牛生长抑素基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中克隆表达牛生长抑素基因并初步纯化。方法：根据牛生长抑素基因序列，按照大肠杆菌偏爱密码子设计合成2个DNA片段，经退火、Klenow酶补平及连接反应，获得牛生长抑素基因片段；经PCR扩增、EcoRⅠ和BarnHⅠ酶切，牛生长抑素基因被克隆在表达质粒pALEX中。结果：将重组质粒转化BL21(DE3)，经IPTG诱导获得表达。表达产物经超声破碎和GST—Sepharose 4B亲和层析纯化获得重组蛋白。结论：牛生长抑素基因得到了高水平表达并初步纯化，为表达产物的大量制备、进一步的结构功能关系及在畜牧业生产上的应用研究奠定了基础。