自制小背心预防颈内静脉置管胶布过敏的临床效果评价

目的 解决维持性血液透析永久性颈内静脉置管患者的皮肤胶布过敏问题.方法 将本透析中心永久性颈内静脉置管患者按置管固定方法分为医用纳米胶布固定组72例次和自制小背心固定组192例次.观察透析期间2组皮肤过敏情况.结果 医用纳米胶布固定组患者的皮肤过敏率显著高于自制小背心固定组.结论 自制小背心能有效预防永久性颈内静脉置管患者的皮肤胶布过敏,是一种既经济实惠,又经久耐用的理想的固定方法.     

脑卒中患者血清同型半胱氨酸、血脂及CRP的临床观察

同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是一种人体内的含硫氨基酸,为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物,其本身并不参与蛋白质的合成,可能是动脉粥样硬化等心血管疾病发病的一个独立危险因子。研究发现,Hcy浓度[1]与脑血管病的风险程度与并发症呈正相关,Hcy可作为预测心脑血管疾病发生和发展的一项重要临床指标。本文测定82     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因分布情况及其同源性探讨

目的：了解对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯杆菌（CR-KP）中碳青霉烯酶的主要类型及流行情况。方法：收集我院2016 年1月至2017年12月对厄他培南、亚胺培南或美罗培南药敏试验结果不敏感的CR-KP共34 株,根据CLSI M100S-27th文件的改良碳青霉烯灭活试验确证其是否为产酶菌株,通过PCR方法扩增5种碳青霉烯酶基因（bla KPC、bla IMP、bla OXA-48、bla VIM、bla NDM）,PCR扩增产物进行测序明确基因型;通过脉冲场凝胶电泳对肺炎克雷伯菌进行同源性分析。结果：34株肺炎克雷伯菌经改良碳青霉烯灭活试验确证均为产酶菌株,PCR检测显示均为KPC-2型酶。脉冲场凝胶电泳（PFGE）结果显示34株菌可分为5组,其中1、2、4组为主要流行菌株。结论：院内存在以KPC-2为主要耐药基因的CR-KP克隆株的流行,且主要以重症医学科耐药株流行,34株菌间存在不同程度的亲缘关系。     

妊娠期血清脂肪因子与生化指标联合监测对妊娠期糖尿病的临床意义

目的分析妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清脂肪因子及一般生化指标水平的异常变化,研究其联合监测对GDM的临床意义。方法纳入该院GDM孕妇50例,正常孕妇50例,正常健康对照组50例,对孕妇组进行孕中期和孕晚期空腹血糖、空腹胰岛素(insulin,ins)、血清胆固醇(cholesterol,CHOL)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、甘丙肽(galanin,GAL)、脂联素(adiponectin,APN)的水平监测,同时监测正常对照组相关指标。结果孕中期,正常对照组GAL水平低于正常孕妇组,GDM组的空腹血糖、HOMA-IR、TG和GAL水平显著高于正常对照组。孕晚期,正常对照组血清HDL、LDL、GAL水平显著低于正常孕妇组,APN水平高于正常孕妇组,GDM组空腹INS、HOMA-IR、HDL和GAL水平显著高于正常对照组,APN水平明显低于正常对照组。孕中期GDM组空腹血糖、HOMA-IR、TG和GAL水平显著高于正常孕妇组,孕晚期空腹血糖和GAL水平差异具有统计学意义。孕中期GAL与空腹血糖、空腹ins、HOMA-IR、TG呈正相关,孕中期APN与空腹血糖、空腹ins、HOMA-IR、TG和LDL呈负相关。孕晚期GAL与空腹血糖、空腹ins、HOMA-IR、TG、LDL呈正相关,孕晚期APN与空腹血糖、空腹ins、HOMA-IR和LDL呈负相关。结论 GDM与血清脂肪因子水平呈密切相关,血清脂肪因子联合一般生化指标监测对GDM的发生和发展的预测和评估具有重要意义。     

