脑钠肽和N端脑钠肽前体在老年心力衰竭患者诊断中的价值

目的 探讨老年心力衰竭患者血浆脑钠肽（BNP）及N端脑钠肽前体（NT-proBNP）与纽约心脏病协会（NYHA）分级、左室结构及功能的关系,评价其在老年心力衰竭患者诊断中的临床价值。方法 选取老年心力衰竭患者55例（NYHA Ⅱ 15例,Ⅲ级25例,Ⅳ级15例）,老年NYHA Ⅰ级者16例设为对照组。采用电化学发光双抗体夹心法测定血浆NT-proBNP的质量浓度;免疫荧光快速测试法测定血浆BNP的质量浓度;心脏彩色多普勒超声测定左室结构和功能。结果 心力衰竭组和对照组患者的血浆NT-proBNP和BNP值均随NYHA心功能分级的递增而逐级升高（P<0.001）。所有患者的BNP和NT-proBNP质量浓度与LVEF呈负相关（P<0.001）,与LVMI、LVST、LVEDD、LAD呈正相关（P<0.05）。血浆BNP浓度诊断老年心力衰竭患者的ROC曲线下面积为0.879（P<0.001）;血浆NT-proBNP的ROC曲线下面积为0.914（P<0.001）。结论 血浆NT-proBNP和BNP均能较好地反映老年心力衰竭患者的心功能状态,对于病情评估具有一定的临床价值。     

ZW10相互作用着丝粒蛋白对神经母细胞瘤增殖的影响及机制研究

目的:探讨ZW10相互作用着丝粒蛋白(ZW10 interacting kinetochore protein, ZWINT)对神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)细胞增殖的影响及作用机制。方法:利用NB数据集分析ZWINT表达水平与NB预后及临床分期的关系。EdU实验、流式细胞术和γH2AX免疫荧光染色分别检测干扰ZWINT表达对NB细胞增殖、周期分布和DNA损伤修复能力的影响。免疫组织化学/蛋白质印记(Western blot)检测MYCN扩增和无扩增组织及细胞系中ZWINT的表达情况。荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测干扰/过表达MYCN对ZWINT表达的影响。在线预测ZWINT的启动子区域MYCN的结合位点,ChIP-PCR和荧光素酶实验验证MYCN靶向调控ZWINT表达。强力霉素诱导Tet-on MYCN SH-SY-5Y细胞过表达MYCN同时干扰ZWINT表达,检测ZWINT对MYCN介导的细胞增殖、周期和DNA损伤修复功能的影响。结果:ZWINT表达水平与NB患儿总生存率、无事件生存率呈负相关,其表达随NB分期升高而增高。ZWIN...     

人支气管上皮细胞中苯并芘诱导TNF-α表达的分子机制

目的：构建肿瘤坏死因子-α（TNF-α）启动子双荧光素酶报告基因载体,研究苯并芘（B[a]P）暴露对TNF-αm RNA表达的调控机制。方法：采用Real time-PCR技术检测B[a]P暴露下,人支气管上皮细胞（Beas-2B）中TNF-αm RNA随时间的变化趋势。通过分子克隆技术构建TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体并检测其活性。进一步检测Beas-2B细胞和人肾上皮细胞293T细胞暴露于B[a]P环境下,TNF-α启动子活性的变化趋势。结果：Real time-PCR检测B[a]P暴露下,24 h内,Beas-2B细胞中TNF-αm RNA表达量随时间延长升高。且B[a]P刺激Beas-2B细胞24 h内,TNF-α启动子活性也呈升高趋势。B[a]P刺激293T细胞,TNF-α启动子活性也会升高。结论：成功构建了TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体。而且,B[a]P能够促进TNF-αm RNA的转录从而促进TNF-αm RNA的表达,且promoter1要比promoter2活性强,没有细胞特异性。     

MYCN通过抑制NK细胞介导神经母细胞瘤细胞免疫逃逸机制研究

目的探讨MYCN对NK细胞的调控作用及其介导神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)细胞免疫逃逸机制。方法采用荧光原位杂交法(FISH)法和免疫组织化学法检测NB组织MYCN的表达情况, 流式细胞术检测外周血NK细胞数量及比例、NK细胞的活化、NK细胞表面活化受体和NB细胞表面相应配体的表达状况;干扰/过表达NB细胞系MYCN, 与分选的健康儿童NK细胞进行共培养, ELISA法检测共培养上清中细胞因子的分泌状况, 4 h乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对NB细胞的杀伤性。结果 MYCN高表达NB患儿外周血NK细胞数量(F = 45. 53, P = 0. 0002)及比例(F = 43. 93, P = 0. 0003)显著减少, MYCN可显著抑制γ-干扰素、颗粒酶B和穿孔素的释放[SK-N-BE (2):t = 9. 10, P = 0. 0008;t = 4. 76, P = 0. 0089;t = 4. 66, P = 0. 0096;SH-SY-5Y:t = 16. 79, P < 0. 0001;t = 35. 85, P < 0. 0001;...     

