石上柏的化学成分研究

目的:研究石上柏的化学成分。方法:通过硅胶柱层析、Sephadex LH-20色谱等方法分离,经过理化常数测定及UV、IR、~1HNMR、~(13)CNMR、El-MS等波谱技术分析鉴定化合物结构。结果:分离得到3个双黄酮类化合物,2个甾醇类化合物和5个有机酸类化合物,分别鉴定为硬脂酸(I)、棕榈酸(Ⅱ)、豆甾醇(Ⅲ)、谷甾醇(IV)、扁柏双黄酮(V)、穗花杉双黄酮(Ⅵ)、7,4′-二甲氧基穗花杉双黄酮(VII)、莽草酸(VIII)、丁香酸(Ⅸ)、咖啡酸(Ⅹ)。结论:化合物Ⅸ、Ⅹ是首次从该植物中分离得到。     

不同产地石上柏指纹图谱及主要双黄酮含量测定

目的:建立不同产地石上柏双黄酮的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,用于石上柏药材质量的评价。方法:采用Dikma Diamons C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长330 nm,进样量10μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对10批样品进行共有峰确认及相似度评价。运用SPSS 17.0统计学软件对HPLC指纹图谱进行聚类分析和主成分分析。结果:方法学考察指标的RSD均2.0%,表明在该色谱条件下,仪器精密度良好,样品在24 h内稳定性良好,方法准确度良好;根据10批药材测定结果表明,各共有峰较稳定,具有指纹图谱特征性,可初步确定为石上柏双黄酮的指目标成分群。在对照指纹图谱上共标定出9个色谱峰作为指纹图谱共有峰,指认了其中的3个化学成分,分别为穗花杉双黄酮、银杏双黄酮、扁柏双黄酮。10批样品的相似度计算结果均0.850,说明各产地的药材有较好的一致性;通过聚类分析可将10批样品可分为3类,第一类是重庆和四川产地的石上柏,第二类是贵州产地的石上柏,第三类是广西产地的石上柏,并且2个主成分的累计方差贡献率为98.096%。结论:该方法精密度高,重复性好,操作简便,可为石上柏药材的质量评价提供参考。     

石上柏双黄酮类和酚酸类成分体外抗氧化和抗肿瘤活性研究

目的:研究石上柏双黄酮类和酚酸类成分体外抗氧化和抗肿瘤活性。方法:从石上柏中分离出的穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、银杏双黄酮、莽草酸、丁香酸及咖啡酸取适量,配置成不同浓度的溶液(20、40、60、80、100、120μg/m L)。以维生素C、槲皮素为对照品;采用1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)、2,2'-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基清除法和铁离子还原能力(FRAP)实验,分别考察每个化合物的抗氧化活性。通过MTT实验,以鼻咽癌CNE-1细胞株和CNE-2细胞株为对象,以顺铂为对照品,考察每个化合物的抗肿瘤活性。结果:抗氧化活性顺序:扁柏双黄酮银杏双黄酮穗花杉双黄酮丁香酸咖啡酸莽草酸;抗肿瘤活性顺序:扁柏双黄酮银杏双黄酮穗花杉双黄酮丁香酸咖啡酸莽草酸。结论:石上柏双黄酮类的抗氧化活性和抗肿瘤活性均强于酚酸类。     

微波辅助离子液体提取石上柏穗花杉双黄酮工艺的优化

目的优化微波辅助离子液体提取石上柏穗花杉双黄酮工艺。方法以微波功率、提取时间、提取温度为影响因素,穗花杉双黄酮提取率为评价指标,响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为提取溶剂2.0 mmol/L[C6mim][PF6]溶液,料液比1∶15,微波功率500 W,提取时间39 min,提取温度46℃,穗花杉双黄酮提取率0.65%。结论该方法简便、准确、高效,可用于微波辅助离子液体提取石上柏穗花杉双黄酮。