新型阿片功能调节剂胍丁胺的药理学作用及机制

胍丁胺 (ａｇｍａｔｉｎｅ)是左旋精氨酸在左旋精氨酸脱羧酶 (Ｌ ＡＤＣ)催化下脱羧基的产物 ,能被胍丁胺酶和二胺氧化酶分解代谢 ,现被认为是一种神经递质和 /或神经调质[1] 。 1996年Ｋｏｌｅｓｎｉｋｏｖ等[2 ] 首次报道胍丁胺能增强阿片镇痛、对抗阿片耐受。在此基础上 ,在国家自然科学基金资助下 ,我们实验室对胍丁胺调节阿片功能及其可能机制进行了全面的研究 ,率先报道了胍丁胺具有弱镇痛作用、对阿片耐受具有治疗作用 ,预防和治疗阿片躯体依赖 ,其作用机制与影响阿片受体功能无关 ,与减少单胺类神经递质释放 ,抑制长期阿片处理引起…     

G蛋白偶联受体/分泌酶复合体调节阿尔兹海默症发病进程的新机制

目的目前对于特异性调控分泌酶剪切淀粉样蛋白前体蛋白的分子机制尚不十分清楚,而临床上抗阿尔兹海默症(A lzhe im ers′D isease,AD)药物的疗效也不足以从根本上缓解病理症状的恶化。对G-蛋白偶联受体(G-prote in coup led receptors,GPCR s)在AD疾病进程的调节机制相关研究进展予以总结,对于以GPCR作为药物靶点的潜在可能性进行讨论。方法对于特异性调控分泌酶剪切淀粉样蛋白前体蛋白的分子机制相关的细胞生物学领域以及AD疾病模型上对于发病机制的研究进展进行总结归纳,并针对该领域的几个重要科学问题进行讨论。结果与结论GPCR对于AD疾病进程的调节机制,尤其是其与分泌酶形成的复合体对于β-淀粉样蛋白(amyloid-,βAβ)产生以及AD发病的调节机制,具有理想的特异性,可成为抗AD药物的新型潜在靶点。     

阿片类药物对海马神经递质释放调控的分子机制

阿片类药物的滥用,可导致脑内神经元的长时程适应,从而产生严重的身体依赖和心理依赖。越来越多的证据表明,阿片类药物所引起的这种适应性变化会影响突触前神经递质的释放,并改变包括谷氨酸能神经系统在内的神经元的功能。我们的研究表明,在海马这个富含谷氨酸能神经元的脑区,阿片类药物如吗啡的长期使用,会引起胞外谷氨酸水平的持续改变。进一步的研究表明,该脑区的SNARE蛋白复合物发生了适应性的改变。SNARE蛋白家族是重要的调节神经可塑性的调节分子,在神经递质释放过程中起重要作用。在吗啡长期处理过程中,SNAP-25的色氨酸187位点的磷酸化明显下降,SNARE复合物的形成受到抑制。我们的结果揭示了阿片类药物可通过调控突触前直接参与递质释放的分子来影响递质本身释放这一分子机制。     

糖皮质激素快速激活PC12细胞Erk1/2 MAPK

目的 :研究皮质酮在ＰＣ1 2细胞是否能激活Ｅｒｋ1 /2ＭＡＰＫ及探讨其胞内信号转导机制。方法 :( 1 )ＰＣ1 2细胞培养 ;( 2 )免疫蛋白印迹 (Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ)法检测Ｅｒｋ1 /2ＭＡＰＫ的磷酸化 ;( 3)用间接免疫荧光染色法观察激活的Ｅｒｋ 1 /2ＭＡＰＫ由胞质向核转位的情况 ;( 4 )ＭＡＰＫ活性直接测定法。结果 :( 1 )皮质酮可以浓度依赖性方式刺激ＭＡＰＫ磷酸化 ,激活曲线为钟形 ,最大激活浓度为 1 0 - 9ｍｏｌ/Ｌ(时间为 1 5ｍｉｎ) ;( 2 )皮质酮以时间依赖性方式刺激ＭＡＰＫ磷酸化 ,皮质酮作用 5ｍｉｎ时 ,有Ｅｒｋ1 …     