脑钠肽和N端脑钠肽前体在老年心力衰竭患者诊断中的价值

目的 探讨老年心力衰竭患者血浆脑钠肽(BNP)及N端脑钠肽前体(NT-proBNP)与纽约心脏病协会(NYHA)分级、左室结构及功能的关系,评价其在老年心力衰竭患者诊断中的临床价值.方法 选取老年心力衰竭患者55例(NYHA Ⅱ 15例,Ⅲ级25例,Ⅳ级15例),老年NYHA Ⅰ级者16例设为对照组.采用电化学发光双抗体夹心法测定血浆NT-proBNP的质量浓度;免疫荧光快速测试法测定血浆BNP的质量浓度;心脏彩色多普勒超声测定左室结构和功能.结果 心力衰竭组和对照组患者的血浆NT-proBNP和BNP值均随NYHA心功能分级的递增而逐级升高(P<0.001).所有患者的BNP和NT-proBNP质量浓度与LVEF呈负相关(P<0.001),与LVMI、LVST、LVEDD、LAD呈正相关(P<0.05).血浆BNP浓度诊断老年心力衰竭患者的ROC曲线下面积为0.879(P<0.001);血浆NT-proBNP的ROC曲线下面积为0.914(P<0.001).结论 血浆NT-proBNP和BNP均能较好地反映老年心力衰竭患者的心功能状态,对于病情评估具有一定的临床价值.     

幽门螺杆菌尿素酶B通过与TLR2结合负向调控巨噬细胞免疫功能

目的:尿素酶B(UreB)是幽门螺杆菌疫苗设计的重点候选抗原,本研究拟探究UreB对巨噬细胞的免疫调控作用及潜在机制。方法:用重组UreB蛋白刺激小鼠骨髓来源M0型巨噬细胞,经流式细胞术和ELISA检测巨噬细胞凋亡、极化和抗原提呈分子表达;共培养试验、CFSE和流式细胞术检测CD4 +T细胞增殖及IFN-γ...     

高龄心衰患者血浆N端脑钠肽前体测定的价值

目的探讨高龄心力衰竭患者N端脑钠肽前体（NT—proBNP）与NYHA心功能分级,左室结构、功能的关系;观察治疗前后NT-proBNP水平的动态变化;评价NT-proBNP在高龄心衰患者病情评估中的临床价值。方法选取仁济医院住院治疗的高龄心力衰竭患者49例,13例健康高龄老人纳入对照组,按照纽约心脏病协会（NYHA）对心衰患者进行分级。在治疗前及治疗后两周检测血浆NT—proBNP的浓度;应用心脏彩色多普勒超声诊断仪测定左室结构、功能。结果高龄心衰组患者血浆NT-proBNP值高于健康对照组（P〈0．001）,且随NYHA的心功能分级增高而逐渐升高（P〈0．001）。患者NT—proBNP水平与LVEF呈负相关（P〈0．001）,与LVMI、LVST呈正相关（P〈0．05）。多元回归分析结果显示,NT-proBNP水平与NYHA心功能分级、LVEF、LVMI值相关,与性别、年龄、基础疾病史无相关性。NYHAⅢ级及Ⅳ级心衰患者在治疗前后血浆NT—proBNP水平差异有显著统计学意义（P〈O．05）结论血浆NT—proBNP能较好地反映高龄心力衰竭患者心功能状态,是评估左室功能的客观生化指标,可用于疗效评价的参考。     

人支气管上皮细胞中苯并芘诱导TNF-α表达的分子机制

目的：构建肿瘤坏死因子-α（TNF-α）启动子双荧光素酶报告基因载体,研究苯并芘（B[a]P）暴露对TNF-α mRNA表达的调控机制。方法：采用Real time-PCR技术检测B[a]P暴露下,人支气管上皮细胞（Beas-2B）中TNF-α mRNA随时间的变化趋势。通过分子克隆技术构建TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体并检测其活性。进一步检测Beas-2B细胞和人肾上皮细胞293T细胞暴露于B[a]P环境下,TNF-α启动子活性的变化趋势。结果：Real time-PCR检测B[a]P暴露下,24 h内,Beas-2B细胞中TNF-α mRNA表达量随时间延长升高。且B[a]P刺激Beas-2B细胞24 h内,TNF-α启动子活性也呈升高趋势。B[a]P刺激293T细胞,TNF-α启动子活性也会升高。结论：成功构建了TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体。而且,B[a]P能够促进TNF-α mRNA的转录从而促进TNF-α mRNA的表达,且promoter1要比promoter2活性强,没有细胞特异性。