柱后衍生化 -HPLC 法测定硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量

目的 新建硫酸卡那霉素注射液及滴眼液含量的高效液相色谱 - 柱后衍生化 - 荧光检测方法。方法 色谱柱为 Zorbax Eclipse Plus C18 (4.6mm×100mm, 3.5μm);流动相为 pH3.4 的缓冲液 ( 取庚烷磺酸钠一水合物 4.35g 和无水硫酸钠 16g,加水 溶解并稀释至成 1000mL,用冰醋酸调节 pH 值至 3.4±0.1)- 甲醇 (74:26);柱温为 35℃;流速为 1mL/min。柱后衍生化试液为邻苯 二甲醛溶液;流速为 0.3mL/min;衍生化反应温度为 45℃;荧光激发波长为 340nm,发射波长为 455nm。结果 卡那霉素 A 在 0.0973~583.8μg/mL 浓度范围内线性关系良好 (r=0.9999),硫酸卡那霉素注射液和滴眼液的平均回收率分别为 99.6% 和 99.3%, RSD 为 0.63% 和 0.66%(n=9)。结论 本方法检测灵敏度高,重复性好,简便快速,结果准确可靠,可作为硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量测定方法。     

采用HPLC-PED法测定硫酸小诺米星及其注射液有关物质和组分的探讨

目的 新建硫酸小诺米星及其注射液有关物质和组分检查的HPLC-脉冲安培电化学检测(PED)法,并探讨其用于评价硫酸小诺米星及其注射液质量的合理性。方法 色谱柱为Welch Ultimate LP-C₁₈(3.9 mm×300 mm,5μm);以1.5%三氟醋酸溶液(用50%氢氧化钠溶液调节pH值至2.6)-乙腈(98:2, V/V)为流动相,脉冲安培电化学检测器检测,金电极为工作电极,四电位波形工作模式,柱后加0.5 mol/L NaOH溶液,流速0.4 mL/min。结果 新建的电化学检测法可实现小诺米星相关杂质和小诺米星组分的准确定量,灵敏度是蒸发光散射检测法(ELSD)的近40倍,对于国产硫酸小诺米星及其注射液质量控制具有重要作用。结论HPLC-PED法灵敏度高,重复性好,可替代或和现有蒸发光散射法联合作为硫酸小诺米星及其注射液有关物质和组分检查的分析方法。     

核磁共振氢谱法(~1H-NMR)测定西他沙星标准物质的含量

目的建立核磁共振氢谱法测定西他沙星标准物质的绝对含量。方法采用Bruker AVANCE-500型和AVANCE-300型仪器,分别以盐酸吉西他滨和齐多夫定为内标,西他沙星中质子信号在δ8.69,δ7.76,δ3.43和δ3.14,盐酸吉西他滨质子信号在δ8.12,δ6.21和δ6.02,齐多夫定中质子信号在δ7.61和δ6.01作为定量峰,0.5 mL DMSO-d6∶氚代盐酸(DCl,44.8mg·L-1)=4∶1为溶剂,测定条件为:探头温度303K,谱宽11.0,中心频率4.9,脉冲序列为zg 30°,延迟时间20s,采样次数32次,窗函数0.3Hz。结果在此条件下,样品与内标盐酸吉西他滨及齐多夫定的定量峰分离良好,进样精密度及重复性较好,线性范围宽,样品与内标盐酸吉西他滨和齐多夫定质量比分别在0.354 9~1.343 9和0.312 4~1.189 2范围内,其线性拟合方程分别为:Y=1.440 9X+0.017 8(r=1.000 0,n=5),Y=1.634 6X+0.008 5(r=0.999 9,n=5)。结果西他沙星的含量分别为99.26%(RSD为0.06%)和99.22%(RSD为0.17%)。结论该方法准确、专属、简便、快速,适用于该药物标准物质的绝对含量测定。     

核磁共振法测定10-O-(N,N-二甲氨基乙基)-银杏内酯B甲磺酸盐标准物质的含量

建立核磁共振氢谱法测定10-O-(N,N-二甲氨基乙基)-银杏内酯B甲磺酸盐(XQ-1H)标准物质的含量。以齐多夫定为内标,DMSO-d6-D2O(5∶1)为溶剂,氢谱测定条件为:脉冲宽度30°,延迟时间20 s,采样次数32次,窗函数0.3 Hz。在此条件下,样品与内标的定量峰分离良好,线性范围宽,含量测定结果为99.12%,RSD为0.16%。该方法专属、准确,简便、快速,适用于对药物基准物质绝对含量的测定。     

