AQP5重组腺病毒载体构建及其临床作用

目的 构建AQP5的重组腺病毒载体,并验证其在干燥综合征中的治疗作用.方法 采用RT-PCR方法扩增AQP5基因,经酶切插入穿梭质粒pAdTrack-CMV,形成重组质粒pAdTrack-CMV-AQP5.经Pmel酶切线性化后与pAdeasy-1同源重组,重组质粒pAdeasy-AQP5经Pacl酶切,经脂质体转染入HEK293细胞中包装获得病毒.经过体外检测确认病毒表达后,于NOD小鼠颌下腺周注射病毒,观察其对唾液分泌量的影响.结果 经PCR和测序证实重组pAdeasy-AQP5质粒构建成功.并可见其在293细胞中表达;初步实验研究发现,其能缓解NOD小鼠的唾液腺分泌功能异常.结论 成功构建了AQP5的重组腺病毒载体,初步证实了pAdeasy-AQP5在干燥综合征中的治疗作用.     

美金刚联合奥氮平治疗老年期痴呆的临床疗效分析

目的探讨美金刚联合奥氮平对老年性痴呆患者认知功能和行为能力的改善作用及安全性。方法将35例老年性痴呆患者分为2组,对照组给予美金刚口服,试验组给予美金刚联合奥氮平口服,疗程为12周。于治疗前和治疗12周后进行简易智能量表(MMSE)、简明精神病评定量表(BPRS)及不良反应量表(TESS)的评分。结果治疗前,两组MMSE、BPRS差异均无统计学意义(均>0.05);治疗后两组MMSE、BPRS均较治疗前有所改善(均<0.01);治疗后,两组MMSE差异无统计学意义(>0.05),BPRS差异有统计学意义(<0.05)。两组治疗前后血、尿常规及肝肾功能指标均无明显变化,对照组及试验组各有1例早期出现易激,均为轻度且都自行缓解。试验组有1例嗜睡,为早期,约1周后缓解。结论美金刚联合奥氮平在改善行为和心理症状上比单一的美金刚明显,但对患者的认知功能的改善无明显差别;而不良反应无明显增加。     

胰岛素泵在高龄糖尿病患者中的疗效及安全性评价

老年人胰岛β细胞增殖能力减退、凋亡增加,β细胞老化胰岛素抵抗加重,导致高龄老年患者成为糖尿病的高发人群[1].由于口服降糖药的多种副作用、继发性失效以及消化道黏膜功能的下降及各种合并症的出现,为高龄糖尿病患者的血糖控制带来困难.因胰岛素副作用少、疗效确实而被患者所接受,胰岛素种类繁多,且给药途径及给药方式也不尽相同,疗效及安全性也各有差异[2-3].本文将近2年来因血糖控制不佳收住我院的56例高龄2型糖尿病患者为研究对象,观察应用胰岛素泵持续泵入与多次皮下注射胰岛素两种治疗方法对患者血糖变化的影响,并对比其对高龄糖尿病患者胰岛β细胞功能、胰岛素抵抗的影响.     

老年2型糖尿病患者动脉硬化与靶器官损害研究

目的分析老年2型糖尿病(T2DM)患者动脉硬化程度影响因素及其对患者心、肾等靶器官损伤程度的预测效能,为临床早期防治提供依据。方法纳入151例65岁T2DM患者,按是否合并高血压分为单纯T2DM组(73例)和T2DM合并高血压组(78例)。采集患者血液进行血生化检测并应用CKD-EPI公式估算肾小球滤过率(e GFR),同时进行肱-踝脉搏波传导速度(ba PWV)检测和心脏超声检查。采用多重线性回归模型分析ba PWV的影响因素,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析ba PWV对肾功能下降和早期左室舒张功能不全的预测效能。结果研究对象平均(75.05±10.13)岁,平均ba PWV为(1 803.85±491.04)mm/s,其中T2DM合并高血压组平均ba PWV为(2 006.49±536.70)mm/s,高于单纯T2DM组的(1 596.96±331.02)mm/s(P0.01)。多重线性回归分析结果显示,ba PWV与e GFR及二尖瓣舒张早期血流峰速(E)与舒张晚期血流峰速(A)比值(E/A)均呈负相关(β'=-0.249、-0.225,P0.05),与患高血压呈正相关(β'=2.008,P0.05)。ROC曲线分析结果显示,ba PWV对肾功能下降及早期左室舒张功能不全的预测效能AUC分别为0.695(95%CI:0.548~0.842)和0.687(95%CI:0.532~0.842)。结论老年T2DM合并高血压患者ba PWV高于单纯T2DM患者,ba PWV增快与心、肾功能损伤相关。     

