莱菔硫烷对小鼠脊髓损伤后后肢功能的作用

目的 观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对小鼠脊髓损伤后炎症反应、胶质瘢痕、轴突再生的干预作用,探讨其在脊髓损伤中的作用机制.方法 雌性ICR小鼠66只,按随机数字表法分为4组:假手术组(n=12)、单纯损伤组(n=18)、莱菔硫烷组[5 mg/(kg·d)SFN,ip,n=18]、溶剂对照组(等体积玉米油腹腔注射,n=18).假手术组仅咬除椎板,余各组行脊髓夹伤术,制备脊髓夹伤模型.建模后1、7、14、21、28 d进行小鼠后肢运动功能评分(BMS评分);Western blot检测建模后7d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况,28 d后各损伤组GAP-43表达情况;ELISA检测建模后7d各组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达情况;免疫荧光染色观察建模后7d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况.结果 假手术组BMS评分9分,各脊髓损伤组术后后肢运动功能均有不同程度恢复,术后28 d时单纯损伤组评分为(2.17±0.41)分,溶剂对照组(2.33±0.52)分,莱菔硫烷组(3.33±0.52)分,后者与前二者比较差异有统计学意义(P＜0.05).术后7d行免疫荧光染色可见各脊髓损伤组星形胶质细胞活化,GFAP、CSPG、P65表达增加,单纯损伤组与溶剂对照组较莱菔硫烷组更明显.术后7d莱菔硫烷组GFAP、CSPG、P65蛋白相对表达量均较单纯损伤组与溶剂对照组低(P＜0.05),术后28 d莱菔硫烷组GAP-43蛋白相对表达量较单纯损伤组与溶剂对照组明显增加(P＜0.05).建模后7d,莱菔硫烷组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达较其余损伤组明显降低(P＜0.05).结论 莱菔硫烷可减轻小鼠脊髓损伤后炎症反应,抑制胶质瘢痕形成,促进轴突再生,改善后肢运动功能.     

春季追肥对川芎产量、阿魏酸和总生物碱含量的影响

采用田间试验方法，研究了春季追肥对川芎生长发育和产量与品质的影响。结果表明，春肥可在一定程度上延长川芎的根长，增加其茎蘖数，使植株变高，并显著提高其叶片的叶绿素含量，增加干物质积累，特别是地下部的干物质量，从而显著提高川芎的产量，改善其品质，增加经济收入，其中以单施尿素58.7 kg·hm^-2(纯氮27 kg·hm^-2)的效果最佳，其次为氮磷钾配施。     

丙戊酸钠通过p21调控大鼠神经干细胞的增殖

目的 探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对体外培养的成年雌大鼠脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响.方法 采用不同浓度的VPA(10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、1、10 mmol/L)作用于NSCs,CCK-8法检测在不同时间点(0、24、48、72 h)对细胞增殖的影响；VPA(10-5、l mmol/L)作用于NSCs 48 h后,流式细胞仪测定细胞周期分布,PCR测定p21在基因水平的表达,Western blot测定p21在蛋白质水平的表达.结果 CCK-8检测显示,当VPA浓度＞ 10-5 mmol/L时,体外培养的成年大鼠脊髓NSCs的增殖受到明显抑制,且具有时间依赖性.流式细胞仪细胞周期检测显示,同样浓度下,VPA可阻滞NSCs由G0/G1期向S期转换,表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞减少.PCR检测发现VPA可促进p21基因水平的表达.Western blot检测发现VPA可促进p21蛋白质水平的表达,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 VPA可能通过促进p21表达,使NSCs阻滞于G0/G1期,最终抑制NSCs增殖.     

脊髓栓系松解术治疗儿童和成人脊髓栓系综合征的疗效

目的 观察脊髓栓系松解术治疗儿童和成人脊髓栓系综合征的疗效。方法 127例脊髓栓系综合征患者,根据年龄分为A组(<14岁,70例)和B组(≥14岁,57例),比较两组临床症状和体征、手术情况及术后疗效。结果 B组大便功能异常、疼痛或麻木比例高于A组,而A组中无症状比例高于B组(P<0.05)。A组术中出血量少于B组(P<0.05)。A组大便功能异常、小便功能异常和肌无力治疗有效率高于B组,A组麻木治疗有效率低于B组(P<0.05)。结论 脊髓栓系松解术治疗儿童和成年脊髓栓系综合征患者均安全、有效。对于无症状的儿童患者,也应积极地进行手术治疗,以防止出现难以扭转的神经缺陷。     

