米诺环素对大鼠脊髓损伤早期TNF-α表达的影响

目的：探讨米诺环素（minocycline）对大鼠脊髓损伤（SCI）早期的保护作用和机制.方法：108只SD大鼠随机分为3组：对照组（A组=36只）、损伤组（B组=36只）和损伤后米诺环素治疗组（C组=36只）,采用改良Allen＇s打击法致伤B组和C组大鼠T8～T11脊髓,对照组不损伤脊髓.治疗组于术后1h腹腔注射米诺环素（90mg/kg）,之后每隔12h给药1次,对照组和损伤组在相同时点腹腔注射相同体积生理盐水.B组和C组于术后2h、6h、12h、24h、48h、72h处死大鼠取损伤段脊髓标本,A组在相应时间点取相应节段脊髓标本,切片后行HE染色组织病理学检查和免疫组织化学检测TNF-α表达.结果：脊髓损伤早期损伤脊髓取材免疫组化镜检后发现A组大鼠脊髓TNF-α呈弱阳性表达;B组和C组伤后2h即有TNF-α表达,12h达到高峰,之后逐渐下降;B组伤后72h TNF-α表达仍较A组高（P＜0.05）,而C组在伤后72h即恢复到对照组水平（P＞0.05）,C组各时间点TNF-α表达均较损伤组低（P＜0.05）.结论：米诺环素可显著降低脊髓损伤早期组织中TNF-α的表达,为其应用于临床治疗急性脊髓损伤提供实验依据.     

Cu^2＋对MC3T3-E1细胞增殖分化影响及对OPG、MEPE表达的影响

目的观察Cu^2＋对小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）增殖、分化以及OPG与MEPE表达。方法采用不同浓度1×10（-4～-6）mol/L Cu2＋作用于MC3T3-E1细胞,分别在24、48、72、96 h后采用MTT法检测Cu^2＋对细胞增殖的影响;ALP（碱性磷酸酶）试剂盒检测细胞培养液中ALP活性;RT-PCR方法检测1×10（-4～-6）mol/L Cu2＋作用下细胞中OPG和MEPE的mRNA表达水平,探讨MC3T3-E1细胞增殖分化的分子机制。结果作用48 h和96 h时,1×10-6mol/L Cu^2＋明显促进MC3T3-E1细胞增殖;作用24 h时,此浓度对细胞增殖无影响;作用72 h时,1×10-6mol/L Cu^2＋明显抑制细胞增殖;1×10-4mol/L、1×10-5mol/L的Cu2＋对MC3T3-E1细胞增殖无影响或抑制其增殖。ALP试剂盒检测1×10-6mol/LCu2＋在作用24 h时,对细胞分化无影响,其他时间均可促进细胞分化;1×10-4mol/L的Cu2＋抑制细胞分化,1×10-5mol/LCu2＋在作用96 h时,可显著促进MC3T3-E1细胞分化,其他时间对细胞分化无影响。琼脂糖凝胶电泳图片可见1×10（-4～-6）mol/LCu2＋作用于MC3T3-E1细胞48 h时,OPG和MEPEmRNA均有表达。实时荧光定量PCR结果表明,在Cu2＋浓度为1×10-6mol/L作用48 h时OPG与MEPEmRNA明显增加。结论作用48 h时,1×10-6mol/L Cu2＋可以促进MC3T3-E1细胞增殖和分化,其机制与OPG、MEPEmRNA相关。