miR-19a与TNF-α在口腔扁平苔藓患者中的表达情况及相关性

目的 探究口腔扁平苔藓(OLP)患者miR-19a与TNF-α的表达情况,分析二者与临床病理参数的关系,并分析二者的相关性。 方法 2015年1月-2016年1月宁波市第二医院经病理诊断为OLP患者的口腔黏膜组织标本43例作为研究组,另取同期口腔鳞状细胞癌组织标本30例和体检健康者正常口腔组织标本30例作为对照组,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织中miR-19a与TNF-α mRNA的表达情况,并分析其与口腔扁平苔藓患者临床参数的关系。 结果 与正常口腔黏膜组相比,口腔扁平苔藓组中miR-19a(t=5.912,P<0.001)和TNF-α mRNA(t=21.938,P<0.001)表达水平显著增加。与口腔鳞状细胞癌组相比,口腔扁平苔藓组miR-19a(t=3.980,P<0.001)和TNF-α mRNA(t=6.052,P<0.001)表达水平显著降低。miR-19a和TNF-α表达水平与患者年龄、性别、病程、临床表型有关(P<0.05)。在口腔扁平苔藓组织中随miR-19a表达水平的增加,TNF-α mRNA表达水平逐渐增加,二者呈正相关(r=0.495,P<0.05)。 结论 OLP患者组织中miR-19a与TNF-α mRNA表达水平显著增加,与患者年龄、性别、病程及临床表型有关,且二者呈正相关。      

绞股蓝总皂苷对口腔鳞状癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探究绞股蓝总皂苷(Gyp)对口腔鳞状细胞癌细胞系SCC9增殖和凋亡的影响,并初步探讨相关机制。 方法 用不同浓度Gyp(70、85、100 μg/ml)培养SCC9细胞系,未用Gyp处理作为对照组(Ctrl组),MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量实时PCR和蛋白免疫印迹检测细胞中Notch1和Jagged1 mRNA和蛋白表达。 结果 Gyp浓度分别为70、85、100 μg/ml时,SCC细胞增殖率分别为62.15±8.13、50.08±7.14、24.83±5.63,均显著低于Ctrl组(P<0.05);细胞凋亡率分别为23.54±2.17、37.01±3.62、60.03±7.85,均显著高于Ctrl组(P<0.05);Notch1 mRNA表达分别为2.24±0.17、2.46±0.23、2.97±0.31,蛋白表达分别为0.98±0.08、1.26±0.09、1.71±0.13,均显著高于Ctrl组(P<0.05);Jagged1 mRNA表达分别为0.94±0.11、0.51±0.09、0.26±0.06,蛋白表达分别为1.43±0.15、0.73±0.08、0.24±0.06,均显著低于Ctrl组(P<0.05);SCC9细胞荧光强度分别为65.69±11.32、113.12±15.94、163.32±19.48,均显著高于Ctrl组(P<0.05)。 结论 Gyp以剂量依赖的方式抑制OSCC细胞系SCC9的增殖并诱导其凋亡,其中Notch信号通路活化在这一过程中起重要作用。      

促红细胞生成素对高龄慢性心力衰竭并贫血患者的治疗作用

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对高龄慢性充血性心力衰竭合并贫血患者的治疗作用。方法 108例诊断为慢性充血性心力衰竭患者中合并贫血58例纳入本研究。入选患者依顺序单双号法分为对照组与治疗组,各29例。对照组常规抗心力衰竭治疗,按常规剂量应用叶酸、铁剂等补充造血原料。治疗组在对照组治疗基础上,加用EPO 6000IU/周、皮下注射,治疗4个月。结果在高龄慢性充血性心力衰竭患者中贫血的发生率高;心力衰竭越重,贫血更为常见。两组治疗前各相关临床指标比较无差异(P>0.05)。对照组治疗前后比较,射血分数增加(P<0.05),但血红蛋白、左室内径、肾小球滤过率均无改善(P<0.05);治疗组治疗后与治疗前比较血红蛋白增加、左室内径下降、射血分数增高及肾小球滤过率提高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组心脏结构与功能改善明显优于对照组。结论高龄慢性充血性心力衰竭合并贫血患者加用EPO治疗能更好地纠正贫血与改善心功能。     

老年2型糖尿病合并高血压患者肠道微生物分布与估算肾小球滤过率的关系

目的探讨老年2型糖尿病合并高血压患者肠道微生物分布与估算肾小球滤过率（eGFR）的关系。方法选取老年2型糖尿病合并高血压患者225例为研究对象,以改良的肾脏病膳食改良试验（MDRD）方程计算患者入院时的eGFR,分为eGFR降低组[＜60ml/（min·1.73m2）]63例和eGFR正常组[≥60ml/（min·1.73m2）]162例。分析并比较两组患者一般临床资料和生化检查、肠道微生物计数结果,并采用logistic回归方程分析肠道微生物与eGFR降低的关系。结果与eGFR正常组比较,eGFR降低组收缩压、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、尿酸、血肌酐、血尿素氮、白细胞计数、C反应蛋白水平均较高（均P＜0.05）;乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌计数均显著偏低（均P＜0.05）;肠杆菌、酵母菌计数显著偏多（均P＜0.05）;肠球菌计数略低,但两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。多元logistic回归方程分析显示肠杆菌、酵母菌是老年2型糖尿病合并高血压患者eGFR降低的危险因素（OR=1.456、1.278,均P＜0.05）;乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌是老年2型糖尿病合并高血压患者eGFR的保护性因素（OR=0.472、0.510、0.673,均P＜0.05）。结论2型糖尿病合并高血压患者肾功能损害发生率较高,且与肠道菌群失调密切相关(益生菌减少,致病菌增加),在治疗中应当密切关注此类患者的肠道菌群失调情况,及早干预以降低肾脏损害发生的风险。