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目的:探讨转染含有葡萄糖反应元件(GLRE)的重组人胰岛素基因大鼠肝癌细胞中不同葡萄糖浓度下胰岛素的分泌情况。方法:利用含有重组质粒[PLXSN-(GLRE)3-BP-1MpINS]的逆转录病毒转染大鼠肝癌CBRH7919细胞,筛选出阳性细胞克隆,调整葡萄糖浓度,测定培养液中胰岛素值。结果:转染后38 h,葡萄糖浓度为0,5,15,25 mmol/L,胰岛素分泌量分别为(5.03±0.72),(9.57±0.49),(32.60±1.96),(43.90±2.30)IU/L,各组间差别显著(P<0.05);转染后1个月,在上述葡萄糖浓度下,胰岛素分泌量分别为(3.57±0.21),(5.30±0.20),(16.27±0.87),(23.23±1.12)IU/L,各组间差别显著(P<0.05)。结论:构建的重组人胰岛素基因具有随培养液中葡萄糖浓度升高调节胰岛素分泌的能力。 相似文献
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简捷的PCR点突变实现人胰岛素原基因非β细胞表达 总被引:2,自引:0,他引:2
利用聚合酶链反应 (PCR)技术将人胰岛素原基因进行两处突变 ,引入Furin酶的裂解位点 ,再构建突变人胰岛素原基因逆转录病毒载体重组质粒 ,转染HepG2肝癌细胞 ,经检测可表达成熟胰岛素。所采用的PCR点突变法简单且无错误掺入产生 相似文献
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目的 观察骨髓干细胞(BSCs)动员并诱导后对2型糖尿病(T2DM)大鼠的降糖作用,探讨该疗法可能的降糖作用机制.方法 50只雄性Wistar大鼠,随机分为健康对照组(10只)和模型组(40只).采用高脂、高糖饮食联合单次小剂量链脲佐菌素腹腔注射造模并随机分为4组:骨髓干细胞组给予体外BSCs回榆;单纯动员组给予重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF);动员并诱导组给予rhG-CSF联合促肝细胞生长素和烟酰胺;糖尿病对照组.用放射免疫法测空腹血清胰岛素,免疫沉淀和Western blot检测骨骼肌葡萄糖转运体-4(GLUT4)蛋白的表达量.结果 与糖尿病对照组相比,动员并诱导组大鼠血糖下降33.95%(P <0.01),空腹血清胰岛素水平差异无统计学意义(P>0.05),稳态模型胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05),骨骼肌GLUT4蛋白的表达量显著升高(P<0.01).结论 rhG-CSF联合促肝细胞生长素和烟酰胺对T2DM大鼠有降糖作用,能够上调其骨骼肌细胞膜GLUT4蛋白的表达量,改善胰岛素敏感性. 相似文献
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慢性心力衰竭(心衰)是由于心脏器质性或功能性疾病损害心室充盈和射血能力而引起的一组临床综合[1],心衰并发继发性糖尿病国内报道较少,我院2003年至2006年1月共诊治25例,现报道如下. 相似文献
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曲安西龙可促进桥本氏病伴甲减的甲状腺功能恢复 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究曲安西龙对桥本氏病伴甲减的疗效。方法:桥本氏病伴甲减患者共60例,随机分为曲安西龙组和对照组。两组于治疗前及治疗后4个月时分别测定血清游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、血浆皮质醇、促肾上腺皮质激素及血浆葡萄糖水平。结果:治疗后曲安西龙组TSH较对照组显著改善(P均<0.05),TgAb和TPOAb也明显下降(P均<0.05),且治疗所需左旋甲状腺素的平均剂量为39±20μg/d,明显低于对照组(P<0.05)。结论:曲安西龙能明显降低血清TgAb和TPOAb水平,增强左旋甲状腺素对桥本氏病伴甲减的疗效,更快恢复甲状腺功能。 相似文献
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目的:探讨2型糖尿病患者运动神经传导速度(motornerveconductionvelocity,MNCV)和感觉神经传导速度(sensorynerveconductionvelocity,SNCV)的变化与C肽水平的关系,为防治糖尿病周围神经病变提供理论依据。方法:回顾性分析73例2型糖尿病患者的MNCV和SNCV与C肽释放试验中糖负荷前及糖负荷120minC肽水平的关联性。结果:2型糖尿病患者的MNCV及SNCV正常者和异常者的下降与糖负荷120minC肽水平下降有关(t=23.15~35.46,P<0.01),与糖负荷前C肽水平下降无关(t=0.47~1.63,P>0.05)。结论:C肽水平下降可能会加速神经传导速度的下降,提示保持血中C肽水平,有可能延缓周围神经病变的进展。 相似文献
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C肽与血糖比值对糖尿病分型及治疗的意义 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 :探讨C肽与血糖比值 (C/GR)对糖尿病分型及治疗的意义。方法 :对 19例 1型糖尿病和 136例2型糖尿病患者进行空腹和糖负荷后 30 ,6 0 ,12 0 ,180min的血糖和血浆C肽测定 ,将 2型糖尿病患者分为两个亚组 (非胰岛素治疗组和胰岛素治疗组 )。动态观察各组糖尿病患者空腹和糖负荷后各时点的C/GR。结果 :1型糖尿病组空腹和糖负荷后各时点的C/GR均显著低于 2型糖尿病组 (P <0 .0 1) ,其比值的变化趋势不同于 2型糖尿病组。 2型糖尿病两亚组C/GR的变化趋势相同 ,但胰岛素治疗组各时点的比值均显著低于非胰岛素治疗组(P <0 .0 1)。结论 :C肽与血糖比值可作为评定胰岛功能指标 ,并且对糖尿病的分型及治疗有指导意义 ,对该值较低的 2型糖尿病患者应给予胰岛素治疗 相似文献
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血浆浓度测定在嗜铬瘤或嗜铬组织增生与原发性高血压的鉴别诊断中占有重要地位[1,2].在临床检测中,有人要求血浆肾上腺素(E)及去甲肾上腺素(NE)测定应空腹平卧时取血样,并在针头插入静脉后留置,不短于20 min后抽血,肝素化,完全混匀,立即置于冰盒中送检.本实验着重探讨血样采集过程中平卧留置针20 min后采血、血样静置2 h后离心检测及血样冰浴送检等因素对血浆E及NE浓度的影响. 相似文献
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人胰岛素原基因的包装及增殖 总被引:8,自引:1,他引:7
目的:用PA317包装细胞包装突变人胰岛素基因原质粒,并检测其增殖情况.方法:用脂质体转染法将PLXSN-MPINS质粒转染至PA317包装细胞,用G418筛选出阳性PA317包装细胞克隆并测定胰岛素原基因浓度,用TRIZOL法提取未转染和转染后PA317细胞的基因组DNA,PCR检测突变人胰岛素基因的整合情况.结果:(1)用脂质体转染法获得G418阳性PA317包装细胞克隆;(2)该细胞克隆获高滴度的胰岛素原基因浓度;(3)PCR方法在转染后PA317基因组中检测到突变人胰岛素原基因.结论:脂质体转染法是一种操作简便且行之有效的转染方法.PA317包装细胞系可成功包装突变人胰岛素原基因质粒并可获得高滴度表达,为1型糖尿病基因治疗的进一步实验研究奠定了基础. 相似文献