仅采用 PCR 进行分子克隆的方法探索

目的：针对目前各种费时且易失败的克隆方法和价格昂贵的试剂盒等问题,对一种仅采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）分子克隆方法进行了探索。方法利用高保真的 DNA 聚合酶具有3＇-核酸外切酶活性的特点,采用 PCR 把载体和插入片段扩增出来,二者的扩增产物先加限制性内切酶 DpnI 后再按一定比例混合来消化甲基化的 DNA 模板,最后把DpnI 消化产物直接转化到感受态细胞来得到克隆基因。结果是一种简单、高效、可靠、且仅采用 PCR 的分子克隆方法,并利用此方法成功地把构建在载体 pET 上的α-突触核蛋白全长基因和构建在 pCDNA3.1上的乙酰胆碱受体亚基的全长基因分别重新构建在载体 pGEX-4T-1和 pGEMHE 上。结论在 PCR 扩增时能够通过引物设计来确定克隆位点,所以该方法可以把任何 DNA片段插入到质粒载体内的任何位置,而不需要考虑载体多克隆位点限制的问题。此外,该方法省去了传统的酶切消化、纯化回收和连接过程。     

全髋关节置换术患者围手术期焦虑因素分析

目的 分析全髋关节置换术患者围手术期焦虑因素.方法 采用经改进的焦虑自评量表(SAS),对78例需要进行人工全髋关节置换的患者进行2次连续性自评,时间为入院、术前,评估为焦虑症患者后,再填写一份自制的焦虑因素调查表,统计焦虑因素.结果 被测患者中66例有不同程度焦虑,各自焦虑的关注点及关注程度不同.结论 认真分析引起每位患者焦虑的相关因素,以提供有针对性的护理干预.     

应用超高分辨力小动物超声影像系统三维重建技术测量严重联合免疫缺陷小鼠卵巢体积

目的 探讨超高分辨力小动物超声影像系统三维成像技术测量严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠卵巢体积的方法及应用价值。方法 选用11只C.B17/SCID纯系雌性小鼠,应用超高分辨力小动物专用超声影像系统及45 MHz探头,以三维成像体积测量技术测量SCID小鼠卵巢的体积,将所得卵巢体积与二维成像进行比较和相关分析。结果 应用超高分辨力小动物超声影像系统获得了清晰的SCID小鼠卵巢的二维平面及三维立体图像。二维超声与三维超声测量的SCID小鼠卵巢体积分别为（5.26±0.51）mm³和（5.47±0.58）mm³（P>0.05）,二者呈高度正相关（r=0.84,P<0.05）。结论 超高分辨力小动物三维超声成像体积测量技术无创,操作简便,能够精确测量小鼠卵巢体积,可作为在体研究卵巢癌小动物模型的重要实验工具。     

生物医学大型仪器分析第二课堂探索与实践

探讨了在基础医学专业学生中开展生物医学大型仪器分析第二课堂活动,以调动学生学习的积极性,以点带面,培养学生掌握大型仪器操作的基本技能,注重动手能力、科研思维能力的培养。开设生物医学大型仪器分析第二课堂为基础医学专业的学生提供了深度接触大型仪器的机会,将理论知识转化为科研能力,为将来能利用这些大型仪器解决实际科研中遇到的问题打下基础。     

股骨近端骨巨细胞瘤不同外科术式的疗效分析

骨巨细胞瘤为具有局部侵袭性的良性肿瘤，多发于骨发育成熟的个体。现就我院从1998年1月至2008年11月采用不同术式治疗股骨颈及粗隆部骨巨细胞瘤62例疗效分析如下。