一方面是通过调节NK细胞多种趋化因子受体表达。本文就HLA-G对NK细胞调节功能的研究进展作一综述。     

浙江省台州地区６０１４例女性宫颈人乳头瘤病毒感染情况及流行病学分析

摘要：目的　了解浙江台州地区女性宫颈人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染率以及基因亚型的分布特征。方法　
采用液相芯片技术对浙江省台州医院妇科门诊就诊患者的宫颈脱落细胞共６０１４例进行ＨＰＶ 基因分型检
测,并对该地区女性ＨＰＶ 感染率、基因亚型分布等进行分析。采用ＳＰＳＳ１６．０软件对所得资料进行统计,
组间率的比较用χ
２ 检验,犘＜０．０５ 为差异有统计学意义。结果　浙江台州地区女性ＨＰＶ 总感染率为
２２．１５％（１３３２／６０１４）,单一型感染率为１６．５３％ （９９４／６０１４）,多重感染率为５．６２％ （３３８／６０１４）。ＨＰＶ
阳性患者中高危型ＨＰＶ 感染次数占８６．０１％ （１５３７／１７８７）,感染率从高到低依次为ＨＰＶ５２ （１７．８０％）、
ＨＰＶ１６ （１１．８６％）、ＨＰＶ５８ （１０．２４％）、ＨＰＶ５６ （５．７４％） 和ＨＰＶ１８ （５．５４％）。５１～６０ 岁组感染率
（２９．５８％）与总感染率（２２．１５％）比较差异有统计学意义（犘＜０．０５）,且不同年龄组女性宫颈ＨＰＶ 感染
各亚型分布情况差异有统计学意义。结论　浙江省台州地区女性ＨＰＶ 感染率较高,且以高危型ＨＰＶ５２、
１６、５８感染为主,要重视老年妇女的高危型ＨＰＶ 感染。
关键词：人乳头瘤病毒;基因分型;宫颈;流行病学
中图分类号：Ｒ３７３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０４ ０３０９ ０５     

唐氏综合征筛查在高龄孕妇产前诊断中的应用价值

目的探讨唐氏综合征（DS）筛查在高龄孕妇产前诊断中的意义。方法选择台州医院在2006年1月到2011年12月进行产前筛查的高龄孕妇。DS筛查采用时间分辨免疫荧光分析法检测孕中期孕妇血清标志物甲胎蛋白（AFP）和人绒毛膜促性腺激素（游离t3-hCG）,通过Multicalc和Risks2T风险评估软件进行风险评估。高龄孕妇行羊膜腔染色体检查,并追踪妊娠结局。数据处理采用SPSS13．0统计软件,率的比较采用Y。检验,P〈0．05为差异有统计学意义。结果本研究的4187例高龄孕妇中21-三体发生率0．76％（32／4187）、18-三体发生率0．31％（13／4187）和13三体发生率0．02％（1／4187）。高龄孕妇中行DS筛查1076例,其中高风险孕妇648例,21三体发生率1．76％（11／626）和18-三体发生率15．15％（5／33）;低风险孕妇428例,检出其他染色体异常5例。两组数据比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论高龄孕妇行无创性产前筛查联合羊膜腔染色体诊断技术,其诊断效率明显高于未行产前筛查者,尤其是对于提高18-三体检出率具有重要临床意义。     

膜结合型HLA-G1～G4分子的克隆表达及对NK细胞杀伤功能的影响

目的 探讨膜结合型HLA-G1～G4异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响.方法 通过基因克隆及转染,分别建立稳定表达HLA-G1～G4抗原的人绒癌JAR细胞株.采用RTPCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达.通过加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽,观察对HLA-G表达的影响.LDH释放法检测HLA-G1～G4表达对NK细胞杀伤活性的影响.结果 RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学结果显示,HLA-G1～G4/pVITRO2-mcs重组质粒成功转染HLA-G表达阴性的人绒癌JAR细胞株.FACS分析显示HLA-G1抗原能在JAR-HLA-G1细胞株表面表达,HLA-G2～G4抗原不能有效到达细胞表面.体外杀伤试验发现表达HLA-G1～G4抗原的细胞均能抑制NK细胞的杀伤活性(P＜0.05);加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽对HLA-G表达无明显影响,对NK细胞杀伤抑制程度也未见明显改变.结论 HLA-G1～G4能够明显抑制NK细胞的杀伤活性,提示不同膜结合型HLA-G异构体分子均能作为免疫耐受分子,具备免疫调节功能.     

