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目的:探讨混合热休克蛋白(HSP)/肽与白介素-12(IL-12)和环磷酰胺(CTX)联合治疗小鼠肉瘤的作用及机制。方法:以S-180肉瘤为模型,将瘤组织剪碎,裂解,离心,取上清经Sephacryl S-200层析,截取相对分子质量(50~200)×103段,经SDS-PAGE电泳及Western-blot法鉴定。用提取的HSP/肽免疫小鼠后,再用低剂量CTX及IL-12治疗(强化疫苗),观察无瘤生存率、抑瘤生长率、抑制转移率和存活期。用流式细胞仪,ELISPOT及乳酸脱氢酶等方法检测免疫功能的变化。结果:HSP疫苗与IL-12和CTX联合治疗小鼠S-180肉瘤,80.0%肿瘤完全消退,且100.0%抑制了肺部转移,达长期生存,而对照组全部在40d内死亡。检测表明HSP/肽疫苗形成了免疫预存,从而使IL-12和CTX发挥了抗瘤作用。结论:HSP/肽与IL-12和CTX联合治疗诱发了机体细胞免疫功能,产生强大的抗瘤作用,可能具有临床应用前景。 相似文献
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目的 探讨用旋转细胞培养系统(RCCS)进行大动物软骨细胞扩增的可行性。方法 将单层培养的具有正常表型的中国山羊软骨细胞和Cytodex-3微载体放入RCCS的培养容器中,加入DMEM 培养基进行培养。在细胞培养的第3、6、9、12 天,于倒置显微镜下观察Cytodex-3微载体表面软骨细胞生长形态及增殖变化情况,并对收获的软骨细胞进行蕃红花"O"染色和Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色分析。结果 软骨细胞贴附于微载体表面生长,细胞初期呈球形、半球形凸起,逐渐向周围伸展,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多。收获的软骨细胞蕃红花"O"染色呈强阳性,Ⅰ型胶原染色呈阴性,Ⅱ型胶原染色则呈强阳性。结论 利用RCCS可简便快速地在体外扩增羊软骨细胞,培养的软骨细胞具有正常的表型,能特异性分泌软骨组织特有的基质成分。 相似文献
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人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中构建组织工程软骨 总被引:5,自引:5,他引:5
目的:观察人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中初步构建组织工程软骨的可行性。方法:实验于2005-04/2006-05在解放军总医院骨科研究所完成。脂肪组织和关节软骨均来自膝关节置换术中切除的组织,并经患者知情同意。关节软骨冻干后经粉碎机粉碎,过筛,选取25~38μm大小的软骨微粒。在样品中先加入2.5g/L胰蛋白酶,37℃消化24h,再加入1%Triton X-100震荡72h。将软骨微粒和蒸馏水按1∶3的比例混合后滴加在模板中,置入冷冻干燥机冻干后行紫外线交联。紫外线照射8h完成。最后经25kGy 60Co辐照灭菌完成支架制备。取膝关节置换术中切除的髌下脂肪垫,酶消法获得脂肪干细胞,扩增后复合于脱细胞软骨基质制成圆柱状三维支架上(细胞密度5×1010L-1),置于生物反应器中进行诱导培养,同时设静态培养组作为对照,3周后观测大体形态和组织学形态变化,同时进行组织化学(包括番红花O,阿利新蓝染色)和Ⅱ型胶原免疫组织化学分析。结果:生物反应器组诱导培养3周苏木精-伊红染色显示支架结构消失,只有中心区域残存少量支架结构;静态培养组支架结构尚存在,有少量基质分泌。番红花O染色显示生物反应器组细胞外有大量蛋白聚糖沉积,阿利新蓝染色表明有软骨特异性蛋白多糖的聚集;而静态培养组只有部分区域染色且淡于生物反应器组。Ⅰ型胶原免疫组化的结果显示,在生物反应器组细胞能够合成大量软骨细胞特异性胶原成分,而静态培养组呈弱阳性。结论:生物反应器培养明显促进了脂肪干细胞的增殖与软骨分化,是体外构建组织工程软骨的良好方法。 相似文献
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以Gs-2、Ps-7、Ps-10 3株单克隆抗体用SABC-ELISA结合抑制法检测胃液中的胃癌相关抗原,以结合抑制率间接反应抗原含量。结果表明3株单抗对应抗原在胃癌患者胃液中的平均含量明显高于正常对照及非 相似文献
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IgM单克隆抗体的提纯是比较困难的。国内外不少作者采用了不同的提纯方法,本文选用产生IgM单抗的杂交瘤细胞系(PS-1)在BALB/c小鼠腹腔产生的腹水单克隆抗体,摸索并比较了三种提纯方案的效果。 相似文献
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S-Tn抗原在胃癌及胃癌前病变组织中表达的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨S Tn抗原在胃癌及胃癌前病变组织中的表达情况 ,评价S Tn抗原对胃癌的诊断价值。方法 采用免疫组织化学染色法对 10 9例胃癌、70例癌旁粘膜、19例慢性萎缩性胃炎(chronicatrophicgastritis,CAG)、2例慢性浅表性胃炎 (chronicsuperficialgastritis,CSG)、2 8例正常胃粘膜进行染色分析。结果 胃癌组总阳性率为 74 3% ,其中印戒细胞癌阳性率最高为 83 8% ,随着分化程度的降低 ,阳性率愈来愈低。癌旁粘膜阳性率为 84 3% ,明显高于胃癌组 (P <0 0 1)。CAG组阳性率为 73 7% ,CAG伴肠上皮化生 (intestinalmetaplasia,IM)组明显高于CAG伴不典型增生 (atypicalprolif eration ,ATP)组 (P <0 0 1)。CSG组及正常粘膜为阴性。结论 S Tn在胃癌、癌旁粘膜和萎缩性胃炎中均有较高表达 ,其中以癌旁粘膜组表达率最高。伴有IM时S Tn表达更高 ,为 91 6 %。 相似文献