四氢大麻酚对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎的保护作用

为研究大麻素成分[四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol, THC)]对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)的影响,尾静脉注射质粒pCYP2D6和pcDNA3.1,腹腔重复注射四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl_4)和THC,ELISA检测自身免疫应答程度,微板法检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)活性,HE染色检测肝脏炎症反应程度,天狼猩红染色检测肝脏纤维化程度。结果显示,THC对由CCl_4/CYP2D6引起的AIH造成的肝损伤有显著改善,而且对自身免疫应答有显著抑制作用,自身抗体和抗CYP2D6抗体水平显著降低,对于单独由CYP2D6引起的抗CYP2D6抗体能够完全抑制。THC对AIH和肝纤维化也有显著的抑制作用,且THC的抑制作用与其浓度有关。由此THC对由CCl_4/CYP2D6引起的C57BL/6小鼠的AIH有显著抑制作用,并且呈剂量依赖性。由此大麻素类药物THC对AIH可能有保护作用。     

非霍奇金淋巴瘤中p73基因甲基化与mRNA表达的相关性研究

目的：探讨NHL中p73基因启动子甲基化与其mRNA表达的相关性。方法：用甲基化特异性PcR（MsP）方法对24例非霍奇金淋巴瘤（NHL）p73基因启动子的甲基化状况进行检测,用RT—PCR检测其1TIRNA表达。结果：24例NHL中21例发生甲基化,甲基化阳性率87．5％;对照组均未出现甲基化。24例NHL中20例p73mRNA阴性表达,占83．33％,对照组p73mRNA表达阳性。结论：在NHL中p73tuRNA表达下调,且p73基因表达与p73基因启动子的甲基化呈显著负相关;p73基因启动子的甲基化可能是造成p73基因表达下调进而导致NHL发病的原因之一。     

“互联网+”背景下模块教学法在生物化学与分子生物学实验教学中的应用研究

目的：探讨生物化学与分子生物学课程实验教学改革模式。方法：以医学检验学专业的两个班学生为研究对象,分为实验组和对照组。实验组采用模块教学法;对照组采用传统实验教学模式。结果：实验组的考核成绩均高于对照组(P<0.05),问卷调查显示实验组多数学生满意该教学法。结论：实验组方法对提升教学效果有显著促进作用。     

5-氮-2'-脱氧胞苷对非霍奇金淋巴瘤p73基因甲基化的逆转作用

目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷对非霍奇金淋巴瘤(NHL)p73基因甲基化的逆转作用。方法用甲基化特异性PCR(MSP)方法对24例NHL p73基因启动子的甲基化进行检测,用5-氮-2'-脱氧胞苷处理部分NHL原代培养细胞后,检测p73 mRNA表达情况。结果 24例NHL中21例发生甲基化,甲基化阳性率高达87.5%;对照组(12例反应性增生淋巴结细胞及22例正常人外周血淋巴细胞)均未出现甲基化。部分未经治疗的NHL样本经5-氮-2'-脱氧胞苷处理后,p73 mRNA表达恢复。结论 p73基因启动子的甲基化可被5-氮-2'-脱氧胞苷逆转,导致因甲基化而被抑制的p73基因表达上调。     

表达BG4蛋白对人胃癌AGS细胞凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响

目的:构建G-四链体抗体BG4基因的真核表达载体p EGFP-N1-BG4,探讨转染该真核表达载体致BG4蛋白过表达对人胃癌细胞株AGS凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响。方法:以BG4基因原核表达载体p SANG10-BG4为模板,PCR扩增出含有BG4基因的目的片段,经TA克隆与p MD18-T载体连接,测序正确后,经Sac I和Pst I双酶切,与真核表达载体p EGFP-N1连接后转化感受态大肠杆菌DH5α,并进行酶切分析和序列测定,Western blot鉴定BG4蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;DAPI法及HE染色检测各组细胞凋亡;q PCR和Western blot检测空白对照组、p EGFP-N1组和p EGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白表达的变化。结果:酶切分析显示,目的基因条带与预期结果相符,DNA测序表明克隆的BG4基因序列正确,Western blot结果表明转染p EGFP-N1-BG4质粒可以成功表达BG4蛋白。转染p EGFP-N1-BG4质粒可抑制细胞进入S期。DAPI法及HE染色显示,p EGFP-N1-BG4组出现明显的新月形核和核固缩的细胞凋亡现象。q PCR和Western blot结果表明,p EGFPN1-BG4组端粒酶逆转录酶表达受到抑制。结论:用p EGFP-N1-BG4真核表达载体转染胃癌细胞株AGS可以抑制该细胞端粒酶逆转录酶表达,诱导细胞凋亡。     

PBL与CBL综合教学法在医学生化课教学中的探索与实践

面对生物化学课理论知识抽象,难以理解、难以记忆的问题,结合国内外教学改革的经验和生化课教学特点,在教学中实施一种新型的PBL与CBL综合教学模式,旨在促使教师改变传统教学方法,在教学过程中不断提高自身教学水平,从而提高生物化学课教学质量。     

靶向干扰前列腺源性ETS因子促进HT29细胞的增殖与侵袭

目的:结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,研究发现在结直肠组织,前列腺源性ETS因子(Prostate-derived Ets factor,PDEF)的表达可以促进分泌性祖细胞向杯状细胞分化,因此结直肠癌的发生可能与PDEF的表达有关。本研究旨在探讨靶向干扰前列腺源性ETS因子对结直肠癌细胞株HT29增殖与侵袭的影响。方法:阳离子脂质体法将PDEF干扰质粒和空白对照空质粒瞬时转染HT29细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR、Western blot技术测定正常对照组、空白对照组和shRNA组中PDEF mRNA和蛋白的表达情况;MTT法检测HT29细胞的增殖情况;采用Transwell迁移实验观察细胞侵袭能力。结果:干扰质粒、空质粒成功转染HT29细胞,通过荧光显微镜可以观察到绿色荧光蛋白的表达;Western blot结果可见shRNA组PDEF蛋白的表达较正常对照组和空白对照组降低;MTT法检测发现干扰PDEF基因的表达能够明显促进HT29细胞的增殖(P<0.05);48 h后,shRNA组细胞侵袭能力明显强于正常对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:在HT29细胞中干扰PDEF的表达,可以促进细胞的增殖与侵袭。     

人DMP1结构及功能的生物信息学分析

目的预测分析人DMP1的结构与功能,为进一步探讨DMP1作用机制提供借鉴。方法生物信息学方法分析DMP1蛋白的理化性质、亚细胞定位、跨膜区和信号肽、二级结构、三级结构,潜在磷酸化及糖基化位点、蛋白相互作用网络、5’非翻译区潜在转录因子结合位点和DMP1分子的进化保守性等指标。结果人DMP1蛋白是酸性亲水蛋白;信号肽切割位点位于第16与17位氨基酸之间,无跨膜区;主要二级结构形式为无规卷曲;磷酸化位点123个,O-糖基化位点118个、N-糖基化位点8个;DMP1具有利于蛋白间相互作用的结构特点,5’非翻译区存在多种转录因子潜在结合位点,人体各类组织均有表达,且具有在多种亚细胞结构中定位的特征。结论疏松的结构特征、表达的广泛性、丰富的修饰位点及多种转录因子结合位点均提示DMP1具有更为复杂的生物学功能。