胍丁胺对阿片受体环腺苷—磷酸信号转导系统代偿适应的影响

目的:观察胍丁胺对阿片类所致脱敏和物质依赖的作用。方法:分别用放射配体结合实验和放免法测定γ-[~(35)S]-三磷鸟苷([~(35)S]GTTP)结合量和环腺苷一磷酸(cAMP)浓度。结果:在经阿片类药物预处理的NG108-15细胞实验中,胍丁胺使阿片类药物刺激[~(35)S]GTTP结合作用增强35％;使阿片类药物对cAMP抑制作用增强114.3％;使纳洛酮引起的吗啡物质依赖细胞cAMP超射幅度和对照组相比减小214.9％。胍丁胺的上述作用均可被咪唑克生浓度依赖性阻断。结论:胍丁胺通过激活咪唑啉受体阻止cAMP信号转导通路代偿适应过程的形成。     

Human μ-opioid receptor overexpressed in baculovirus system and its pharmacological characterizations

目的：高效表达具有类似哺乳动物特性的人μ阿片受体．方法：人μ阿片受体表达在重组杆状病毒感染的Ｓｆ９昆虫细胞中，用受体结合分析和ｃＡＭＰ分析研究表达产物的药理学特征．结果：［３Ｈ］二丙诺啡及［３Ｈ］羟甲芬太尼（Ｏｈｍ）的最大结合能力分别是９．１±０．７，６５２±０．２３ｎｍｏｌ／ｇ蛋白．μ选择性激动剂对［３Ｈ］二丙诺啡或［３Ｈ］Ｏｈｍ与表达受体的结合均有很强的抑制作用，而δ及κ激动剂则均无抑制作用．μ选择性激动剂有效抑制ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ刺激的ｃＡＭＰ聚集，这种作用能被拮抗剂纳洛酮阻断．结论：在Ｓｆ９昆虫细胞中高效表达的人μ阿片受体保持着野生型人μ阿片受体的特征     

Binding properties of C-truncated delta opioid receptors

目的：研究δ阿片受体Ｃ末端在受体结合配体的亲和力及选择性中的作用．方法：在中国苍鼠卵巢细胞（ＣＨＯ细胞）中分别稳定表达Ｃ末端截短３１个氨基酸残基及野生型δ阿片受体，用受体结合分析法研究表达产物与配体的结合特征．结果：表达得到典型突变受体克隆ＣＨＯＴ及野生型受体克隆ＣＨＯＷ．ＣＨＯＴ结合［３Ｈ］ｄｉｐｒｅｎｏｒｐｈｉｎｅ（Ｄｉｐ）及［３Ｈ］［ＤＡｌａ２，ＤＬｅｕ５］ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ（ＤＡＤＬＥ）的Ｋｄ值与ＣＨＯＷ一致，δ选择性激动剂对二者与［３Ｈ］Ｄｉｐ的结合均有很强的抑制作用，且Ｋｉ相似；而μ及κ选择性激动剂则对二者均无抑制作用．结论：δ阿片受体的Ｃ末端与受体结合配体的亲和力及选择性无关．     

采用细胞传感器测定受体的激活和信号转导

细胞是组成生物有机整体的基本单位，每个细胞无时无刻不在发出和接受外界及其他细胞的信号，并根据所处的物理、化学、生物环境的变化，通过特异的信号传导途径调节细胞自身的生命活动，对环境作出反应。虽然不同信号的传导通路不同，所导致的生物学效应也不一样，但细胞...     

Agmatine inhibited tolerance to and dependence on morphine in guinea pig ileum in vitro

目的：观察胍丁胺对吗啡耐受和物质依赖豚鼠回肠纵肌（ＧＰＩＬＭ）的作用．方法：本实验在离体电场刺激实验中进行．结果：吗啡抑制ＥＦＳ引起的ＧＰＩＬＭ收缩［ＩＣ５０＝１４０（１０７－１８２）ｎｍｏｌ·Ｌ－１］．用吗啡２７０ｎｍｏｌ·Ｌ－１与ＧＰＩＬＭ温浴使吗啡ＩＣ５０增大３７倍（耐受），对纳络酮发生收缩反应（物质依赖）．分别用吗啡加纳络酮和吗啡加胍丁胺与ＧＰＩＬＭ温浴使吗啡失去此致耐受作用，使标本对纳络酮收缩反应幅度分别减少了９０％和７５％．胍丁胺的这些作用几乎可被咪唑克生完全阻断．结论：胍丁胺通过激活咪唑啉受体抑制离体ＧＰＩＬＭ对吗啡耐受和物质依赖的形成过程     

人参皂苷对吗啡作用影响的研究进展

对人参皂苷拮抗吗啡成瘾有关的药理作用进行了综述 ,主要介绍了人参皂苷对吗啡引起的与成瘾有关的动物行为、神经系统功能和信号转导改变的拮抗作用。