人胎盘组织液细菌内毒素检测方法的研究

为了降低检验成本,提高检测方法的灵敏度,拟用细菌内毒素检测法代替家兔热原检测法,采用细菌内毒素检查法对人胎盘组织液进行方法学研究。结果,3批人胎盘组织液经2－10倍稀释,用不同厂家的鲎试剂进行干扰试验,3批样品对细菌内毒素均无干扰作用。提示,可以用细菌内毒素检查法代替家兔热原检测法。     

小鼠条件性恐惧模型的建立和品系敏感性研究

目的在敏感品系上建立稳定可靠的小鼠条件性恐惧模型。方法采用给予30 s声音刺激(85 dB,5000 Hz),后2 s伴随给予不可逃避的足底电击(0.6 mA,持续2 s),声音-电击共配对5次,每次间隔2 min的方法建立小鼠条件性恐惧模型,在ICR、DBA/2(简称DBA)和C57BL/6J(简称C57)3种品系小鼠上评价场景恐惧和声音线索恐惧获得和表达的行为特点,以确定敏感品系鼠;分别于条件性恐惧训练第2,7,14,21和28天对C57小鼠场景恐惧和声音线索恐惧进行检测,以评价该品系小鼠条件性恐惧的自然消退特点;采用30 s声音+30 s间隔+10次消退训练的模式进行声音线索恐惧消退训练,并于24 h后进行消退保持测试,以评价该品系小鼠消退训练和保持的特点。结果声音-电击配对5次可成功诱导C57小鼠形成场景恐惧和声音线索恐惧,DBA小鼠可诱导形成声音线索恐惧但无法形成场景恐惧,ICR小鼠场景恐惧和声音线索恐惧均未诱导成功,确定C57小鼠为敏感品系鼠。C57小鼠呈现时间依赖的恐惧反应自然消退,其中场景恐惧在训练后第7天僵住百分率消退至(25±12)%,声音线索恐惧训练后第28天僵住百分率维持在(48±22)%;C57小鼠经10轮30 s声音消退训练,僵住时间百分率由(55±30)%消退至(32±27)%,但24 h后消退保持测试时僵住时间百分率又回升至(47±35)%。结论以敏感品系C57小鼠为研究对象,建立了恐惧获得、表达、自然消退、消退训练和消退保持各阶段恐惧行为检测的实验方法,成功建立小鼠条件性恐惧模型。     

HPLC法不同色谱柱测定苦参碱含量的比较分析

目的采用高效液相色谱法分别用C18键合硅胶柱和氨基键合硅胶柱对苦参碱原料药的含量测定进行比较。方法(1)用C18键合硅胶柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.05molL磷酸二氢钠(含磷酸2mlL)-甲醇-高氯酸(850ml∶150ml∶20g)为流动相[1];(2)用氨基硅烷键合硅胶柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-无水乙醇-1%磷酸水溶液(80∶8∶12)为流动相[2],于220nm波长处检测。结果方法1的线性范围为49.82-270.08mgL(r=0.9999),检测限为10ng,方法2的线性范围为44.64-223.2mgL(r=0.9998),检测限为10ng。结论C18键合硅胶柱和氨基键合硅胶柱均可对苦参碱原料药的含量进行质量控制,结果基本一致。     

HPLC法测定骨宝软胶囊中淫羊藿苷的含量

目的:建立骨宝软胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法。方法:高效液相色谱法,采用KromasilC18柱,甲醇-1.5%冰醋酸(55∶45)为流动相,检测波长为270nm。结果:淫羊藿苷在0.496～4.960μg线形关系良好,r=0.9999,平均回收率为(n=6)98.08%,RSD为1.20%。结论:本法简便,准确,可为骨宝软胶囊的质量控制提供依据。     

青皮对主要致龋细菌生长的影响及网络药理学分析其防龋机制

目的研究青皮提取物对6种主要致龋菌生长的影响,基于网络药理学方法探讨青皮潜在的防龋机制。方法采用液体稀释法测定6种主要致龋菌最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。基于TCMSP数据库获取青皮化学成分及其对应靶点,通过Gene Cards、OMIM数据库获取龋病靶点,将药物与疾病靶点映射得到青皮化学成分的预测靶点。构建成分-靶点调控网络及蛋白-蛋白相互作用网络,利用DAVID数据库分析预测靶点的GO富集分析,利用Kobas数据库分析预测靶点的KEGG富集分析。结果青皮提取物对变形链球菌、血链球菌、远缘链球菌、黏性放线菌、内氏放线菌和嗜酸乳杆菌MIC分别为1.0、0.5、1.0、2.0、2.0、2.0 g/L,MBC分别为2.0、1.0、2.0、4.0、4.0、4.0 g/L。网络药理学方法得到青皮化学成分12个,靶点28个,关键化学成分包括新橙皮苷、柚皮素、川陈皮素等,关键靶点包括TNF、CAT、MMP9等。KEGG富集分析得到AGE-RAGE、NF-κB等信号通路。结论青皮提取物对6种主要致龋细菌生长具有显著抑制作用,网络药理学揭示了其化学成分防治龋病的药理基础及作用机制,能为后续从青皮中开发防龋药物提供实验和理论依据。     