HPLC-MS/MS法分离孟鲁司特顺式异构体及人血浆中孟鲁司特浓度的测定

目的建立高效液相色谱-质谱联用方法实现孟鲁司特原形药物与其顺式异构体的快速分离,并测定人血浆中孟鲁司特原形药物的浓度。方法采用菲罗门Luna Phenyl-Hexyl(5μm,4.6×250mm)色谱柱;柱温25℃;流动相为乙腈-甲醇-水-甲酸(58∶20∶22∶0.2);流速为1.4mL/min-1;通过液相色谱串联质谱,电喷雾离子源(ESI+),以选择反应监测(SRM)方式进行检测;检测离子为孟鲁司特m/z 585.9[M+H]+→421.9[M+H]+,那格列奈(内标)m/z 318.1[M+H]+→166.0[M+H]+。结果孟鲁司特的最低定量限为1.846ng/mL,线性范围为1.846～1107.6ng/mL。结论该方法简便、灵敏度高,可以用来进行孟鲁司特人体药动学和生物等效性的研究。     

硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的质量评价

目的 评价国内不同厂家生产的硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的质量现状及存在问题。方法 按照国家评价性抽验计划总体要求,采用法定检验方法结合探索性研究进行样品研究,统计分析检验结果。结果 按照法定标准检验抽取的112批次样品,不合格率1.8%,不合格项目为装量、渗透压摩尔浓度和可见异物。标准检验发现现行标准不统一,存在限度不合理、安全性项目(有关物质、防腐剂)缺失问题。探索性研究新建了完善的杂质谱分析方法,对主要杂质的来源与结构进行了确证;新建了滴眼液中防腐剂检查方法和氯离子、硫酸根离子及硫代硫酸根离子的含量测定方法。结论 目前国产硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的产品质量基本能符合现行标准要求,而探索性研究提示现行标准存在缺陷,不能全面反映产品的质量,需进一步完善,以保证药物的安全和有效;建议企业对原料工艺进行优选,以提高产品质量。     

柱后衍生化-HPLC法检测硫酸新霉素的有关物质

目的 建立硫酸新霉素有关物质检查的柱后衍生化-HPLC-荧光检测法，并与新建的HPLC-电化学检测法进行比较。方法 色谱柱为COSMOSIL 5C18-PAQ(4.6mm×250mm, 3.5μm)；以pH3.4缓冲液[取庚烷磺酸钠一水合物4.35g和无水硫酸钠16g，加水溶解并稀释至1000mL，用冰醋酸调节pH值至(3.4±0.1)]-乙腈(95:5)为流动相A，pH3.4缓冲液-乙腈(60:40)为流动相B；梯度洗脱；柱温为30℃；流速为1.0mL/min。柱后衍生化试液为邻苯二甲醛溶液[pH值为(10.4±0.1)]；流速为0.3mL/min。电化学检测法采用脉冲安培检测器，金电极为工作电极，四电位波形工作模式。结果 柱后衍生化法与电化学检测法均检出24个杂质。柱后衍生化法的检测限和定量限分别为1.1和3.5ng。结论 柱后衍生化-HPLC法操作简便，灵敏度高，重复性好，可作为硫酸新霉素有关物质检查的常规方法。     

氨基糖苷类抗菌药物分析方法的思考及展望

摘 要对氨基糖苷类抗菌药物现行有关物质及含量的分析方法进行综述。介绍高效液相色谱蒸发光散射检测法（HPLC ELSD）,高效液相色谱脉冲安培电化学（HPLC PAD）等方法在中国药典,美国药典和欧洲药典氨基糖苷类抗菌药物有关物质及含量测定中的使用情况;介绍柱后衍生化方法在检测氨基糖苷类抗菌药物方面应用的特点,并将以上三种方法进行了比较,同时对氨基糖苷类抗菌药物的分析方法发展趋势进行展望。     

胆酸中有关物质的分离及结构鉴定

胆酸是以牛或羊的胆汁、胆膏为原料经皂化、酸化和精制而成,主要用于配制人工牛黄、体外培育牛黄以及复方制剂清开灵口服液和注射液.从胆酸原药中分离得到两个结构未知的有关物质,采用核磁共振一维谱(1H NMR、13C NMR、DEPT谱)、二维谱(1H-1H COSY、HSQC、HMBC)及高分辨质谱(HRMS)研究其结构,分别为3α,12α-二羟基-7-氧代胆烷酸和3α,7α-二羟基-12-氧代胆烷酸,并对它们的1H NMR和13C NMR信号给予相应归属.