麦冬多糖MDG-1的分离纯化和结构分析

目的分离纯化麦冬多糖抗心肌缺血的活性部位，得到相对分子质量均一的组分MDG-1，并进行结构分析。方法水提醇沉得麦冬粗多糖，超滤后经DEAE Sepharose FF柱和Sephadex G25柱色谱纯化后得MDG-1。经完全酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、¹H NMR及¹³C NMR等研究分析MDG-1的化学结构。结果和结论 MDG-1为β-D-果聚糖，易溶于水，数均分子量(M_n)为3 400，重均分子量(M_w)为4 800，峰尖分子量(M_p)为5 000，以2→1连接的呋喃型果糖为主，平均每2.8个主链残基上有一个Fruf(2→6)Fruf(2→分支)。该多糖还含有微量葡萄糖(果糖∶葡萄糖=35∶1)，可能连接在多糖的还原端。     

抗AFP—AKP脂质体在体外检测中的应用

采用偶联抗ＡＦＰ的内含碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的脂质体（抗ＡＦＰ－ＡＫＰ脂质体）可以检测人血清ＡＦＰ，其灵敏度达放免测定（双抗体法）的水平。抗ＡＦＰ－ＡＫＰ脂质体、人血清和补体三者结合形成的复合的经３５℃作用３０ｍｉｎ后，脂质体溶解，其内含的酶释放出底物反应显色明显，当人血清ＡＦＰ〈２０ｎｇ／ｍｌ时，不形成复合物或形成微量复合物，显色不明显，且稳定性可维持３个月以上，故为检测血清中的抗原成分提供了一个     

白芍总苷对EAT小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的建立实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)小鼠模型,观察不同剂量白芍总苷(TGP)治疗组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)和Th17细胞比例及其功能的变化。方法将EAT模型小鼠随机共分为模型(model)组、高剂量TGP (THD)组、中剂量TGP (TMD)组、低剂量TGP(TLD)组和雷公藤多苷(TII)组共5组;real-time PCR检测脾细胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的表达;流式细胞计量术检测脾细胞中Treg和Th17细胞的比例;ELISA检测血清中TGF-β1和IL-17的水平;化学发光法检测血清中抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的水平。结果 TGP处理组(包括低、中和高剂量组)Th17细胞比例较模型组明显降低(P0.001);中和高剂量TGP组Foxp3 mRNA表达量较模型组明显增高(P0.05); Treg细胞比例较模型组明显增高(P0.01,P0.05);IL-17浓度较模型组明显降低(P0.01,P0.05);TGAb浓度较模型组明显降低(P0.05);中剂量TGP组TGF-β1浓度较模型组显著增高(P0.01)。结论 TGP能调节Treg/Th17免疫平衡,有利于EAT疾病的转归,其中以中和高剂量TGP组疗效显著。     

左归饮及其部分组方对老年小鼠自由基代谢的影响

背景补肾法正逐步成为中医老年病学中抗衰老的治疗方法之一.目的探讨滋补肾阴方左归饮对老年小鼠自由基代谢血清丙二醛含量,超氧化物歧化酶活性的影响.设计完全随机对照实验.单位广东医学院微生物与免疫学教研室.对象实验于2002-09/2004-07在皖南医学院免疫学研究室完成,选择四川省医学科学院实验动物研究所提供的40只雄性老年封闭群小鼠.随机分为老年对照组、左归饮组、单味熟地组及去熟地组,每组10只.左归饮由熟地、山药、枸杞、炙甘草、茯苓、山茱萸,按966345比例组成.常规水煎,左归饮组浓缩至含生药0.577 5 g/mL,单味熟地组浓缩至含生药0.157 5g/mL,去熟地组浓缩至含生药0.42 g/mL,配成100 g/L浓度的药水混合液.干预左归饮组、单味熟地组、去熟地组饮用左归饮、熟地、去熟地,4次/d,1.5 mL/次,共75 d,给药期间不提供其他饮用水.老年对照组小鼠饮用自来水.饮用75 d后,摘眼球取血2 mL,留存血清,用硫代巴比妥酸法测定血清中丙二醛含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清中超氧化物歧化酶活性,比色法测定血清总抗氧化能力.主要观察指标①血清中丙二醛含量.②血清中超氧化物歧化酶活性.③血清总抗氧化能力检测.结果老年对照组死亡1只,单味熟地组死亡3只,最终36只小鼠进入结果分析.①血清中丙二醛含量左归饮组和单味熟地组低于老年对照组[(5.280±1.204)μmol/L和(5.886±2.717)μmol/L,(9.533±3.494)μmol/L,(q=3.641～4.657,P＜0.05)].左归饮组和单味熟地组老年小鼠血清中丙二醛含量基本一致.②超氧化物歧化酶活性左归饮组和去熟地组高于老年对照组[(7.008±0.782)mkat/L和(6.989±0.809)mkat/L,(5.908±0.392)mkat/L,(q=3.641～4.657,P＜0.05)],左归饮组和去熟地组超氧化物歧化酶活性基本一致.单味熟地组与老年对照组超氧化物歧化酶活性基本一致.③总抗氧化能力左归饮组和单味熟地组虽然高于老年对照组,去熟地组低于老年对照组,但差异均无显著性意义(P＞0.05).结论左归饮能明显降低老年小鼠血清中丙二醛含量,并能提高血清中超氧化物歧化酶活性,表明左归饮在改善老年机体自由基代谢、增强超氧化物歧化酶活性和减少丙二醛积蓄对机体损伤方面具有明显作用.     

