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目的:克隆和表达结核分枝杆菌抗原 MPT64,并分析其免疫活性。方法:以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组 DNA 为模板,PCR 扩增 mpt64基因,克隆至 T 载体 pMD18-T,转化入 E.coli DH5α,菌落 PCR 鉴定阳性克隆并测序分析。将测序正确的 pMD18-T-mpt64的 mpt64基因亚克隆至表达载体 pET-28a,构建重组质粒 pET-28a-mpt64,转化 E.coli BL21中,PCR 和双酶切鉴定阳性重组子,IPTG 诱导 MPT64表达,亲和层析纯化,western-blot 分析其免疫活性。结果:成功构建 pET28a-mpt64重组表达质粒,表达、纯化获得分子量约为26kDa 的 MPT64,并能被结核病人血清识别。结论:克隆表达获得具有免疫活性的重组结核分枝杆菌 MPT64蛋白。 相似文献
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作者对2000~2002年国家食品药品监督局(国家食药局,SFDA)批准的仿制化学药品进行统计分析,得出了最近3年来我国化学药品仿制的概况,包括总体趋势、主要仿制品种、排在前10位的仿制地区和排在前5位的仿制企业、仿制药品的剂型分布、药理作用类别分布的状况。然后根据分析结果,文中提出4项发展我国仿制药品事业的建议。 相似文献
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冬虫夏草是我国特产的一种名贵中药,具有补益肺肾、止咳化痰之功,常用于肾虚、肺气虚或肺肾两虚所致的疾病。正品冬虫夏草来源于麦角菌科真菌冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.寄生在蝙蝠娥科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。由于需求量持续增大,而资源几乎枯竭,野生冬虫夏草的价格一路走高。国际市场上,冬虫夏草的售价每吨甚至高达70多万美元。 相似文献
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目的:重组表达结核分枝杆菌融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3,分析其诊断结核病的价值。方法:重组 PCR扩增 TB10.4-Hsp16.3融合基因,克隆至 pMD18-T 载体,测序鉴定后,亚克隆至原核表达载体 pET28a(+),PCR 和双酶切鉴定阳性重组子,将重组 DNA 转化 E.coli BL21,筛选阳性菌株,经 IPTG 诱导表达融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3,超声裂解菌体,对包涵体进行变性溶解和复性,金属螯合层析纯化,Western blot 分析其免疫学活性,ELISA 评价其诊断结核病的价值。结果:成功获得约750bp 的融合基因 TB10.4-Hsp16.3,构建了融合蛋白的重组表达质粒 pET-TB10.4-Hsp16.3,表达、纯化获得分子量约29kDa 的融合蛋白,能被结核病患者血清特异识别;其 ELISA 诊断结核病的灵敏度为89.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为89.1%,诊断效率达90.0%。结论:成功表达可用于结核病诊断的结核分枝杆菌融合蛋白 TB10.4-Hsp16.3。 相似文献
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目的建立抗骨增生胶囊中淫羊藿苷的检测方法。方法色谱条件为C18色谱柱;柱温为室温;流动相:乙腈-水(30:70);流速1.0ml/min;检测波长:270nm。结果淫羊藿苷在0.235~1.175g/ml范围内具有良好的线性关系,r=0.9992。加样回收率为99.46%(RSD为1.74%,n=6)。结论该方法简便,准确度高。可有效控制抗骨增生胶囊的质量。 相似文献