莱菔硫烷抑制LPS诱导的小鼠星形胶质细胞增殖

目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖的影响及其机制.方法 体外培养小鼠原代星形胶质细胞,给予0.1 μg/mL LPS刺激星形胶质细胞活化增殖;同时分别给予不同浓度的莱菔硫烷(10、15、20 μmol/L)处理星形胶质细胞24 h后,CCK8法检测细胞增殖情况;选取20 μmoL/L作为干预剂量行GFAP、Ki67双标免疫荧光染色及流式细胞仪细胞周期检测,进一步验证莱菔硫烷对LPS诱导星形胶质增殖的作用;Western blot检测细胞周期相关蛋白P27kip1、CyclinD1、PCNA的表达情况.结果 CCK8法检测显示0.1μg/mL LPS能显著促进星形胶质细胞增殖(P＜0.01),而加入20μmol/L莱菔硫烷能显著抑制LPS诱导的星形胶质细胞增殖(P＜0.01),并能减少LPS刺激下的Ki67阳性细胞(P＜0.05);细胞周期分析提示20 μmol/L莱菔硫烷可减少LPS诱导下的星形胶质细胞S期比例,增加G1期细胞比例(P＜0.05);Western blot提示20 μmol/L莱菔硫烷能下调LPS刺激下PCNA、CyclinD1的表达,上调P27kip1表达(P＜0.05).结论 莱菔硫烷可以通过调控星形胶质细胞细胞周期,抑制体外LPS诱导的星形胶质细胞增殖.     

川中丘区“麦/玉/苕”模式玉米高产综合栽掊技术研究

运用三因素五水平二次正交旋转组合试验设计方法,研究了川中丘区“麦／玉／苕”模式玉米的播种期、栽植密度和氮化肥用量对产量及其主要经济性状的影响,建立了相应的数学模型,得出郑单１４在育苗移栽、地膜覆盖栽培条件下产量６．７５ｔ／ｈｍ２以上的高产栽培技术方案为：播种期３月５～１５日、栽植密度６．４～７．０株／ｍ２、氮化肥用量２２０～２７０ｋｇ／ｈｍ２     

基于RAPD标记的SCAR分子标记技术鉴定川牛膝及其混淆品

目的:基于RAPD标记开发SCAR标记,为川牛膝及其混淆品鉴定提供有效方法。方法:建立了收集于四川天全、宝兴、会理、金口河等地的19个牛膝种群(包括川牛膝及其混淆品红牛膝、怀牛膝)的RAPD指纹图谱,从中找到能有效区分上述材料的多态性谱带F300,F500进行克隆与测序;根据测序结果设计2对特异引物对19份材料进行PCR扩增。结果:引物SC-320能稳定地区分川牛膝与怀牛膝,引物SC-495则能稳定地区分川牛膝与红牛膝,2对引物结合能快速准确地鉴定川牛膝、红牛膝和怀牛膝。结论:建立了鉴定川牛膝及其混淆品的SCAR标记技术体系.     

HPLC测定不同采收期川芎药材中5种药效成分的含量

该文建立了HPLC同时测定川芎药材中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A和藁本内酯含量的方法。用40%乙醇提取样品中的药效成分,采用Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,0~5 min,乙腈-甲醇-1%冰醋酸(20∶40∶40),5~30 min,乙腈-甲醇-1%冰乙酸(60~100∶0∶40~0)为流动相,流速l mL·min-1,检测波长0~4.3 min,321nm,4.31~30 min,275 nm,柱温35℃,进样体积10μL,应用安捷伦1100系列液相色谱仪进行测定。5种药效成分的分离效果良好,在相应的浓度范围内与峰面积有良好的线性关系,相关系数均大于0.99,加样回收率(n=6)均在94.44%~103.1%。该方法应用于研究都江堰产区(海拔600 m左右)不同采收期对川芎阿魏酸和4种内酯类物质含量的影响,试验在4月15日(栽后245 d)至5月30日(290 d)内设置了10个采收期,发现5种药效成分的含量与采收期(栽后天数)均呈二次或三次函数关系,随着采收期的推迟而先增后减,阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A和藁本内酯的含量在栽后260~265d(4月30日至5月5日)最高。