神经干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织Foxg1基因表达的影响

目的观察脐血源性神经干细胞（NSCs）移植对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑组织海马齿状回颗粒细胞下层(SGZ)Foxg1基因表达的影响。 方法采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,进行定向诱导培养,并通过免疫细胞化学法鉴定培养细胞表达神经干细胞表面标志。将7日龄SD大鼠150只随机分为假手术组、HIBD组和NSCs组,HIBD组和NSCs组分离并永久性结扎左侧颈总动脉,假手术组只分离不结扎左侧颈总动脉,也不进行缺氧,NSCs组于造模24 h后经大鼠尾静脉行脐血源性神经干细胞移植,3组大鼠分别于造模后第3、7、14、21、28天共5个时间点取材,每个时间点各取10只大鼠,应用原位杂交法检测各组大鼠SGZ Foxg1基因HIBD后各时间点的表达水平。 结果诱导培养的脐血间充质干细胞免疫细胞化学染色结果：诱导前,脐血间充质干细胞中Nestin、NSE、GFAP阳性细胞数较少,至诱导6 d时,Nestin、NSE、GFAP阳性细胞数均明显增多（P<0.01）,至诱导9 d时,Nestin阳性细胞数较前减少,NSE、GFAP继续增多（P<0.01）。造模3 d后,3组大鼠的Foxg1基因均有表达,HIBD组和NSCs组在造模7 d后达到高峰［分别为（131.20±2.11）和（139.52±1.98）］,此后逐渐下降,假手术组表达于造模3 d后呈逐渐降低趋势。HIBD组和NSCs组造模后各时间点Foxg1基因的表达均高于假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）;而造模7、14、21、28 d后,NSCs组Foxg1基因的表达均高于HIBD组,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论脐血间充质干细胞可定向诱导分化为神经干细胞;Foxg1基因在生后大鼠SGZ可有表达,HIBD可诱导Foxg1基因表达,NSCs移植可促进Foxg1基因表达,从而促进脑损伤后神经系统结构和功能的修复。     

PARP-1抑制剂对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨PARP-1抑制剂3-aminobenzamide(3-AB)对骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响.方法 常规培养骨肉瘤U2OS细胞,采用CCK-8法检测U2OS细胞的增殖和流式细胞术检测细胞凋亡,并用caspase-3活性测定试剂盒检测caspase-3活性和Western-blot技术检测Bcl-2、Ba...     

腰椎间盘突出症阶梯式微创治疗的临床研究

目的：探讨经皮内窥镜下腰椎间盘切除术（PELD）、后路显微内窥镜下腰椎间盘切除术（MED）及Quadrant通道下腰椎椎体间融合术（TLIF）微创系统阶梯治疗腰椎间盘突出症（LDH）的理念及临床疗效。方法：2013年10月～2016年4月通过微创手术治疗单节段不同类型腰椎间盘突出症患者169例,其中PELD组手术62例,MED组手术54例（其中2例是PELD术后复发）,Quadrant通道辅助下组手术53例（其中1例经PELD、MED术后不佳）;观察手术时间、术中出血量、下床时间、住院天数、住院费用对比分析;采用ODI评分、VAS评分及Macnab标准评估临床疗效,比较3组术中、术后指标及并发症情况。结果：所有患者均顺利完成手术,3组平均随访>15个月,手术时间、术中出血量、下床时间、住院天数、住院费用PELD组优于两组,三组之间两两比较差异具有统计学意义（P<0.05）,三组术后VAS、ODI与术前比较,均明显改善（P<0.05）;基于患者术后12个月对手术经历和疗效的问卷调查各组优良率大于91.4%,改良MacNab 标准评定各组优良率大于92.8%。术后并发症：PELD组手术有5例复发,经MED或Quadrant通道辅助下手术后治愈。结论：在严格选择手术适应症的情况下,对于单节段腰椎间盘突出患者,PELD→MED→Quadrant均有微创的特点;在临床工作中PELD治疗LDH是首选且更理想的手术方式,其经济、安全、有效、恢复快,这种阶梯式治疗方式患者更容易接受,具有一定参考意义。     

间充质干细胞应用于软骨组织工程的研究进展

[摘要]本文主要回顾了不同来源的间充质干细胞作为种子细胞的软骨组织工程学研究进展，并讨论自体软骨细胞移植技术和诱导间充质干细胞成软骨分化的软骨组织再生技术各自的优缺点，并展望其临床应用前景。     

Osteogenic differentiation of bone mesenchymal stem cells regulated by osteoblasts under EMF exposure in a co-culture system