拯阳汤对阳虚小鼠红细胞免疫功能及胸腺细胞凋亡的影响

目的:观察不同剂量拯阳汤对阳虚小鼠红细胞免疫功能及胸腺细胞凋亡的影响。方法:检测红细胞免疫粘附促进因子、红细胞免疫粘附抑制因子的活性以及凋亡细胞。结果:拯阳汤对阳虚小鼠的红细胞免疫功能具有促进作用,在一定剂量范围内与红细胞免疫粘附促进因子成正相关,与红细胞免疫粘附抑制因子呈负相关;对胸腺细胞凋亡的抑制作用在一定剂量范围内成正比,剂量越大,作用越强。结论:拯阳汤能增强阳虚小鼠红细胞免疫功能,对胸腺细胞凋亡具有抑制作用,其药理作用与剂量有关。     

大蒜素对白色念珠菌感染的免疫抑制小鼠巨噬细胞功能的影响

目的:探讨大蒜素对白色念珠菌感染免疫抑制小鼠巨噬细胞功能的影响。方法:将实验小鼠随机分为预防组、治疗组和感染组。三组小鼠于实验前3 d腹腔一次性注射环磷酰胺200 mg/kg。实验时预防组小鼠灌服大蒜素7 d,其余两组灌服等量生理盐水;第8天各组小鼠尾静脉接种2×107/mL白色念珠菌菌液,同时给予预防组和治疗组分别灌服大蒜素7 d,感染组灌服等量生理盐水7 d;继之,收集三组小鼠腹腔巨噬细胞,制备巨噬细胞培养上清液测定其NO和IL-12的表达。结果:与感染组相比,大蒜素可提高预防组和治疗组小鼠腹腔巨噬细胞NO、IL-12产生水平(P<0.01)。结论:大蒜素可提高白色念珠菌感染模型小鼠巨噬细胞功能。     

大蒜素对小鼠性腺轴影响的实验研究

目的:探讨大蒜素对小鼠性腺轴的影响,为大蒜素的进一步开发利用提供一定线索。方法:健康ICR清洁小鼠,按性别随机分成3组实验组和3组对照组。实验组分别连续灌服大蒜素14d、21d和28d,对照组同期分别灌服生理盐水。采用ELISA法检测各组小鼠血清促性腺激素释放激素(GnRH)、黄体生成素(LH)、雄性小鼠的睾酮(T)含量,以及雌性小鼠的雌二醇(E2)含量。结果:雄性小鼠连续灌服大蒜素14 d时实验组LH明显低于对照组(P<0.05),当28 d时实验组小鼠血清GnRH明显低于正常对照组(P<0.05),实验组睾酮有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。雌性小鼠GnRH、LH、E2变化不明显(P>0.05)。结论:大蒜素对雄性小鼠性腺轴的GnRH具有一定调节作用,对LH、T调节不明显,大蒜素对雌性小鼠性腺轴影响不明显。     

免疫抑制小鼠系统性白色念珠菌感染模型建立的研究

目的:建立免疫抑制小鼠系统性白色念珠菌感染模型,为感染性疾病的研究和治疗提供科学依据。方法:给予昆明种正常小鼠腹腔内一次性注射环磷酰胺(CY)200 mg/kg,观察其对小鼠一般状况和白细胞数的影响。继之,分别给予前述小鼠尾静脉接种1.5×105/ml(低浓度组)、1.5×106/ml(中浓度组)、1.5×107/ml(高浓度组)的白色念珠菌菌液,建立感染模型。结果:正常小鼠腹腔注射CY后,各组均出现喜静、少动、消瘦、饮食明显减少、多尿、皮毛欠光滑等现象以及白细胞数的降低。小鼠尾静脉分别接种1.5×105/ml(低浓度组)、1.5×106/ml(中浓度组)、1.5×107/ml(高浓度组)浓度的白色念珠菌菌液后,连续观察3周。低浓度组小鼠死亡率为20%,中浓度组死亡率为50%,高浓度组则全部死亡。组织真菌培养证实白色念珠菌已经侵染小鼠内脏,证明感染模型建立成功。结论:CY能够有效降低小鼠白细胞数,导致免疫力低下。在此基础上经尾静脉接种合适浓度的白色念珠菌可建立小鼠系统性白色念珠菌感染模型。     

可溶性Fas分子与反复自然流产及自身抗体的关系

[目的]探讨血清可溶性Fas分子(sFas)与反复自然流产(RSA)及抗心磷脂抗体(ACA)、抗宫内膜抗体(EmAb)的关系.[方法]采用酶联免疫吸附法检测62例RSA组、34例正常妊娠妇女组血清sFas及ACA、EmAb.[结果](1)RSA组ACA与EmAb共同出现的阳性率为14.52%,明显高于正常妊娠妇女组(P<0.05); RSA组ACA与EmAb的出现呈正相关,Rs为0.542(P<0.01); (2)RSA组sFas水平为(1051.44±420.87)pg/ml,明显高于正常妊娠妇女组的(520.19±253.82)pg/ml(P<0.01); ACA和EmAb共同阳性RSA组sFas水平为(1307.70±356.45)pg/ml,明显高于非ACA和EmAb共同阳性RSA组(1007.92±418.27)pg/ml(P<0.05).[结论]ACA与EmAb的共同出现是RSA发生的危险因素,两种抗体的产生呈正相关;血清sFas水平升高是RSA发生以及两种自身抗体共同出现的可能原因.