原发性肝癌患者外周血CD39~+,CD73~+调节性T细胞和自然杀伤(NK)细胞的表达及其与肝损伤的相关性

目的分析原发性肝癌(HCC)患者CD39~+和CD73~+调节性T细胞(Treg)表达水平,及其与肝损伤的相关性。方法采用流式细胞术检测220例HCC患者(HCC组)、100例慢性乙肝患者(CHB组)和100例健康体检者(C组)外周血CD4~+Treg细胞中CD39~+,CD73~+,自然杀伤(NK)细胞的表达,比较分析其与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝损伤指标的关系。结果与C组比较,CHB组、HCC组外周血CD4~+Treg细胞中CD39~+[(11.21±1.57),(15.44±2.42)vs(8.14±1.25)]%,CD73~+[(13.86±3.61),(19.52±4.57)vs(10.31±2.56)]%细胞比例明显升高,而NK[(20.13±2.77),(17.05±2.40)vs(24.15±3.65)]%细胞比例明显下降(F=663.61,255.18,182.26,均P0.001)。与CHB组比较,HCC组外周血CD4~+Treg细胞中CD39~+,CD73~+细胞比例明显升高,而NK细胞比例明显下降(P0.001)。并发肝损伤的肝癌患者外周血CD4~+Treg细胞中CD39~+[(17.16±2.54)vs(14.23±2.30)]%,CD73~+[(20.21±4.78)vs(18.04±3.29)]%细胞比例明显高于无肝损伤的肝癌患者,而NK[(15.57±2.31)vs (19.13±2.73)]%细胞比例则明显降低,差异均有统计学意义(F=8.89,3.99,10.09,均P0.001)。CD39~+,CD73~+与NK细胞呈显著负相关(r=-0.452,-0.424,均P0.05)。AST,ALT与CD39~+,CD73~+细胞比例呈显著正相关(r=0.342,0.377,P0.05),与NK细胞比例呈显著负相关(r=-0.352,P0.05)。结论 HCC患者外周血CD39~+,CD73~+Treg表达水平明显升高,且与肝损伤密切相关。阻断CD39~+,CD73~+的表达可能有望成为抗肿瘤免疫治疗的一种安全有效的途径。     

叶景华益肾清利经验方治疗肾虚湿热型少弱精子不育症临床研究

目的:观察叶景华益肾清利经验方治疗肾虚湿热型少弱精子不育症的临床疗效。方法:将90例患者随机分为2组,治疗组45例采用叶景华益肾清利经验方治疗,对照组45例口服中成药五子衍宗丸治疗。治疗后对患者进行综合疗效评价,观察有无妊娠、检查精液质量和血清性激素。结果:2组临床疗效经Ridit分析,差异有显著性意义(P0.05)。治疗后治疗组精子密度、精子成活率、精子活动力(a),精子活动力(a+b)均较治疗前明显改善(P0.05);且精子密度改善较对照组更显著(P0.05)。治疗后对照组精子密度、精子成活率、精子活动力(b),精子活动力(a+b)均较治疗前明显改善(P0.05)。治疗后2组血清睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)均较治疗前明显改善(P0.05);且治疗组血清T较对照组改善更显著(P0.05)。结论:叶景华益肾清利经验方治疗肾虚湿热型少弱精子不育症有较好的临床疗效。     

自建两轮PCR法对低载量HBV DNA S区基因的扩增及实验条件优化

目的 探究低载量HBV DNA S区基因扩增的可行性并对实验条件进行优化,为隐匿性HBV感染(OBI)患者HBV DNA S区基因突变检测提供依据.方法 采用传统巢式PCR和自建两轮PCR方法扩增6例低HBV DNA载量(100～200 IU/mL)和22例更低HBV DNA载量(20～99 IU/mL)的血清样本中HBV DNA S区基因,并对引物序列、引物量、PCR产物模板稀释倍数、退火温度、PCR反应循环数、PCR总反应体系等条件进行优化.PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,切割目的条带凝胶进行克隆测序,然后对克隆测序结果进行核酸序列BLAST比对确认.结果 设计3对巢式PCR引物(P1～P3),扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因.经过PCR扩增条件优化后,6例低HBV DNA载量的血清样本中仅2例经巢式PCR扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,22例更低HBV DNA载量样本无一例扩增成功.自建两轮PCR法设计了P4～P15共12对引物,扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因.经过PCR扩增条件优化并筛选出P13为最佳引物后,6例低HBV DNA载量的血清样本全部扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列;15例(15/22,68.18％)更低HBV DNA载量的样本扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,经PCR产物克隆测序均证实为HBV DNA S区基因,该15例样本中HBV DNA载量最低为20.1 IU/mL.结论 基于引物P13自建的两轮PCR法更适用于低载量HBV DNA S区基因的扩增,扩增效率和特异性均优于传统巢式PCR;扩增产物可进一步应用于OBI者HBV DNA S区基因序列突变分析.     