This study examined the osteogenic effect of electromagnetic fields （EMF） under the simulated in vivo conditions. Rat bone marrow mesenchymal stem cells （BMSCs） and rat osteoblasts were co-cultured and exposed to 50 Hz, 1.0 mT EMF for different terms. Unexposed single-cultured BMSCs and osteoblasts were set as controls. Cell proliferation features of single-cultured BMSCs and osteoblasts were studied by using a cell counting kit （CCK-8）. For the co-culture system, cells in each group were randomly chosen for alkaline phosphatase （ALP） staining on the day 7. When EMF exposure lasted for 14 days, dishes in each group were randomly chosen for total RNA extraction and von Kossa staining. The mRNA expression of osteogenic markers was detected by using real-time PCR. Our study showed that short-term EMF exposure （2 h/day） could obviously promote prolifera- tion of BMSCs and osteoblasts, while long-term EMF （8 h/day） could promote osteogenic differen- tiation significantly under co-cultured conditions. Under EMF exposure, osteogenesis-related mRNA expression changed obviously in co-cultured and single-cultured cells. It was noteworthy that most osteogenic indices in osteoblasts were increased markedly after co-culture except Bmp2, which was increased gradually when ceils were exposed to EMF. Compared to other indices, the expression of Bmp2 in BMSCs was increased sharply in both single-cultured and co-cultured groups when they were exposed to EMF. The mRNA expression of Bmp2 in BMSCs was approximately four times higher in 8-h EMF group than that in the unexposed group. Our results suggest that Bmp2-mediated cellular interaction induced by EMF exposure might play an important role in the osteogenic differ- entiation of BMSCs.     

50 Hz正弦电磁场对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响

目的探讨50 Hz、1.0 mT正弦电磁场对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响。 方法将骨肉瘤MG-63细胞分成对照组和实验组,对照组放在无电磁场的培养箱中,实验组放入含有50 Hz、1.0 mT正弦电磁场的培养箱中,分别在第2天、第4天和第6天采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪测定细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测cyclin B1和cyclin D1的mRNA表达水平变化。 结果2组比较,实验组细胞增殖活性明显降低、G0-G1期细胞数目增多、cyclin B1和cyclin D1的mRNA表达水平下降。 结论50 Hz、1.0 mT正弦电磁场能够显著抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖。     

正弦电磁场对高糖环境下大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响

目的探讨正弦电磁场对高糖环境下大鼠BMSCs分化的影响,并探讨其中可能的分子机制。方法贴壁筛选法分离、培养大鼠BMSCs,将第三代细胞分为暴磁组、高糖组、高糖暴磁组及对照组。高糖组采用高糖培养基(葡萄糖浓度为15 mmol/L),电磁场组每天给予1 mT、50 Hz正弦电磁场刺激2 h。刺激21 d后采用茜素红染色、油红O染色观察各组在成骨和成脂分化上的差异,刺激7 d后Real-time PCR检测成骨/成脂相关基因Runx2、ALP、Id4、PPARγ、aP2的表达变化。结果暴磁组钙结节形成能力较对照组增强、成骨相关基因表达增高,高糖组形成脂滴能力增强、成脂相关基因表达增高,高糖暴磁组成骨和成脂基因表达均有增高,但前者更为明显。结论正弦电磁场对高糖环境下的大鼠骨髓间充质干细胞有促进成骨、间接抑制成脂分化的作用,其机制可能与通过上调关键分子Id4有关。     

电磁场防治去卵巢小鼠骨质酥松的实验研究

目的评价电磁场防治去卵巢小鼠骨质疏松的效果及作用机制。 方法将60只雌性小鼠分为正常组（A组）、模型组（B组）、电磁场防治组（C组）及尼尔雌醇防治组（D组）。除A组外其余各组均切除双侧卵巢,C组小鼠接受15 Hz、1.0 mT电磁场刺激,D组小鼠接受尼尔雌醇1.5 mg/kg体重灌胃,1次/周。实验结束前检测腰椎骨密度。分别于术后第4,8,12周进行内眦静脉丛取血,采用碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒和小鼠骨钙蛋白（BGP）酶联免疫吸附反应（ELISA）检测试剂盒检测血清ALP活性及BGP含量,并检测血清钙和雌二醇（E2）含量,于术后第6,12周末行腰椎椎体病理学切片检查,观察并分析骨小梁形态及数量的变化。 结果与B组相比,C组血清中ALP活性明显提高（P<0.05）,血清中BGP和血清钙含量增加（P<0.05）,腰椎椎体骨小梁的吸收减少。 结论15 Hz、1.0 mT的电磁场对去卵巢小鼠骨质疏松有显著的防治作用。