自由基在大骨节病病理过程中的作用 Ⅲ.自由基及黄腐酸对软骨细胞的损伤

本文利用软骨细胞的体外培养技术研究了活性氧自由基及黄腐酸对软骨细胞的损伤效应。结果表明:在一定浓度的自由基和黄腐酸作用下,软骨细胞的生长受到了抑制,细胞形态及其合成分泌基质的能力也发生了明显的变化。本文对黄腐酸的自由基性质及大骨节病与软骨细胞损伤的关系进行了探讨。     

自由基引发的软骨细胞异常基质异常矿化异常——大骨节病病理化学过程初探

本文研究了自由基和黄腐酸对软骨细胞的损伤效应。结果表明自由基和黄腐酸可引起软骨细胞损伤。这种损伤的软骨细胞分泌异常基质,在异常基质中,羟基磷灰石的矿化异常,并在此基础上,提出了一个大骨节病的病理化学过程。     

胶原蛋白凝胶体系中磷酸钙生成研究

目的：了解和认识生物矿化过程基质的作用。方法：在含磷酸钠并且ｐＨ为７．４的胶原蛋白凝胶上面复盖ＣａＣｌ＿２溶液，研究在界面附近凝胶中晶体生长。结果：在Ⅱ型胶原蛋白凝胶中磷酸钙成核受到抑制，并且生成以磷酸八钙为主的矿物相；Ｉ型胶原蛋白在矿化起始阶段具有富集Ｃａ￣（２＋）的能力，并可将磷酸八钙转化为羟基磷灰石。结论：Ｉ型胶原蛋白可调节磷酸钙矿化过程中的晶体生长。     

顺二氯二氨铂(cis PDD)的研究 Ⅰ.顺二氯二氨铂的分析

本文研究了顺二氯二氨铂的纯度与其紫外光谱的关系。提出的测定紫外光谱的方法包括用0.15 M氯化钠溶液做为溶剂以抑制水解。吸光度比A_(s01)/A_(127)与薄层分析相配合可用做评价顺二氯二氨铂质量的可靠判据。在薄层层析法中,用0.15 M氯化钠溶液溶样。溶剂系统为异丁醇-甲醇-四氯化碳-0.15 M氯化钠溶液。在氧化铝-G及硅胶-G板上进行层析,得到再现性好而且分离清晰的结果。     

顺二氯二氨铂(cis PDD)的研究 Ⅱ、顺二氯二氨铂合成条件的研究

研究了用Dhara法合成cisPDD各步反应条件与产品质量的关系。结果表明:在将K_2[PtCl_4]转化为cis[Pt(NH_3)_2I_2]的步骤中,KI:K_2[PtCl_4]摩尔比应不小于10:1。并且要在避光条件下,迅速升温到70℃。将cis[Pt(NH_3)_2I_2]转化为cis[Pt(NH_3)_2(H_2O)_2](NO_3)_2,在室温下搅拌即可。由水合物制成cisPDD时,加入稍过量KCl,水浴上加热10分钟后,应迅速冷却,迅速过滤及干燥。对重结晶也做了研究,提出用0.1M HCl重结晶的方法。根据研究结果提出了合成方法。用此法所得产品质量合格,收率83％。     

姜汁轻组分对FA引发软骨细胞产生过氧化氢的抑制作用

为探讨生姜成分对大骨节病的治疗作用,采用生姜挥发油对黄腐酸刺激软骨细胞产生活性氧进行清除抑制,发现微量(0.16ml/L)生姜挥发油即能够抑制FA刺激软骨细胞产生的过氧化氢。     

自由基在大骨节病病理过程中的作用 Ⅵ.活性氧自由基对Ⅰ型胶原蛋白的损伤以及在损伤的胶原蛋白中的羟基磷灰石的矿化过程

研究了氧自由基对Ⅰ型胶原蛋白造成的损伤以及在损伤的胶原蛋白存在下羟基磷灰石(HAP)的矿化过程。结果表明,黄嘌呤氧化酶系统的作用及~(50)CO照射均引起Ⅰ型胶原蛋白的降解,导致胶原纤维的破坏。用恒pH法研究了Ⅰ型胶原蛋白存在下,HAP在过饱和溶液中成长的动力学,发现Ⅰ型胶原蛋白促进结晶形成,经粒度分布和逆流扩散结晶研究,表明这种促进以对成核的促进为主。这提示,Ⅰ型胶原蛋白的氧化性降解可能是大骨节病发展过程的一个因素。     

自由基在大骨节病病理过程中的作用——Ⅱ.在活性氧自由基及大骨节病病区黄腐酸损伤的Ⅱ型胶原蛋白中羟基磷灰石结晶生长的动力学研究

研究了在·OH与病区饮水中黄腐酸(FA)造成损伤的猪软骨Ⅱ型胶原蛋白中羟基磷灰石(HAP)成长的动力学,并与未损伤的胶原蛋白比较。结果表明,正常情况下的Ⅱ型胶原蛋白抑制HAP成长,而氧化性降解损伤的Ⅱ型胶原蛋白促进HAP成长,但反应均为二级。X射线分析及扫描电镜观察发现,损伤的Ⅱ型胶原蛋白使HAP成长初期结晶性差,最终所得结晶聚合度大。提示软骨组织中的Ⅱ型胶原蛋白因氧化降解后表现了促矿化的性质,这与大骨节病的发生发展可能有重要联系。     

FA促进培养软骨细胞及基质发生异常矿化

采用视黄酸（Retinoicacid，RA）、抗坏血酸（VitaminC，Vc）比较研究大骨节病病区黄腐酸（Fulvicacid，FA）对体外培养肥大软骨细胞及基质的作用，发现病区FA可促进贴壁单层培养的软骨细胞形成异常的胞外基质，促进异常矿化。病区FA刺激软骨细胞产生的活性氧[1]使近细胞膜的软骨囊内蛋白颗粒减少，细蛋白纤维消失；粗长的胶原蛋白变细，胶原蛋白连接方式由正常的束状排列变为杂乱的网状；造成蛋白多糖结构散乱，使矿化位点混乱，而在伤损基质上发生片状不均匀较大量的钙化区。这种异常矿化过程与大骨节病人软骨损伤及修复性的病理矿化有相似之处，支持了大骨节病的自由基致病机理。