嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤治疗中的应用

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能.使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR.CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别能力,靶向发挥T细胞的效应功能.目前CAR-T细胞在临床治疗白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的效果.但由于实体肿瘤的某些特点,CAR-T细胞在临床治疗实体肿瘤的实践中存在部分障碍.随着研究的深入,三代CAR-T细胞、双重特异性CAR-T细胞等的应用将为CAR-T细胞临床治疗实体肿瘤开拓道路.本文就近年来CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用作一综述.     

马齿苋的抗低氧作用及其机制研究

目的观察不同浓度马齿苋水提液对低氧小鼠的保护作用及其机制.方法以生理盐水和人参总皂苷为对照,观察不同浓度马齿苋水提液对密闭低氧条件下小鼠存活时间的影响,采用生物化学方法测定丙酮酸激酶（PK）和磷酸果糖激酶（PEK）活性,荧光素酶法测定ATP含量,定磷法测定Na＋,K＋-ATP酶活性,分光光度法测定乳酸含量,2,4二硝基苯肼比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性.结果 （1）0.5,1.0,2.0g/ml 3种浓度的马齿苋水提液分别延长密闭低氧小鼠的生存时间24%,36.5%和27.4%;（2）1g/ml马齿苋水提液可明显增强低氧小鼠心、脑细胞PK、PEK活性,缓解细胞内ATP含量下降幅度,提高Na＋,K＋-ATP、Ca2＋,Mg2＋-ATP和LDH等酶的活性.结论马齿苋水提液可提高小鼠耐低氧能力,机制之一可能是其促进低氧小鼠无氧酵解关键酶的活性,进而缓解因低氧引起能量代谢障碍所致的细胞损伤.     

人参总皂苷对缺氧小鼠EPO表达影响

人参总皂苷是人参的主要生物活性成分。有报道,人参总皂苷有抗缺氧作用，可明显延长低压或常压缺氧条件下小白鼠的存活时间。缺氧状态下红细胞及血红蛋白含量的增加可提高机体缺氧耐受能力。促红细胞生成素（EPO）增多导致红细胞增多和血红蛋白含量增高是缺氧引起的血液系统主要代偿性反应之一。本实验就人参总皂苷对缺氧小鼠血液中红细胞及血红蛋白含量的影响及其机制进行了探讨。现将结果报道如下。     

氨基酸转运体组分SLC3A2在肿瘤发生发展中的作用北大核心CSCD

SLC3A2(solute carrier family 3 member 2)是来自SLC3家族的一种Ⅱ型跨膜糖蛋白,是氨基酸转运体(heteromericamino acid transports,HATs)的重链组成部分。HATs在细胞中广泛表达并介导了几乎所有必需氨基酸的跨膜转运,保证细胞内氨基酸水平的稳定,对维持细胞正常的生物学功能具有重要作用。越来越多的研究报道,SLC3A2在多种肿瘤中高表达并参与细胞的恶性转化,然而其具体作用机制仅有初步报道尚未阐明。现就SLC3A2的结构、功能及其在肿瘤发生发展过程中的作用机制等综述如下。     

醛固酮抑制肾小球系膜细胞的自噬激活加速其在氧化应激状态下的凋亡

目的 探讨醛固酮对肾小球系膜细胞自噬激活的影响。 方法 通过3种经典的自噬活性检测方法检测醛固酮对体外培养的系膜细胞自噬的影响:(1)蛋白质印迹法检测不同浓度的醛固酮干预肾小球系膜细胞系(HMCL)后自噬相关的蛋白标记物LC3、SQSTM1/P62的表达水平变化;(2)向系膜细胞系转入GFP-LC3的真核表达质粒,用激光共聚焦显微镜观察醛固酮干预下系膜细胞荧光自噬点数量的变化并进行统计学分析;(3)通过电子显微镜观察醛固酮干预下系膜细胞自噬泡数量的变化并进行统计学分析。通过光镜下形态学观察及蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)剪切体的表达情况,分析醛固酮干预下系膜细胞在过氧化氢刺激后凋亡水平的变化。 结果 3种方法均证实高生理剂量醛固酮可以抑制系膜细胞自噬激活:(1)10^-7 mol/L醛固酮干预12 h后自噬标记蛋白LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化减少约40%;(2) 10^-7 mol/L醛固酮干预12 h能够降低饥饿及雷帕霉素诱导的系膜细胞自噬点数量,降低的比率分别为60%和47%;(3)醛固酮干预后可减少饥饿和雷帕霉素诱导的系膜细胞自噬泡的增加。10^-7 mol/L醛固酮干预系膜细胞12 h后接受过氧化氢2.5×10^-6 mol/L刺激较对照组细胞凋亡的比率明显增加(P <0.05)。 结论 高生理浓度的醛固酮能够抑制系膜细胞的基础自噬激活并促进系膜细胞在氧化应激条件下的凋亡。     

