中医超声药透电疗仪改善脑缺血大鼠炎症反应的实验研究

目的观察中医超声药透电疗仪对脑缺血大鼠炎症反应的影响, 为中医超声药透电疗仪治疗脑缺血的临床应用提供实验依据。方法将72只SD大鼠按随机分组法分为假手术组12只和造模组60只, 造模组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、中药片组、空白片+中医超声药透电疗仪组(以下简称"空白片+电疗组")、中药片+中医超声药透电疗仪组(以下简称"中药片+电疗组")、丁苯酞组, 每组12只。连续给予相应干预7 d后, 进行神经功能评分;TTC染色观察脑梗死体积, 并计算脑梗死体积;HE染色观察各组大鼠皮质区细胞形态;采用ELISA法检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平;采用Western blot法检测各组大鼠梗死侧海马组织TLR4、髓样分化因子(MyD88)、NF-κBp65蛋白表达情况。结果与模型组比较, 空白片+电疗组、中药片+电疗组、丁苯酞组神经功能评分均降低(P<0.05), 脑梗死体积降低(P<0.05), 血清TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05), 海马组织TLR4[(0.42±0.07)、(0.31±0.0...     

基于HIF-1α/NLRP3途径介导细胞焦亡探讨《古今录验》续命汤治疗缺血性卒中的机制

目的 研究《古今录验》续命汤通过缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）途径调控缺血性卒中（IS）细胞焦亡的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、续命汤低剂量组、续命汤高剂量组和二甲双胍组,每组20只,连续灌胃3 d取材。采用高通量测序筛选差异信使RNA（mRNA）,对关键差异基因行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析;改良神经功能评分（mNSS）法、2,3,5-氯化三苯四氮唑（TTC）染色评价脑梗死损伤效应;苏木素-伊红（HE）染色进行脑组织病理形态学观察;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测缺血侧脑皮质区白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平比较;荧光双标染色检测HIF-1α、NLRP3共定位情况;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测NLRP3、HIF-1α、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、消皮素D（GSDMD）mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法检测HIF-1α、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达情况。结果 mRNA测序共得到5 705个（下调2 733个,上调2 972个）差异基因,经同源基因转化后,与焦亡基因集取交集,获得95个关键差异焦亡基因。与假手术组比较,模型组的mNSS评分、脑梗死面积显著增大（P<0.01）,神经元形态多样、排列错乱、细胞间隙增宽,缺血侧皮质区IL-1β、IL-18的含量显著增高（P<0.01）,共定位荧光强度明显增强,HIF-1α、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白的表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,续命汤高剂量组改善大鼠神经功能评分、脑梗死面积最显著（P<0.01）;各药物组神经元较完整、排列较整齐、细胞间隙变窄,共定位荧光强度明显降低;续命汤能够降低IL-1β、IL-18的含量及HIF-1α、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白的表达（P<0.05,P<0.01）,尤以高剂量组最明显（P<0.01）。结论 《古今录验》续命汤能够抑制IS后细胞焦亡,促进神经功能恢复,可能与抑制HIF-1α/NLRP3途径有关。     

《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑损伤及血管新生的影响

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组：假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型成功建立后,各组大鼠每天分别灌胃给予蒸馏水,续命汤5.13、10.26、20.52 g·kg^-1药液、丁苯酞混悬液(0.06 g·kg^-1)。连续干预7 d后,进行末次神经功能评分,处死所有大鼠,采集脑组织样本。通过神经功能评分和2,3,5-氯化三苯基四氮染色评估脑缺血损伤程度;苏木素-伊红染色观察脑组织病理学形态改变;透射电子显微镜观察缺血半暗区皮层脑组织神经元和微血管内皮细胞(endothelial cells, ECs)超微结构;免疫荧光检测缺血半暗区皮层脑组织血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)和造血祖细胞抗原CD34(hematopoietic progenitor cell antigen CD34, CD34)的蛋白表达情况;实时荧光定...     