HPLC波长切换法同时测定参茸固本片中7个成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC波长切换法同时测定参茸固本片中7个成分含量的方法。 方法: 采用Waters Sunfire C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,柱温30 ℃,以乙腈 0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.9 ml·min-1, 检测波长分别为330 nm（毛蕊花糖苷、马替诺皂苷）、230 nm（芍药内酯苷、芍药苷）和203 nm（人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1）。 结果:毛蕊花糖苷、马替诺皂苷、芍药内酯苷、芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1 质量浓度分别在6.38～159.50 μg·ml-1（r=0.999 3）、3.19～79.75 μg·ml-1（r=0.999 9）、4.37～109.25 μg·ml-1（r=0.999 5）、14.26～356.50 μg·ml-1（r=0.999 4）、1.95～48.75 μg·ml-1（r=0.999 8）、2.21～55.25 μg·ml-1（r=0.999 7）、2.09～52.25 μg·ml-1（r=0.999 1）范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率（RSD）分别为98.24%（1.11%）、97.64%（1.43%）、99.23%（0.80%）、100.13%（0.65%）、96.99%（1.56%）、98.10%（1.24%）和97.75%（1.37%）。结论:本文所建立的方法实现了同时测定参茸固本片中毛蕊花糖苷、马替诺皂苷、芍药内酯苷、芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量,可用于参茸固本片的质量控制。     

自建微阵列化学发光免疫分析法定量检测心肌肌钙蛋白I自身抗体及其初步临床应用

目的基于微阵列蛋白质芯片技术建立定量检测心肌肌钙蛋白I自身抗体(cTnIAAb)的微阵列化学发光免疫分析法,并评价该方法的检测性能。方法以心肌肌钙蛋白I(cTnI)-C融合蛋白为检测抗原,对抗原点样浓度、封闭液、封闭时间和二抗进行筛选,以检测结果信噪比最大为标准优化条件。以100名健康体检者(正常对照组)cTnIAAb检测灰度值的第95百分位数为临界值,建立cTnIAAb检测的标准曲线,并评价微阵列化学发光免疫分析法的检测性能(稳定性、精密度、最低检测限、线性范围等)。采用微阵列化学发光免疫分析法检测500例血清cTnI>0.1 ng/mL的急性冠状动脉综合征(ACS)患者(ACS组)的血清cTnIAAb,采用免疫印迹法验证其特异性。结果最优实验条件:抗原点样浓度为50μg/mL,封闭液为2%人乳,最佳封闭时间为12 h,二抗为辣根过氧化物酶(HRP)-羊抗人IgG抗体。微阵列化学发光免疫分析法检测高、低值cTnIAAb的精密度良好,变异系数(CV)均<15%;空白限(Lo B)、检测限(LoD)分别为0.12、0.23 AU/mL;线性范围为0.23~815.00 AU/mL。免疫印迹法结果显示,cTnIAAb阳性样本和阳性对照在相对分子质量40000~55000处均出现特异性条带。ACS组血清cTnIAAb阳性率为8.4%(42/500),明显高于正常对照组[2%(2/100)](χ²=5.023,P<0.05);但血清cTnIAAb浓度2个组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示,ACS组cTnIAAb与cTnI无相关性(r²=0.1,P>0.05)。结论自建的定量检测cTnIAAb的微阵列化学发光免疫分析法具有良好的检测性能,可为cTnIAAb的临床应用提供较好的方法学基础。