HLA-G与血液肿瘤免疫应答及目前治疗研究进展

人类白细胞抗原-G （human leukocyte antigen G,HLA-G）是一种非经典HLA-I类分子,最早发现于母胎界面绒毛外滋养层细胞表面,抑制母体免疫系统对胚胎同种异体抗原的免疫杀伤,形成母胎免疫耐受。研究表明HLA-G通过与其受体结合,直接或间接参与肿瘤的发生及免疫逃避,且HLA-G高表达与实体瘤的分期、预后等高度相关。但HLA-G在血液肿瘤中的作用机制及临床意义,尚存争议,这可能与实体瘤细胞不同,大部分血液肿瘤细胞本身就是免疫细胞,肿瘤细胞属性不同导致HLA-G具有不同的生物学意义。本文就HLA-G在血液肿瘤中最新研究进展做一综述。     

46,XY女性性逆转患者的NR5A1基因突变分析

目的 分析XY女性性逆转患者核受体亚家族5,组A,成员1(nuclear receptor subfamily 5 group A member 1,NR5A1)基因的基因突变情况.方法 抽提样本外周血白细胞的DNA,对NR5A1的2～7外显子进行PCR扩增,扩增产物直接测序,重复实验和克隆测序实验验证检测到的突变,酶切分析筛查110名正常人群排除突变的多态性.结果 在5例样本中未检出明显异常的突变,只在样本4中检出1个多态突变(p.G146A),该突变在正常对照人群中检出了37.3％的突变率.结论 尽管在本研究中只检出1个基因多态突变,但结合国外报道,NR5A1的基因突变和性逆转的发生还是存在相关性.     

应用DHPLC进行线粒体异质性突变分析

目的:检测人类线粒体DNA异质性从而建立有效的筛查低水平异质性DNA的方法.方法:选择包含Ⅱ型糖尿病高突变位点的人mtDNA 3083～3339 nt片段进行PCR扩增,以不同比例混合相差一个碱基的两种DNA片段的PCR扩增产物,建立不同比例异质性DNA模型.确定最佳检测条件后分别用变性高效液相色谱技术(DHPLC)和DNA测序技术进行分析和比较.结果:应用DHPLC检测mtDNA 3083～3339 nt(257 bp),最低可检测出该区域含量为5%的异质性样本,而DNA测序技术只能检测出异质性含量大于20%的样本.结论:成功建立分析mtDNA 3083～3339 nt片段异质性突变的方法,该方法可用于检测低水平的mtDNA异质性.     

急性白血病PTEN mRNA表达和Akt磷酸化水平的相关性研究

目的了解急性白血病（AL）PTENmRNA表达和Akt磷酸化（p-Akt）水平的关系，以期探讨急性白血病发生发展的机制。方法采用逆转录（1it）-PCR法检测白血病细胞系K562、Jurkat、HL-60及21名健康对照者和68例AL患者PTENmRNA表达情况。同时用流式细胞术检测K562、Jurkat、HL-60细胞和AL患者p-Akt水平。结果（1）21名健康对照者PTENmRNA阳性18名，占85．70％。K562细胞PTENmRNA阳性，Jurkat、HL-60细胞阴性。68例AL中PTENmRNA阳性18例，占26．47％，与健康对照者比较差异有统计学意义（Х^2=23．38，P〈0．01）；31例AL缓解患者PTENmRNA阳性21例，与AL初诊组比较差异有统计学意义（Х^2=15．19，P均〈0．01）。AL各亚型PTEN阳性率比较差异无统计学意义。（2）21名健康对照者p-Akt中位数1．57％。K562、Jurkat细胞p-Akt高表达，HL-60细胞低表达。68例AL患者p-Akt中位数25．47％，与健康对照者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）AL患者FYENmRNA表达缺失率与p-Akt阳性率呈显著正相关（Х^2=0．73，P〈0．01）。结论AL患者PTENmRNA表达缺失是导致p-Akt高表达的关键因素之一，可能和急性白血病的发生发展有关。     

HLA-G与卵巢癌研究进展

人类白细胞抗原-G（human leukocyte antigen G,HLA-G）是机体重要的免疫耐受分子,在肿瘤发生、发展过程中具有重要意义。HLA-G通过多种途径发挥免疫抑制功能,以协助卵巢癌细胞实现免疫逃逸,促进恶性肿瘤细胞侵袭、转移,有望成为肿瘤标志物应用于临床诊断及免疫靶向治疗。HLA-G分子的表达调控受多种因素影响,本文就HLA-G在卵巢癌中的生物学功能和临床意义,以及HLA-G促进卵巢癌发生、发展的机制做如下综述。     

HLA-G表达调控机制的最新研究进展

人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen G,HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,低多态性及限制性分布于免疫豁免组织是其最大特征。HLA-G能够直接抑制多种免疫活性细胞的生物学功能,包括抑制NK细胞的杀伤活性,抑制CTL介导的细胞溶解及抑制树突状细胞成熟等;诱导产生抑制性T细胞(suppressor T cells)和致耐受树突状细胞(tolero-