痴呆荣气虚滞病机源流探讨

痴呆病荣气虚滞的特点包括荣气虚与荣气滞两个方面。荣气虚则五脏虚弱,脑络失养,髓减脑消;荣气滞则五脏功能失调,脑络不通,脑髓不充,最终导致神机失用。荣气虚与荣气滞互结为害,缠绵搏结,形成虚、痰、浊、瘀、滞的恶性循环,最终脑髓空虚,脑失滋养,神机失用,五神失司,灵机记性减退以至丧失而致痴呆的发生。先秦及秦汉时期,该病多描述为"善忘""言喜忘",多由五脏虚衰、髓海不足、气血逆乱及瘀血内停等导致。荣气虚滞之证正是渊薮于此,肺气虚衰,精髓疲乏,五脏生化乏源,精明之府失于濡养,或情志失调,肝气郁滞,疏泄失司,气血逆乱,血蓄不行等,即为荣气虚滞之具体化表现。晋隋唐时期,医家们对痴呆病的认识,多从心论,称痴呆为多忘、善忘等,认为其多忘、善忘者与心相关。心主神志。心气虚衰,血脉不充,脑脉失养,脑髓不用,神气难以外显,日渐发展而成多忘。宋金元时期,医家们继承了前人对心主神志、心气虚易致痴呆健忘之外,创新性地提出了心脾两虚亦是健忘发生的重要原因,同时比较重视老年人的食治摄养。明代医家对痴呆病机的认识是以"虚、闭、瘀"为主。至清代,医家不仅继承了明代时期的"虚、闭、瘀"理论,也观察到了"火、痰"在痴呆发病过程中的重要性,认为痴呆的病因病机与"虚、火、痰"关系密切。明清医家提出了脑主神机记忆的理论,同时总结脑作为元神之府在"虚、闭、瘀、火"等病理因素影响下出现的善忘癫狂等病证。近现代医家们对痴呆病的认识从五脏虚损、痰浊瘀血、虚实夹杂、毒损脑络等逐渐演化到荣气虚滞,为中医病因病机学的发展提供了新的思路。     

基于GPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路探讨左归降糖通脉方对糖尿病大鼠血管内皮炎性保护的影响

目的 研究左归降糖通脉方对2型糖尿病（T2DM）大鼠血管内皮功能障碍的影响与作用机制。方法 高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法制备模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归降糖通脉方低剂量（12 g/kg,ZJTF-L）组、左归降糖通脉方高剂量（24 g/kg,ZJTF-H）组、二甲双胍+阿托伐他汀（150 mg/kg+10 mg/kg、西药联用）组、短链脂肪酸（500 mg/kg,SCFAs）组,每组10只。干预结束后,采用透射电镜观察大鼠颈动脉超微结构变化;ELISA检测血清胰岛素（FINS）、糖化血红蛋白 （HbAlc）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子1（VCAM-1）、内皮素1（ET-1）、 白细胞介素-1 β（IL-1 β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平;生化分析法检测血清一氧化氮（NO）的含量;分别采用Western Blot、qPCR检测G蛋白偶联受体43（GPR43）、β-抑制蛋白2（β-arrestin-2）、核因子κB抑制因子α（IκBα）、核因子κB p65（NF-κBp65）的蛋白表达与mRNA水平。结果 与空白组比较,模型组体重下降,血糖显著升高（P<0.01）;HbA1 c、FINS、IL-1 β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1及ET-1水平明显升高,NO明显降低（P<0.01）;内皮细胞肿胀,胞核皱缩,细胞形状不清晰;颈动脉GPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平显著降低（P<0.05,P<0.01）,β-arrestin-2、NF-κBp65蛋白表达与mRNA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,药物干预各组体重升高、血糖下降（P<0.01）;炎症因子、血管内皮功能各项指标均有所好转（P<0.05,P<0.01）。ZJTF-H组颈动脉部分内皮脱落,胞核形状较规则;GPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平明显升高（P<0.05,P<0.01）;β-arrestin-2、NF-κBp65蛋白表达与mRNA水平明显下降（P<0.01）。结论 左归降糖通脉方可改善 T2DM 大鼠血管内皮功能障碍,其机制可能与调节GPR43 /β-arrestin-2/IκBα/NF-κB信号通路有关。     

基于“态靶理论-调节肠道菌群”探讨中医药防治2型糖尿病的新策略

2型糖尿病(T2DM)现已成为世界公共卫生负担之一。目前研究发现肠道菌群在T2DM发生发展过程中起到关键作用。态靶理论是中医学与现代分子生物学技术相结合的产物。本文系统讨论了态靶理论、肠道菌群失调与T2DM形成的相关性，并认为通过靶向调节肠道致病菌及其代谢产物，恢复有益菌群，可以达到中西医结合防治T2DM的目的。     

基于瘀毒致风理论探讨中性粒细胞NETosis在缺血性卒中的作用

缺血性卒中(IS)具有高发病率、高致残率、高死亡率的特点，中性粒细胞发生NETosis后，形成的中性粒细胞胞外陷阱(NETs)可能是缺血性中风损伤的主要介质，与血栓形成、炎症反应、血脑屏障破坏密切相关，影响该病的临床预后。瘀毒致风理论是缺血性中风的主要病因，与NETosis存在关联性。本文从中医理论出发，深入探讨中性粒细胞NETosis机制，以揭示在瘀毒论治指导下缺血性中风的微观本质，期望能够为IS的临床防治提供新的方法和思路。