马齿苋总黄酮抗小鼠缺氧作用及其机制研究

目的:筛选马齿苋抗缺氧作用有效成分,并对筛选出的有效成分进行作用机制的研究.方法:马齿苋抗缺氧作用有效成分筛选:将70只小鼠随机分为总黄酮组、总生物碱组、多糖组、酸性成分组、碱性成分组、人参总皂苷组(阳性对照)和生理盐水组(阴性对照),每组10只.各组小鼠予以相应药物灌胃1周后,进行常压缺氧暴露生存时间实验,筛选出马齿苋抗缺氧作用的有效成分.马齿苋总黄酮抗缺氧机制研究:将90只小鼠随机分为总黄酮组、人参总皂苷组和生理盐水组,各组再分成3个亚组,即缺氧暴露12、24和36 h组,每组10只.将小鼠置于氮氧混合气(10% O2 90% N2)舱内分别缺氧暴露12、24和36h后,测定血红细胞计数、血红蛋白含量、血细胞压积、血浆红细胞生成素(erythropoietin, EPO)以及肾脏与大脑皮质EPO mRNA的表达水平.结果:与生理盐水组比较,马齿苋总黄酮组小鼠缺氧暴露生存时间明显延长;马齿苋总黄酮组小鼠不同缺氧时段肾脏和大脑皮质EPO mRNA的表达水平明显增加,血浆EPO、红细胞计数和血红蛋白含量亦明显升高.结论:总黄酮是马齿苋抗缺氧作用的有效成分,其延长小鼠缺氧生存时间的机制可能是促进EPO的表达以及红细胞和血红蛋白的生成.     

Musashi-1在肝细胞肝癌中的表达及其与临床预后的关系

目的 研究Musashi-1在肝细胞肝癌患者癌组织及癌旁组织中的表达,探讨其与临床预后的关系及对肝癌细胞转移侵袭的影响.方法 收集我院2000年6月至2010年6月间138例行根治性肝细胞肝癌切除术患者的术中肝癌以及癌旁样本,利用免疫组织化学方法检验癌组织与癌旁组织中Musashi-1的表达水平;通过Pearson x2检验和Fisher精确检验分析Musashi-1与患者临床特征以及预后之间的关系.利用qPCR检测癌组织和癌旁组织中CD133的表达并对癌组织中Musashi-1与CD133的表达水平进行相关性分析.构建稳定过表达Musashi-1的人肝癌细胞系SMMC-7721细胞,利用Sphere成球实验检测Musashi-1对肿瘤细胞成球能力的影响,利用肿瘤侵袭实验探究Musashi-1对肿瘤细胞侵袭能力的影响.结果 138例肝细胞肝癌患者中有105例(76.1％)癌组织中Musashi-1的表达高于癌旁组织(P＜0.05).Musashi-1的表达与甲胎蛋白(AFP)水平、腹水、远处转移有关(P＜0.05),而与性别、年龄、乙肝病史、肿瘤大小、子灶、门静脉癌栓、镜下癌栓等无关.Musashi-1的表达水平对患者总体生存率和无瘤生存率有显著影响(P＜0.05).肝癌组织中CD133 mRNA的表达高于癌旁组织(P＜0.05),且CD133的表达与Musashi-1的表达呈正相关(R2=0.78,P＜0.001).体外实验证实过表达Musashi-1的SMMC-7721细胞的成球能力和侵袭能力增强.结论 Musashi-1在肝细胞肝癌中表达增加,对肝细胞肝癌的进展可能具有促进作用,其表达水平可以为判断预后提供参考.