吡贝地尔缓释片释放度检测方法学研究

目的建立测定吡贝地尔缓释片体外释放度的方法。方法采用溶出度浆法的装置进行体外释放实验,以0.1 mol/L盐酸溶液1 000 m L释放介质,转速为50 r/min,温度为(37±0.5)℃,含量检测方法为高效液相色谱法(HPLC)。结果吡贝地尔在6.87~89.34μg/m L(r=1.000)范围内呈良好的线性关系;平均回收率为100.72%(RSD=0.6%),3批产品在2、4 h和8 h的平均累积释药量分别为32.7%、52.7%和80.0%,符合2010年版《中国药典》缓释制剂的指导原则。结论溶出度浆法检测准确、可靠、灵敏,可用于吡贝地尔缓释片释放度的测定。     

羊毛防虫蛀剂的急性毒性及刺激实验

为了研究羊毛防虫蛀剂对人的毒性及安全性,作者用小鼠进行了毒性实验。用80％乙醇溶液,在豚鼠完整皮肤及破损皮肤上进行了皮肤刺激性实验。用10％生理盐水混悬液对家兔眼结膜进行了刺激性实验。结果表明：小鼠口服羊毛防虫蛀剂的半敷致死量为9.2g/kg。对豚鼠完整皮肤及破损皮肤均无明显的刺激性,对家兔眼结膜可产生轻度刺激。研究证明：该羊毛防虫蛀剂对人体是安全的。     

经尿道前列腺等离子电切术240例围术期护理

目的探讨经尿道前列腺等离子电切术围术期的护理方法。方法对240例前列腺增生患者应用经尿道前列腺等离子电切术,并予围术期精心护理。结果本组出现膀胱痉挛48例,术后出血32例,尿路感染12例,尿道狭窄24例,尿失禁8例,无压疮、下肢静脉栓塞等严重并发症。结论加强围术期护理有利于经尿道前列腺等离子电切术患者的术后康复。     

泡状棘球蚴感染对实验性牙周炎Th_1/Th_2平衡的影响

目的探讨泡状棘球蚴感染对大鼠牙周炎Th1/Th2平衡的影响。方法 30只Wistar大鼠随机分为泡状棘球蚴感染+牙周炎造模组(棘球蚴+牙周炎组)、牙周炎造模组(牙周炎组)和正常对照组,每组10只。对照组不做任何处理,棘球蚴+牙周炎组和牙周炎组采用结扎线结扎第2磨牙颈部,于丝线上涂抹细菌混悬液,建立牙周炎模型。棘球蚴+牙周炎组建模后经皮肝脏穿刺注射泡状棘球蚴原头节感染棘球蚴。3组分别于造模前、造模后第1、3、6个月采用牙周探针记录实验牙的临床附着丧失和牙周袋探诊深度等变化情况,于造模后第6个月检测大鼠血清和龈沟液白细胞介素-4和干扰素-γ水平,并进行比较。结果棘球蚴感染6个月后,棘球蚴+牙周炎组和牙周炎组临床附着丧失[(3.47±0.48)、(4.38±0.45)mm]、牙周袋探诊深度[(3.53±0.54)、(4.68±0.47)mm]均高于对照组[(0.74±0.29)、(0.74±0.29)mm],牙周炎组高于棘球蚴+牙周炎组(P<0.05);棘球蚴感染6个月后,棘球蚴+牙周炎组和对照组大鼠血清及龈沟液白细胞介素-4水平[(209±71)、(178±56)μg/L,(353±97)、(310±86)μg/L]明显高于牙周炎组[(126±54)、(64±35)μg/L](P<0.05),干扰素-γ水平[(185±53)、(166±45)μg/L,(112±24)、(103±13)μg/L]明显低于牙周炎组[(257±60)、(202±52)μg/L](P<0.05);对照组血清及龈沟液白细胞介素-4水平高于棘球蚴+牙周炎组,干扰素-γ水平低于棘球蚴+牙周炎组(P<0.05)。结论泡状棘球蚴感染使牙周炎大鼠Th1/Th2向Th2偏移,对牙周炎有拮抗作用。     

网络药理学探索雷公藤治疗口腔扁平苔藓的药理特性和治疗机制

目的 基于网络药理学方法研究雷公藤治疗口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的主要活性成分及其潜在的药理特性和作用机制.方法 基于中药系统药理学分析平台等获取雷公藤化学成分及靶点,Gene Cards等数据库获取OLP靶点,将药物与疾病靶点进行韦恩分析,得到雷公藤治疗OLP的潜在靶点.采用Cyto...